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附 2:本 科 毕 业 论 文 ( 设 计 ) 工 作 记 录学 院 化学化工学院专 业 09 级制药工程 学 号 200908120212指导教师 李文丽 附 3:毕业论文(设计)选题申请表(学生用表)学院: 时间: 年 月 日选题名称 菌菇多糖提取及体外抗氧化性研究学生姓名 陈博 学号 200908120212专业 09 级制药工程选题情况选题来源 导师推荐 学生自拟 其它选择本题目原因菌菇多糖作为“生物反应调节剂” ,具有调节机体免疫力、抗肿瘤、抗病毒、健胃护肝、降血脂、血糖和胆固醇、抗血栓、抗衰老、抗辐射、祛痰镇咳等多种药理作用。此外,菌菇多糖还可以迅速修复破损的细胞组织。食用真菌有一种成份被称为粘多糖,它有两大特点,一是亲和力好;二是渗透力强,这两大特点决定了它会很快被人体细胞吸收。同时菌菇多糖具有极高的营养价值。比如,猴头菇,其蛋白质含量高达 26.3%,金针菇的蛋白质含量高达 16.3%,这两种食用菌中所含蛋白质是我们平时所摄取蛋白质的二到三倍,直接补充人体对蛋白质的需求,满足细胞对蛋白质的营养需要。基于以上菌菇多糖特点,所以选择本题目。指导教师意见指导教师签字: 年 月 日学院意见院长签字:年 月 日附 4:毕业论文(设计)任务下达书学生陈博(学号 200908120212):现将毕业论文(设计)任务下达书发给你。毕业论文(设计)任务下达书内容如下:一、毕业论文(设计)题目菌菇多糖提取及体外抗氧化性研究二、主要内容香菇和鸡腿菇分别经热水浸提, 反复醇提、洗涤、真空干燥后得到两种多糖提取物。通过多糖抗食用油脂的氧化作用、利用Fenton 反应检测对羟基自由基( OH) 的清除作用、对邻苯三酚自氧化系统产生的超氧阴离子自由基( O2- ) 的清除作用以及在模拟胃液条件下清除NO2- 的作用 , 对这两种不同来源的食用真菌多糖的体外抗氧化活性进行了研究。结果表明:两种多糖提取物都具有体外抗氧化性能, 香菇多糖提取物的抗活性氧自由基能力和清除NO- 的能力优于鸡腿菇多糖提取物。三、基本要求通过查阅相关文献资料,设计好具体的研究方案,经过大量和细致的实验工作,可得到系列实验数据。四、主要参考文献 1 Marx J L. Ox ygen f ree radicals linked t o many d iseases J .S cien ce, 1987, 235: 529-531. 2 Yang J H, Linb H C, Mau b J L. Ant iox idant propert ies of s ever al com mercial mus hrooms J . Food Ch emis t ry, 2002,77: 229-235. 3 Makot o Miyauch i, Hideaki Nakamura, Fumio Furukaw a, e tal . Promoting ef f ects of combined an tiox idant and s od iumnit rit e t reatmen t on f or est omach carcinogenesis in rat s af terinit iat ion w ith N -m ethyl-N-nit ro-N-nit ros o-guan idine J .Cancer Let t er s, 2002, 178: 19-24. 4 Mats umura Y, Egamia M, S at akea C, e t al . Inhib itoryef f ect s of pept ide-bound polys accharides on lipid oxidation inemu lsions J . Food Ch emis t ry, 2003, 83: 107-119. 5 Liu F, Ooi V E C, Chang S T . Free radical scavenging act ivitiesof mu shroom polysaccharide ex tract J . Lif e Sci ences ,1997, 60: 763-771. 6 Lee B C, Bae J T , Pyo H B. Biological act ivit ies of thepolysaccharides pr od uced f rom su bmer ged cu lture of th e edible Basidiomycet e Grif oal f r ond osa J . En zyme and Micr obial T echnology, 2003, 32: 574-581. 7 梅盛华. 碘量比色法测定食品油脂中过氧化值的研究 J . 海峡预防医学杂志, 2000, 6( 2) : 48. 8 李平. 山茱萸多糖PFCC 抗氧化性能研究 J . 食品工业科技, 2003, 24( 5) : 36-39. 9 张宏. 四种邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性方法的比较 J . 内蒙古大学学报, 2002, 33 ( 6) : 677-681.五、进程安排阶 段 起 止 日 期 主 要 内 容1 2012 年 9 月 10 日2012 年 10 月 31 日 论文选题,开题,开展实验2 2012 年 11 月 1 日2013 年 2 月 23 日 查资料,写毕业论文提纲3 2013 年 2 月 24 日2013 年 4 月 15 日 完成论文初稿4 2013 年 4 月 16 日2013 年 5 月 6 日 论文修改,定稿,答辩六、本毕业设计(论文)任务下达书于 201*年*月*日发出。