基础长海郭亚军 临床长海王雅杰名解：1.共刺激分子: 表达于抗原提呈细胞（APC ）表面，与 T 细胞表面相应的配体结合，为 T 细胞活化传递第二信号的应答成分。 如 B7-1(CD80)和 B7-2(CD86),可与 T 细胞表面的同质二聚体 CD28 分子结合，促进 T 细胞应答，产生 IL-2 和初始 T 细胞分化成效应 T 细胞和记忆 T细胞。2.分子靶向治疗：Molecular targeted therapy, 是指利用肿瘤组织或细胞所具有的特异性(或相对特异的)结构分子作为靶点，使用某些能与这些靶分子特异结合的抗体、配体等达到直接治疗 或导向治疗目的的一类疗法。分子靶向药物主要有两类：单克隆抗体 (贺赛汀、美罗华、Avastin 等)、和小分子化合物（EGFR 酪氨酸激酶抑制剂 Glivec(STI571, 格列卫) 、ZD1839(Iressa)、OSI774 (Tarceva)等） 。3.RNA 干扰: RNA interference，是指一种正常生物体内或分子生物学上由双链 RNA 诱发的基因沉默的现象。当细胞中导入与内源性 mRNA 编码区同源的双链 RNA 时，外源 dsRNA 进入细胞后产生的小分子干扰 RNA（siRNA）的反义链和多种核酸酶形成了沉默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC) ，结合并切割 mRNA 使其降解而导致基因表达沉默。发生在转录后水平，又称为转录后基因沉默。RNAi 具有特异性和高效性。这种技术已经成为研究基因功能的重要工具，在病毒、遗传性疾病及肿瘤病的治疗方面发挥重要作用。问答：1. Herceptin 作用机制Herceptin(贺赛汀)是一种针对 HER-2/neu 原癌基因产物的人/鼠嵌合单抗，能特异地作用于 HER-2 受体过度表达的乳腺癌细胞。1998 年被美国 FDA 批准上市，无论单药还是与化疗药物合用治疗 HER-2/neu 过度表达的乳腺癌均取得了明显疗效。作用机制包括介导对过度表达 HER-2/neu 肿瘤细胞的 CDC、ADCC 等机制来抑制肿瘤生长；抑制 HER-2/neu 蛋白与 RTK 超家族的其它成员发生交联形成异质二聚体，减弱细胞生长信号的传递；介导 HER-2/neu 受体的内吞降解以减少其细胞表面密度，抑制肿瘤的进一步生长；通过诱导 P27kipi 和 RB 相关蛋白 p130，大量减少 S 期细胞数目；下调细胞表面的 HER-2/neu 蛋白；减少血管内皮生长因子的产生。2. 常规 PCR 原理及设计 PCR 参数注意事项原理：聚合酶链反应是利用针对目的基因所设计的一对特异寡核苷酸引物，以目的基因为模板进行的 DNA 体外合成反应，包括变性、退火、延伸三个基本过程。经过 PCR 扩增后，扩增 产物大小由两个引物与模板的结合位点决定，产物以指数级数增加，可达到目的片段的大量扩增。设计 PCR 参数注意事项：1、 模板：DNA 或 RNA ,RNA 作模板时，首先要反转录为 cDNA，若为环状质粒，最好先用酶将其切开为线状分子。模板核酸的量，浓度，及纯化程度都是 PCR 成败的关键。基因组 DNA 做模板：1ug 左右，质粒 DNA 做模板时用 10ng 左右。DNA 中不能混蛋白酶、核酸酶、DNA 聚合酶抑制剂及能与 DNA 结合的蛋白等。2、 引物：引物决定 PCR 扩增产物的特异性与长度。长度：16-30bp,过短降低特异性，过长退火不充分，产物减少；G+C 含量一般 40%-60%；四种碱基随机分布，避免 3 个以上相同的碱基成串排列；引物自身不能互补及避免出现二级结构；引物与非特异靶区之间大的同源性不要超过 70%；引物末端应严格配对。3、 缓冲液：提供 PCR 反应合适的酸碱度与 Mg2+、K+等离子。常用 10-50mmol/Ltris-HCl(ph=8.3-8.8) Mg2+与 Taq 酶活性相关，1.5-2.0mmol/L 最佳。