,人体疟原虫镜检技术,概述,疟疾是一种由疟原虫引起的蚊传寄生虫病，在我国属于乙类传染病。 人体疟疾有4种，即间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。从2013年起，我省已没有本地感染的疟疾病例，全部为输入性疟疾，主要为恶性疟、其次间日疟和卵形疟，三日疟少见。 疟疾与结核和AIDS病一起并列为全球最严重的三大传染病之一。,疟原虫生活史,人疟原虫完成其生活史需要人和按蚊两个宿主。在按蚊体内进行有性繁殖，按蚊是疟原虫的终末宿主；在人体内进行无性增殖，人是疟原虫的中间宿主。,薄血膜中常见的血液成分,中性白细胞,酸性球,血小板,大单核球,淋巴球,红细胞,薄血膜中被疟原虫寄生红血球形态特征,间日疟原虫被寄生红细胞 胀大色浅，薛氏点鲜红色，细小，数多,恶性疟原虫被寄生红细胞 大小正常，色稍紫；茂氏点紫红色，粗大，数少,薄血膜疟原虫形态,间日疟 环状体 红血球：正常。 大小： 较大，约为红 细胞直径1/3。 胞浆： 环状，浅蓝色。 核： 红色，一个， 偶有二个。 色素： 没有。,薄血膜疟原虫形态,恶性疟环状体 红血球：大小正常,颜色较深。 大小： 较小，约为红细胞 直径1/51/6。 胞浆： 兰色，环状纤细， 有时位于红细胞的 边缘。常见多个同 寄生一红细胞现象。 核： 红色一个,常有二个。 色素： 没有。,薄血膜疟原虫形态,恶性疟环状体,薄血膜中小滋养体形态特征,间日疟原虫小滋养体 约为红细胞直径的13；环较粗大；核1个；2个核和一个红细胞寄生2个环状体，不如恶性疟原虫多见,恶性疟原虫小滋养体 约为红细胞的 1/6；环纤细；核12个； 一个红细胞寄生2个环状体的常见,INSTITUTEOFTROPICALDISEASES,薄血膜疟原虫形态,间日疟大滋养体 红细胞：胀大褪色，出现形状大 小相等，分布均匀，数 目较多，鲜红色薛氏小 点。 大小：较大。 胞浆：不规则，浅兰色，出现阿 米巴伪足，有空泡。 核： 红色，一个。 色素：有，细小杆状，黄葛色， 分布不均匀。,薄血膜疟原虫形态,间 日 疟 大 滋 养 体,薄血膜疟原虫形态,恶性疟大滋养体 红细胞：大小正常，颜色较深，可出现较粗、大小不一、分布不匀、数目较少红色茂氏小点。 大小：较小。 胞浆：兰色，圆形，坚实，体积小。 核：一个，红色。 色素：较细的黑褐色颗粒，常集成块。,薄血膜中大滋养体形态特征,间日疟原虫大滋养体 虫体不规则，较大；阿米巴样空泡明显；疟色素细小，黄褐色,恶性疟原虫大滋养体 体小，圆形；空泡小；早期疟色素细小，金黄色，晚期结成块状，黑褐色,薄血膜疟原虫形态,间日疟未成熟裂殖体 红细胞：胀大，褪色，可有薛氏 小点。 胞浆：较不规则，空泡小或消失， 浅兰色。 核： 红色，分裂为二个以上。 色素：黄褐色，分布不均匀。,薄血膜疟原虫形态,间 日 疟 未 成 熟 裂 殖 体,薄血膜疟原虫形态,恶性疟未成熟裂殖体 红细胞：大小正常，颜色较深，可 有茂氏小点。 大小： 较小。 胞浆： 规则，圆形或卵圆形，兰 色。 核： 分裂为二个以上，红色。 色素： 黄褐色颗粒，常集成黑褐 色团块。,薄血膜中裂殖体前期形态特征,间日疟原虫裂殖体前期 圆形或不规则；核分裂为2个以上，空泡消失；疟色素分布不匀,恶性疟原虫裂殖体前期 圆形，核分裂为2个以上；疟色素集成团快,薄血膜疟原虫形态,间日疟成熟裂殖体 红细胞：胀大，褪色，可见薛氏 小点。 大小： 个体较大。 