2017年检验技师考试临床血液学第八章复习笔记（2）第二节 遗传性球形细胞增多症【病因和发病机制】遗传性球形细胞增多症(hereditary spherocytosis)是一种红细胞膜异常的遗传性溶血性贫血(HA)。系常染色体显性遗传，有8号染色体短臂缺失。患者红细胞膜骨架蛋白有异常，引起红细胞膜通透性增加，钠盐被动性流入细胞内，凹盘形细胞增厚，表面积减少接近球形，变形能力减退。其膜上Ca2+一Mg2+-ATP酶受到抑制，钙沉积在膜上，使膜的柔韧性降低。这类球形细胞通过脾脏时极易发生溶血。【临床表现】2/3为成年发病，贫血、黄疸和脾大为主要临床表现，轻重程度不一。青少年者生长迟缓并伴有巨脾。感染可加重临床症状。常有胆囊结石(50%)，其次是踝以上腿部慢性溃疡，常迁延不愈。此外尚有先天性畸形，如塔形头、鞍状鼻及多指(趾)等。患者可并发再障危象(aplastic crisis)，常为短小病毒(parvovirus)感染或叶酸缺乏所引起。患者表现为发热、腹痛、呕吐、网织红细胞减少，严重时全血细胞减少，一般持续1014天。贫血加重时并不伴黄疸加深。【诊断】有HA的临床表现和血管外溶血为主的实验室依据(见第一节)；外周血涂片中胞体小、染色深、中央淡染区消失的球形细胞增多(10%以上)；Coombs实验阴性，渗透性脆性试验提示渗透性脆性增加。红细胞的渗透性脆性与红细胞的面积/体积的比值有关，球形红细胞面积/体积的比值缩小，脆性增加，细胞在O.51%O.72%的盐水中就开始溶血，在O.45%O.36%时已完全溶血。红细胞于37温育24小时后再做渗透性脆性试验，有助于轻型病例的发现。据以上三点即可诊断。如伴有常染色体显性遗传的家族史，红细胞膜蛋白电泳或基因检查发现膜蛋白的缺陷，更有利于诊断。应与化学中毒、烧伤、自身免疫性HA等引起的继发性球形细胞增多相鉴别。【治疗】脾切除对本病有显著疗效。术后球形细胞依然存在，但数天后黄疸及贫血即可改善。所以诊断一旦肯定，年龄在10岁以上，无手术禁忌证，即可考虑脾切除。溶血或贫血严重时应加用叶酸，以防叶酸缺乏而加重贫血或诱发再障危象。贫血严重时需输浓缩红细胞。第三节 红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症葡萄糖-6-磷酸脱氢酶()6PI)缺乏系临床上最多见的红细胞内戊糖磷酸途径的遗传性缺陷，红细胞G6PI)缺乏症指因G6PD缺乏所致的HA，全球患者估计2亿人以上。土耳其东南部的犹太人发病率最高(58.2%)。国内广西某些地区(15.7%)、海南岛黎族(13.7%)和云南省傣族多见，淮河以北较少见。【发病机制】突变基因位于X染色体(Xq28)，呈伴性不完全显性遗传，男多于女。基因呈复杂的多态性，可形成多种G6PD缺乏症的变异型。G6PD缺乏症患者一旦受到氧化剂的作用，因G6PD的酶活性减低，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)和还原型谷胱甘肽(GSH)等抗氧化损伤物质缺乏，导致高铁血红素和变性珠蛋白包涵体海因小体(Heinz body)生成。后者在光学显微镜下为12m大小的折光小体，大多分布在红细胞膜上。含有这种小体的红细胞，极易被脾索阻滞而被单核巨噬细胞所吞噬。【实验室检查】(一)高铁血红蛋白还原试验患者血标本加入美蓝时，高铁血红蛋白还原低于正常值(75%)，严重者低于30%。本法简便，适用于过筛试验或群体普查。缺点是有假阳性。(二)红细胞海因小体(Heinz body)生成试验在所采血中加入乙酰苯肼，37温育后再做甲基紫或煌焦油蓝活体染色。G6PD缺乏的红细胞内可见海因小体，计数大于5%有诊断意义。(三)葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)活性测定最为可靠，是主要的诊断依据。