4、 dNTP：四种 dNTP 摩尔浓度应相等。5、 DNA 聚合酶：选择耐热的聚合酶，不同 PCR 反应都与最适用量。通常 50ul 体系中用量为 0.5-2.5U.6、 反应温度和循环次数：变性温度和时间：95 度 20-30s.温度过高或时间过长都导致 DNA 聚合酶活性丧失而影响产物量。温度过低或时间过短致模板变性不完全。复性温度和时间：复性温度决定 PCR 的特异性，应低于 Tm5 度。时间一般为 20-30s.时间过短致延伸失败，过长产生引物二聚体或错配。延伸温度和时间：温度取决于 DNA 聚合酶最适温度，通常 70-75 度。延伸时间取决于扩增片段长度。循环次数：主要取决于模板 DNA 浓度。次数过多会增加非特异性产物量和碱基错配数。一般 25-35 次。翻译：1 英译汉Identifying what factors raise a persons risk of cancer leads to better prevention and early detection. In 2008 researchers discovered that the number of new cases of mouth and throat caners related to infection with the human papillomavirus(HPV) increased by almost 1% per year between 1973 and 2004. This increase is possibly caused by changes in peoples sexual behaviors, such as oral sex, which increase the risk of HPV transmission to the mouth and throat. Another discovery showed that women who took birth control pills lowered their risk of ovarian cancer.2. 汉译英Data published in PNAS show antibodies can be made 10 times more toxic to cancer cells根据 Xencor 公司的一项研究，对单克隆抗体抗体的 Fc 段进行工程化改造（ Engineering） ， 可以增强其对于肿瘤细胞的毒性，对其应用于肿瘤靶向治疗具有潜在的改善作用。该研究将发表在 3 月 14 日出版的美国科学院进展（PNAS ）杂志上。与化疗和小分子抗癌药物相比，单克隆抗体具有重要的优越性，例如它们对肿瘤细胞的靶向特异性以及低毒性。目前市场上已有 8 种抗肿瘤产品获批，同时还有更多处在开发阶段。临床:1. 乳腺癌内分泌治疗：乳腺癌肿瘤细胞中雌激素受体（ER）含量高者称为激素依赖型肿瘤，对内分泌治疗有效。雌激素可以刺激乳腺癌细胞的生长，去除雌激素对肿瘤细胞的刺激从而治疗乳腺癌的方法称为乳腺癌的内分泌治疗。近年来内分泌治疗的一个重要进展就是三苯氧胺的应用。三苯氧胺是非甾体激素的抗雌激素药物，其结构式与雌激素相似，可在靶器官内与雌二醇争夺 ER，三苯氧胺-ER 复合物能影响 DNA 基因转录，从而抑制肿瘤细胞生长，该药对 ER、PgR 阳性的绝经后妇女效果尤为明显，同时可以减少对侧乳腺癌的发病率。用量为每天 20mg，至少服用 3 年，一般服用 5 年。该药副作用有潮热、恶心、呕吐、静脉血栓形成、眼部副作用、阴道干燥或分泌物多等。新近发展的芳香化酶抑制剂如来曲唑等，能抑制肾上腺分泌的雄激素转变为雌激素过程中的芳香化环节，降低雌二醇，达到治疗乳腺癌的目的。2. 乳腺癌化疗指征:乳腺癌是实体瘤中应用化疗最有效的肿瘤之一，浸润性乳腺癌术后应用化学药物辅助治疗，可以明显改善生存率。