胞浆和核：裂殖子1224个，常为 1618个，排列不规则， 核红色，胞浆浅兰色。 色素： 黄褐色常集于疟原虫的一 边。,薄血膜疟原虫形态,恶性疟成熟裂殖体 红细胞： 大小正常，颜色较深， 可见茂氏小点。 大小： 虫体较小。 胞浆和核：裂殖子832个，常为 8 18个，排列 不规则或呈二重排列， 核红色胞浆兰色。 色素： 黑褐色，集中于中央 或一侧。,薄血膜中成熟裂殖体形态特征,间日疟原虫裂殖体 大于正常红细胞；裂殖子1224个，通常1618个，排列不规则；疟色素常集于一侧，黄褐色,恶性疟原虫裂殖体 小于正常红细胞；裂殖子较小，832个，通常818个，排列不规则；疟色素成团快状，黑褐色,薄血膜疟原虫形态,间日疟大（雌）配子体 形状大小：圆或椭圆，较大。 胞浆： 深兰色。 核： 一个，较小，深红色常 偏于一边，核周可见 明显不染色带。 色素： 黄褐色，均匀散在，数 目较多。,间日疟原虫形态,间日疟小（雄）配子体 形状大小：圆形，虫体较大。 胞浆： 浅兰色。 核： 一个，较大，疏松， 位于中央，浅红色， 周围有明显不着色 带。 色素： 黄褐色,散在分布。,薄血膜疟原虫形态,恶性疟小（雄）配子体 形状大小：腊肠形，两端钝圆。 胞浆： 浅兰色或淡紫红色。 核： 一个，较大，疏松， 位于中央，浅红色， 核周可见不染色带。 色素： 黑褐色，疏松地分 布于核周围。,薄血膜中大（雌）配子体 形态特征,间日疟原虫雌配子体 大小于正常红细胞，圆形；核小，致密，深红色，偏于一侧，胞浆深蓝色；疟色素散在,恶性疟原虫雌配子体 新月型，两端较尖；核小，致密，深红色，位于中央；胞浆深蓝色；疟色素块围于核周,薄血膜中小（雄）配子体 形态特征,间日疟原虫雄配子体 大于正常红细胞，圆形；核大，疏松，浅红色，多位于中央；胞浆浅蓝色或淡红色；疟色素散在,恶性疟原虫雄配子体 腊肠形，两端钝圆；核大，疏松，淡红色，位于中央；胞浆浅蓝色或浅红色；疟色素围于核周,小滋养体（环状体）,间日疟原虫 Plasmodium vivax,恶性疟原虫 Plasmodium falciparum,环状体 Ring stage,大滋养体 Trophozoite,裂殖体 Schizont,配子体 Gametocyte,卵形疟原虫 Plasmodium ovale,三日疟原虫 Plasmodium malariae,读片练习,血小板,6. “New Australian“ previously from Malaysia. Intermittent temperatures and headaches.,白细胞,薄血膜间日疟环状体,薄血膜间日疟环状体,7. Aches and pains, with fever. ? Glandular Fever, ?malaria.,间日疟,薄血膜间日疟滋养体,薄血膜间日疟滋养体,薄血膜间日疟未成熟裂殖体,薄血膜间日疟成熟裂殖体,薄血膜间日疟成熟裂殖体,薄血膜间日疟成熟裂殖体,薄血膜间日疟配子体,薄血膜间日疟配子体,间日疟,间日疟,间日疟,薄血膜恶性疟环状体,薄血膜恶性疟环状体,薄血膜恶性疟环状体,薄血膜恶性疟环状体,薄血膜恶性疟环状体,恶性疟配子体,恶性疟配子体,21. A member of the UN forces in East Timor. Presented with high temperature.,恶性疟,三日疟原虫: 大滋养体,三日疟,三日疟原虫: 大滋养体,菊花状裂殖体,三日疟原虫: 