溶血高峰期及恢复期，酶的活性可以正常或接近正常。通常在急性溶血后23个月后复测可以比较正确地反映患者的G6PD活性。【临床表现、诊断】有伴性不完全显性遗传的家族史，自幼发病。有HA的临床表现和实验室证据(见第一节)，有G6PD活性缺乏的实验室检查结果。抗人球蛋白试验阴性，外周血涂片无异形红细胞，温育后红细胞渗透性瞻性正常；无异常血红蛋白病，可排除其他溶血性贫血的可能。具备以上三点即可诊断红细胞G6PD缺乏症。临床类型如下。(一)蚕豆病(favism)广东、四川、广西、湖南、江西等地农村常见，机制不明。男多于女，成年人发病低于小儿，3岁以上儿童占70%左右。1.发生于每年的35月间蚕豆成熟季节。40%的患者有家族史可查。2.在食新鲜蚕豆后几小时(最短2小时)至几天(一般12天，最长15天)突然发作，呈现急性血管内溶血的临床表现和实验室检查结果(具体内容见第一节)。其严重程度与食蚕豆的量无关。从发病到尿隐血转阴、溶血停止约7天，溶血呈自限性。3.G6PD活性在正常水平的10%以下，海因小体是本类溶血的特征。(二)药物诱发的HA服药(抗疟药如伯氨喹、扑疟喹啉等、磺胺类如磺胺甲嗯唑、柳氮磺吡啶等、解热镇痛药如阿司匹林、乙酰苯胺等、硝基呋喃类如呋喃妥因、呋喃唑酮等、氨苯砜、维生素K、丙磺舒、对氨基水杨酸、奎尼丁、氯霉素等)或接触樟脑丸后13天出现急性血管内溶血的临床表现和实验室检查结果(见第一节)，溶血贫血程度与酶缺陷程度及药物剂量有关。溶血持续约7天，有自限性。20天后即使继续用药，溶血也有缓解趋势。这是由于骨髓代偿增生，大量新生红细胞具有较强的G6PD活性之故。G6PD缺乏的新生儿可发生HA，症状可因注射维生素K或接触樟脑丸而加重，需与新生儿同种免疫性溶血鉴别。【治疗】脱离可能诱发溶血的因素。如停止服用可疑的药物和蚕豆，不要接触樟脑丸，控制感染，注意纠正水电解质酸碱失衡和肾功能不全等。输红细胞及使用糖皮质激素可改善病情，慢性患者可使用叶酸。脾切除效果不佳。患本病的新生儿发生HA伴核黄疸，可换血，光疗或苯巴比妥注射。第四节 血红蛋白病血红蛋白是一种由血红素和珠蛋白组成的结合蛋白。珠蛋白有两种肽链，一种是a链，由141个氨基酸残基构成；另一种是非a链(、及链)，各有146个氨基酸残基，各种肽链有固定的氨基酸排列顺序。a链基因位于16号染色体，、链基因位于11号染色体。每一条肽链和一个血红素连接，构成一个血红蛋白单体。人类血红蛋白由2对(4条)血红蛋白单体聚合而成。正常人出生后有三种血红蛋白：血红蛋白A(HbA)：为成人主要的血红蛋白，占95%以上，由一对a链和一对链组成(a22)；血红蛋白A2(HbA2)：由一对a链和一对链组成(a22)，占血红蛋白的2%3%；胎儿血红蛋白(HbF)：由一对a链和一对链组成(a22)，出生6个月后含量仅1%左右。血红蛋白病(hemoglobinopathy)是一组遗传性溶血性贫血。分为珠蛋白肽链分子结构异常和珠蛋白肽链合成数量异常(地中海贫血)两大类。一、珠蛋白肽链分子结构异常珠蛋白肽链分子结构异常多数不伴功能改变，以下几种有临床意义。(一)镰状细胞贫血因珠蛋白链第6位谷氨酸被缬氨酸替代所致，又称血红蛋白S(HbS)病。本病主要见于黑人。HbS在缺氧情况下分子间相互作用，成为溶解度很低的螺旋形多聚体，使红细胞扭曲成镰状细胞(镰变)。这类细胞变形性差，在微循环内易被淤滞而破坏，发生HA。患者出生后34个月即有黄疽、贫血及肝、脾大，发育较差。因镰状细胞阻塞微循环而引起的脏器功能障碍，可表现为腹痛、气急、肾区痛和血尿。患者常因再障危象、贫血加重，并发感染而死亡。体外重亚硫酸钠镰变试验时可见大量镰状红细胞，有助于诊断。杂合子红细胞内HbS浓度较低，除在缺氧情况下一般不发生镰变和贫血，临床无症状或偶有血尿、脾梗死等表现。本病无特殊治疗，宜预防感染和防止缺氧。溶血发作时可予供氧、补液和输血等。(二)不稳定血红蛋白病约有120余种，但发病率低。