一般认为辅助化疗应予术后早期应用，联合化疗的效果优于单药化疗，辅助化疗应达到一定剂量，治疗期不易过长，以 6 个月左右为宜。浸润性乳腺癌伴腋淋巴结转移者是应用辅助化疗的指征。一般认为腋淋巴结阴性而有高危复发因素者，如原发肿瘤直径大于 2cm，组织学分类差，雌、孕激素受体阴性，肿瘤 S 期细胞百分率高，癌细胞分裂相多，异倍体肿瘤及癌基因 C-erb B-2 有过表达者，适宜应用术后辅助化疗。常用的有 CMF 方案（环磷酰胺、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶） ，可在术后尽早（1 周后）开始用药。对于肿瘤分化差、分期晚的病例可应用 CAF 方案（环磷酰胺、阿霉素、氟尿嘧啶） 。3. 肠癌分期：肿瘤分期的目的在于了解肿瘤发生过程，指导拟定治疗方案及预后估计。国际一般仍沿用改良的 Dukes 分期及 UICC 提出的 TNM 分期法。1）根据我国对 Dukes 法的补充，分为：癌仅限于肠壁内为 DukesA 期。穿透肠壁侵入浆膜或/及浆膜外，但无淋巴结转移者为 B 期。有淋巴结转移者为 C 期，其中淋巴结转移仅限于癌肿附近如结肠壁及结肠旁淋巴结者为 C1 期；转移至系膜和系膜根部淋巴结者为 C2 期。已有远处转移或腹腔转移，或广泛侵及邻近脏器无法切除者为 D 期。2） TNM 分期法：T 代表原发肿瘤，Tx 为无法估计原发肿瘤。无原发肿瘤证据为 T0；原位癌为 Tis;肿瘤侵及粘膜下层为 T1；侵及固有肌层为 T2；穿透肌层至浆膜下为 T3；穿透脏层腹膜或侵及其他脏器或组织为 T4。N 为区域淋巴结，Nx 无法估计淋巴结；无淋巴结转移为 N0；转移区域淋巴结 1-3 个为N1；4 个及 4 个以上区域淋巴结为 N2.M 为远处转移，无法估计远处转移为 Mx；无远处转移为 M0；凡有远处转移为 M1。4. 肠癌化疗指征：肠癌的化疗不论辅助治疗或肿瘤化疗均以 5FU 为基础用药。辅助化疗适用于根治术后，Dukes B 及 C 期病人5. 前列腺癌治疗前列腺癌在欧美国家发病率极高，其中 98%为腺癌，前列腺的外周带是癌肿最常发生的部位，晚期以血行转移至脊柱、骨盆为最常见。前列腺癌多为雄激素依赖型，其发生和发展与雄激素关系密切。治疗：应根据病人的年龄、全身状况、临床分期及病理分级等综合因素考虑。前列腺增生手术标本中偶然发现的局限性（期）癌，一般病灶小，细胞分化好，可不做进一步处理，严密观察随诊。局限在前列腺包膜以内（期）癌可以行根治性前列腺切除术，也是治疗前列腺癌的最佳方法，但仅适于年龄较轻，能耐受手术的病人。第、期前列腺癌以内分泌治疗为主，可行睾丸切除术，配合抗雄激素制剂治疗可提高生存率。前列腺癌是男性老年疾病，一般发展缓慢，病程较长，对 70 岁以上，预测寿命低于 10 年的病人不宜行根治性前列腺切除术。6. 乳腺癌治疗手术治疗是乳腺癌的主要治疗方法之一，还有辅助化学药物、内分泌、放射治疗等。对病灶仍局限于局部及区域淋巴结的病人，手术治疗是首选。手术适应证为国际临床分期的 0、及部分 期的病人。已有远处转移、全身情况差、主要脏器有严重疾病、年老体弱不能耐受手术者属手术禁忌。1) 手术治疗：包括乳腺癌根治术、乳腺癌扩大根治术、乳腺癌改良根治术、全乳房切除术以及保留乳房的乳腺癌切除术等术式。2) 化学药物治疗：详见第 2 题3) 内分泌治疗：详见第 1 题4) 放射治疗：是乳腺癌局部治疗的手段之一。在保留乳房的乳腺癌手术后，放射治疗是一重要组成部分，应于肿块局部广泛切除后给予较高剂量放射治疗。放疗指征如下：a.病理报告有腋中或腋上组淋巴结转移者；b. 阳性淋巴结占淋巴结总数 1/2 以上或有 4 个以上淋巴结阳性者； c.病理证实胸骨旁淋巴结阳性者（照射锁骨上区） ；d.原发灶位于乳房中央或内侧而作根治术后，尤其是腋淋巴结阳性者。5) 生物治疗7. 肾癌诊断治疗诊断：血尿、疼痛和肿块是肾癌的主要症状，出现上述任何一项症状，即应考虑肾癌的可能。肾癌