成熟裂殖体,4. Unspecified overseas travel. Presented with temperature 38.4C,三日疟,卵形疟原虫: 大配子体,卵形疟,18. Recent trip to Southern India- headaches and vaguely unwell.,卵形疟,卵形疟,卵形疟原虫：大滋养体,卵形疟原虫：大滋养体,厚血膜间日疟原虫形态,厚血膜间日疟原虫形态,厚血膜间日疟原虫形态,厚血膜间日疟滋养体,厚血膜间日疟原虫形态,厚血膜恶性疟环状体,恶性疟,恶性疟,7个环状体散在于5个白细胞之间，每个虫体可见一个红色的核和蓝色断裂的或皱缩的原浆,恶性疟,厚血膜恶性疟环状体,厚血膜恶性疟配子体,厚血膜恶性疟配子体,恶性疟,厚血膜中疟原虫的形态特征,厚血膜的优点是能够提高疟原虫的检出率，厚血膜上原虫集中，检出率比薄血膜高出十几倍甚至数十倍，尤其是在轻度感染的情况下。但是，厚血膜的镜检亦受到很多因素的影响：厚血膜层次多、背景深、透光差，虫体收缩，疟原虫的形态结构远不如薄血膜上清晰典型；,疟原虫计数,1.显微镜下厚血膜读片顺序为：由上而下，走之字形。 2.从看到第一个疟原虫起开始白细胞和原虫计数。 3.记录200个白细胞中的疟原虫数，如果原虫密度较低，可增加计数白细胞500以上；如果密度较高，则以8分钟内计录的实际白细胞数折算密度。 4.阳性血片计数方法：每间隔5个视野（这5个视野不做白细胞和原虫记数），记录一个视野（即第6个视野）内所有白细胞和疟原虫的数量，如果该视野只有白细胞数而无原虫就记录白细胞数，反之亦然。 5.每微升血按国际标准以8000个白细胞计算。,显微镜下厚血膜读片顺序,疟原虫计数 读片顺序,在显微镜里读片检查时从厚血膜的上缘开始，由上而下，从左至右，由右至左，一行接一行，一个视野连接一个视野，按顺序查完整个血膜。, 不需要计数的视野, 需要进行白细胞、疟原虫计数的视野 如果该视野无原虫，则计数白细胞数 看到第一个疟原虫，计数开始,疟原虫计数方法,厚血膜, 按视野顺序，从看到第一个疟原虫计数开始，记录200个白细胞中的疟原虫数，如果原虫密度较低，可增加白细胞计数500 1 000 个。 白细胞疟原虫计算公式： 疟原虫数 计数的白细胞数 患者每微升血白细胞数 = 疟原虫数/l血。 如果不知患者的白细胞数，则每微升血以8 000个白细胞计数(国际标准) 。,疟原虫计数方法,疟原虫计数方法,例如 计数200 WBC中有35个疟原虫，在不知患 者白细胞数的情况下，以每微升血8 000个白细 胞计数, 由此计算出每微升血液疟原虫密度为：,35（计数的疟原虫数）200（计数的白细胞）x 8000（每微升血白细胞数） =1400 / l,答：该患者的疟原虫密度为1400 / l。,镜检工作所需注意的事项,1、在镜检中显微镜的使用：油镜、目镜、视野需按顺序逐个检查。 2、疟原虫镜检工作中，凡是发热病人。疟疾、疑似疟疾、及不明原因的发热病人均需进行疟原虫镜检。 3、做好镜检登记：凡是镜检疟原虫的均需如实登记，阴、阳性片保存待考核。 4、每一个月上报一次镜检数。包括镜检人数、阳性、阴性。 5、如发现恶性疟以最快的通信方法，在24小时内报县、市、省疾病预防控制机构，阳性血片留待上级复核。 6、对每例确诊疟疾病人，在进行抗疟治疗前须采集病人静脉血510ml，并制作厚薄血片4张和滤纸血4份，以送省进行分子生物学鉴定。,谢谢！,