不稳定血红蛋白的a或珠蛋白肽链与血红素紧密结合的氨基酸发生替代或缺失，使之易受氧化而丢失血红素，结果珠蛋白链在细胞内发生沉淀，形成海因小体。患者海因小体生成试验阳性，异丙醇试验及热变性试验阳性。应与红细胞G6PI)缺乏症及其他血红蛋白病鉴别。控制感染和避免服用磺胺类及其他氧化药物，可防止病情加重。脾切除可使红细胞寿命延长，溶血减轻，但对重型患者可能无效。(三)血红蛋白M(HbM)病HbM共发现5种，其中4种的a或肽链中的近端或远端组氨酸由酪氨酸替代。本病的发病率很低，仅发现杂合子。患者可有发绀，高铁血红蛋白增高，但一般不超过30%。溶血多不明显，红细胞内也不形成海因小体。有异常血红蛋白吸收光谱。本症须与获得性高铁血红蛋白血症及由NADH(还原型辅酶1)高铁血红蛋白还原酶缺乏引起的先天性高铁血红蛋白血症相区别。患者不需治疗。(四)氧亲和力异常的血红蛋白病珠蛋白异常影响血红蛋白分子的四级结构，氧亲和力可比正常HbA增高46倍，氧解离曲线左移。重者可引起组织缺氧和代偿性红细胞增多症。但白细胞和血小板均不增多，家族中有同样疾病的患者，可与真性红细胞增多症相区别。(五)其他HbE病为我国最常见的异常血红蛋白病，广东及云南省多见。纯合子仅有轻度HA，呈小细胞低色素性，靶形细胞可达25%75%。用限制性DNA片断多态性连锁分析和PCR分析等对父母均患异常血红蛋白病的胎儿作产前诊断，可防止严重的珠蛋白肽链结构异常的胎儿出生。二、珠蛋白肽链合成数量异常(地中海贫血)地中海贫血(thalassemia)亦译为海洋性贫血，是血红蛋白的珠蛋白肽链有一种或几种的合成受到部分或完全抑制所引起的遗传性HA。(一)地中海贫血a珠蛋白基因缺失或缺陷，导致a珠蛋白链合成减少或缺乏，称为a地中海贫血。主要分布在东南亚，特别是泰国以及意大利、希腊等地中海地区。我国广西发病率为14.9%，广东为4.1l%。1.静止型或标准型a地中海贫血 如果4个a基因仅缺失1个，表现为静止型；如缺失2个则为标准型。新生儿期血红蛋白电泳Hb Bart(讥)低于5%15%，几个月后消失。患者无症状。经煌焦油蓝温育后，少数红细胞内有血红蛋白H包涵体。血红蛋白电泳无异常发现。2.血红蛋白H(HbH)病 4个a基因缺失3个则为血红蛋白H(4)病。新生儿期血红蛋白电泳Hb Bart达25%，发育中Hb Bart为HbH替代。贫血轻到中度，伴肝脾大和黄疽，少数贫血可达重度。感染或服用氧化剂药物后，贫血加重。红细胞低色素性明显，靶形细胞可见，多少不一。红细胞渗透性脆性降低。温育后煌焦油蓝染色可见大量HbH包涵体。HbH在pH 8.6或8.8行血红蛋白电泳时，向阳极方向移动，泳速快于HbA。3.血红蛋白Bart胎儿水肿综合征 父母双方均为a地中海贫血，胎儿4个a基因全部缺失。a链绝对缺乏，链自相聚合成HbBart(4)。临床上表现为血红蛋白Bart胎儿水肿综合征，是。海洋性贫血中最严重的类型。胎儿苍白，全身水肿伴腹水，肝、脾显著肿大；血红蛋白电泳见Hb Bart占80%100%，Hb Bart氧亲和力高，致使组织严重缺氧，胎儿多在妊娠3040周于宫内死亡或产后数小时死亡。(二)地中海贫血珠蛋白基因缺陷导致珠蛋白链合成减少或缺乏，称为地中海贫血。世界上至少有1.5亿人携带一种珠蛋白基因缺陷。多见于地中海区域、中东各国和东南亚。在我国地中海贫血最多见于西南和华南一带，其次为长江以南各地，北方很少见。地中海贫血是常染色体显性遗传。如果父母双方均为地中海贫血杂合子，子女的1/4从双亲均遗传到地中海贫血基因，表现为纯合子(重型)，2/4从父母一方遗传到地中海贫血基因，表现为杂合子(轻型)，另1/4正常。患者a链相对增多，未结合的a链自聚成不稳定的。聚合体，在幼红细胞内沉淀，形成包涵体，引起膜的损害而致溶血。和链代偿合成，致HbA2(a22)和HbF(a 22)增多，HbF的氧亲和力高，将加重组织缺氧。