毕业设计(论文)应于*年*月*日前完成后交指导教师,由指导教师评阅后提交毕业论文(设计)答辩委员会。指导教师(签名): 学生(签名): 注:毕业设计(论文)任务下达书一式两份,一份给学生,一份留学院存档。 附 5:本科毕业论文(设计)文献综述(学生用表)学生姓名 陈博 学号 200908120212题目 菌菇多糖提取及体外抗氧化性研究生物体内的有氧代谢过程不断地产生自由基,当它的存在超出机体防护系统所具有的清除能力,就会直接或间接地引起蛋白质变性、酶失活、多糖降解、DNA 链断裂、生物膜结构损伤、细胞解体乃至机体病变和死亡 1 。许多抗氧化补充剂或食品中包含的抗氧化物质将对减少机体的损伤提供帮助 2 。选择水溶性的多糖或蛋白类, 且有温和的抗氧化作用的物质, 更是生产安全食品包括油脂所期待的4 。而且许多研究已经证明菇类食品中的多糖是有效的,没有毒性的, 具有清除自由基和代谢调节作用的天然物质 56 。目前关于香菇多糖和鸡腿菇多糖生物活性的研究主要集中于免疫调节作用, 抗肿瘤活性, 关于它们的体外抗氧化活性研究未见报道。因此, 本文将研究香菇和鸡腿菇两种食用菇多糖提取物的体外抗氧化作用, 为多糖抗氧化作用的进一步研究和利用提供科学依据。实验的基本步骤如下;香菇和鸡腿菇分别经热水浸提, 反复醇提、洗涤、真空干燥后得到两种多糖提取物。通过多糖抗食用油脂的氧化作用、利用Fenton 反应检测对羟基自由基( OH) 的清除作用、对邻苯三酚自氧化系统产生的超氧阴离子自由基( O2- ) 的除作用以及在模拟胃液条件下清除NO2- 的作用, 对这两种不同来源的食用真菌多糖的体外抗化活性进行了研究。实验方法多糖提取物的制备将已干燥的香菇与鸡腿菇粉碎, 过40 目筛, 加入10 倍体积的蒸馏水,80 C 下搅拌提取5 h, 浓缩提取液。浓缩液用流水透析48 h, 适当浓缩, 然后加入3 倍体积= 0. 95 的乙醇沉淀, 静置过夜, 离心收集沉淀。沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤, 抽滤瓶抽干。然后再将沉淀物溶于水, 重复醇提、洗涤, 50 C 真空干燥后分别得到浅褐色香菇多糖提取物和鸡腿菇多糖提取物。多糖提取物的化学分析采用3, 5-二硝基水杨酸法( DNS 试剂法) 测定多糖提取物中的多含量; 凯氏定氮法测定多糖提取物中的蛋白质含量;用乌氏粘度计测定多糖提取物的特性粘度; 并将多糖提取物进行红外光谱分析。抗油脂氧化性能分析取新炼制的猪油和豆油若干份, 每份10 mL, 分别加入一定量的Vc、香菇多糖提取物和鸡腿菇多糖提取物, 置于( 601)C恒温振荡器中, 强化氧化, 与空白对照,每隔一定时间取样检测猪油和豆油的过氧化值( POV 值) 。以POV 值来表示油脂的氧化速度,进而衡量抗氧化剂的活性。POV 值测定采用碘量分光光度法 7 。抗活性氧自由基能力分析超氧阴离子自由基( O2- ) 和羟基自由基( OH) 是生物体内存在的主要活性氧自由基, 活性氧自由基与生命现象的关系最为密切。因此, 通过测定OH 和O2- 的清除率来评价多糖提取物抗活性氧自由基的能力。( 1) 清除羟基自由基的分析方法: 利用Fenton反应, 检测各种自由基清除剂对OH 的清除作用 8 。由于OH 可特异地使藩红花的红色褪色, 根据褪色程度用比色法来衡量OH 的含量, 采用固定反应时间法, 在波长520 nm 处测量含被测物反应液的吸光度, 并与空白液比较, 从而测定被测物对OH 的清除作用。( 2) 清除超氧阴离子自由基的分析方法: 利用邻苯三酚自氧化反应测定自由基清除剂对其产生的超氧阴离子自由基的清除作用。实验按照改进的邻苯三酚自氧化法( 简称325 nm 法) 9 进行。体外模拟胃液的NO2- 清除反应取不同浓度的多糖提取物溶液1 mL, 加入5 ug / mL 的NaNO2 标准液0. 6 mL, 用柠檬酸缓冲液调pH= 3,混匀后加塞置37 C 恒温水浴中避光反应30 min,准时取出各管 10 。用盐酸萘乙二胺比色法测定各管结果表明: 两种多糖提取物都具有体外抗氧化性能, 香菇多糖提取物的抗活性氧自由基能力和清除NO2- 的能力优于鸡腿菇。实验结果表明两种食用菇类多糖提取物具有相当显著的抗氧化活性, 并且香菇多糖提取物的作用好于鸡腿菇多糖提取物。值得注意的是香菇多糖提取物中的蛋白质/ 多糖比率和平均分子量均高于鸡腿菇多糖提取物。红外光谱分析结果表明香菇多糖提取物为a-吡喃多糖, 鸡腿菇多糖提取物为b-吡喃多糖。香菇和鸡腿菇多糖提取物都具有较明显的抗氧化活性, 可开发为抗衰老保健食品辅料或功能因子。两种多糖提取物都为混合物, 进一步的分离纯化和探讨多糖抗氧化作用的机制仍需要进行。不够可加附页附 6:本科毕业论文(设计)开题报告书(学生用表)学生姓名 陈博 学号 200908120212题目 菌菇多糖提取及体外抗氧化性研究1.选题意义及可行性分析菌菇多糖作为“生物反应调节剂” ,具有调节机体免疫力、抗肿瘤、抗病毒、健胃护肝、降血脂、血糖和胆固醇、抗血栓、抗衰老、抗辐射、祛痰镇咳等多种药理作用。此外,菌菇多糖还可以迅速修复破损的细胞组织。食用真菌有一种成份被称为粘多糖,它有两大特点,一是亲和力好;二是渗透力强,这两大特点决定了它会很快被人体细胞吸收。同时菌菇多糖具有极高的营养价值。比如,猴头菇,其蛋白质含量高达 26.3%,金针菇的蛋白质含量高达16.3%,这两种食用菌中所含蛋白质是我们平时所摄取蛋白质的二到三倍,直接补充人体对蛋白质的需求,满足细
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