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第十二章 临床即时检验仪器,即时检测(Point-of-care Testing,POCT)也称床边检测,指在患者身边,由非检验专业人员(临床人员或患者)利用便携式仪器快速分析患者标本并准确获取结果的分析技术,或者说测试不在主实验室而在一个可移动的系统内进行。,第六章 临床即时检测仪器,第六章 临床即时检测仪器,即时检测的优势: 大型自动化仪器的补充 节省分析前、后标本处理步骤 缩短标本检测周期 快速报告检验结果 节约综合成本,第一节 POCT的基本原理及主要技术,第二节 常用的即时检测仪器介绍,第六章 临床即时检测仪器,目 录,第三节 即时检测仪器的临床应用,第四节 即时检测仪器的展望,第一节 POCT的基本原理及主要技术,一、 POCT的基本原理,三、 POCT的特点,二、 POCT的主要技术,第一节 POCT的基本原理及主要技术,一、POCT的基本原理 POCT技术的基本原理大致可分为四类: 把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料中,成为整合的干燥试剂块,然后将其固定于硬质型基质上,成为各种形式的诊断试剂条; 把传统分析仪器微型化,操作方法简单化,使之成为便携式和手掌式的设备; 将上述两者整合为统一的系统; 应用生物感应技术,利用生物感应器检测待测物。,第一节 POCT的基本原理及主要技术,二、POCT的主要技术 1.简单显色(干化学法测定)技术 将多种反应试剂干燥、固定在纸片上,加上检验标本(全血、血清、血浆、尿液等)后产生颜色反应,用肉眼观察定性或仪器检测(多为半定量)。 2.多层涂膜(干化学法测定)技术 由感光胶片制作技术移植而来。将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片,用仪器检测,可准确定量。,第一节 POCT的基本原理及主要技术,二、POCT的主要技术 3.免疫金标记技术 胶体金颗粒具有高电子密度的特性,金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的标记处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,这一反应可通过银颗粒的沉积被放大。 4.免疫荧光技术 通过检测板条上激光激发的荧光,定量检测以pg/ml为单位的检测板条上单个或多个标志物。,第一节 POCT的基本原理及主要技术,二、POCT的主要技术 5.生物传感器技术 利用离子选择电极,底物特异性电极,电导传感器等特定的生物检测器进行分析检测。 6.生物芯片技术 生物芯片技术是最新发展起来的技术。其特点是在小面积的芯片上同时测定多个项目。,第一节 POCT的基本原理及主要技术,二、POCT的主要技术 7.红外和远红外分光光度技术 此类技术常用于无创性检测仪器,如经皮肤检测血液中血红蛋白、胆红素、葡萄糖等成分。 8.其他技术,第一节 POCT的基本原理及主要技术,POCT与传统实验室检测的主要不同点,三、POCT的特点,第二节 常用的即时检测仪器介绍,三、 POCT仪器的特点,二、 基于相关技术的即时检测仪器,一、常用即时检测仪器的分类,目前POCT检测仪器的分类尚无一个统一的标准,但大致有下面三种分类方法: 按照用途分型; 根据仪器大小和重量分型; 根据仪器的一次性装置分型。,第二节 常用的即时检测仪器介绍,一、常用即时检测仪器分类,第二节 常用的即时检测仪器介绍,按照用途分型: 快速血糖检测仪 电解质分析仪 血液分析仪 血气分析仪 抗凝测定仪 心肌损伤标志物检测仪 药物应用监测仪 酶联免疫检测仪 放射免疫分析仪 甲状腺激素检测仪等,一、常用即时检测仪器分类,根据仪器的大小和重量分型: 便携型 桌面型 手提式 手提式一次性使用型 根据所用的一次性装置分型: 卡片式装置 单一或多垫试剂条 微制造装置 生物传感器装置 其他多孔材料等装置,第二节 常用的即时检测仪器介绍,一、常用即时检测仪器分类,第二节 常用的即时检测仪器介绍,二、基于相关技术的即时检测仪器,多层涂膜技术相关POCT仪器 免疫金标记技术相关的POCT仪器 免疫荧光测定技术相关POCT仪器 生物传感器技术相关的POCT仪器 生物芯片技术的相关POCT仪器 红外和远红外分光光度技术相关的POCT仪器,第二节 常用的即时检测仪器介绍,多层涂膜技术相关POCT仪器 多层涂膜技术源于感光胶片制作技术,采用干化学技术,将液体样本直接加到固定于特定载体的干试剂上,样本中的水作为溶剂,样本中的待测成分与试剂进行化学反应,然后进行分析检测。 包括化学涂层技术多层膜法和差示电位多层膜法。 化学涂层技术多用于全自动生化分析仪,这类仪器临床应用较普遍,如快速血糖仪进行血糖等生化项目的检测。 差示电位多层膜法的仪器多用于电解质的测定。,二、基于相关技术的即时检测仪器,干片分层与功能,多层涂膜技术相关POCT仪器,纸桥,离子载体膜(敏感膜),内部参考层,支持层,多层涂膜技术相关POCT仪器,银/银氯化层,差示电极法多层膜法,患者血清,参考液,免疫金标记技术相关的POCT仪器 免疫金标记技术是将胶体金颗粒与标记的抗原、抗体形成免疫金复合物的一种技术。 包括免疫渗滤和免疫层析技术相关的POCT仪器。 如HCG、FSH等金标定量检测仪,该仪器可快速定量检测血清和尿液中的待测物,样品无须复杂处理,操作简单方便,3分钟快速报告结果,内置标准曲线,检测范围宽。,第二节 常用的即时检测仪器介绍,二、基于相关技术的即时检测仪器,与免疫渗滤技术相结合的POCT仪器,免疫渗滤装置及操作示意图,与免疫层析技术相结合的POCT仪器,免疫层析法检测试剂条结构,与免疫层析技术相结合的POCT仪器,免疫荧光测定技术相关POCT仪器 免疫荧光技术是以荧光物质标记抗体而进行抗原定位或抗原含量检测的技术,又称为荧光抗体技术(fluorescent antibody technique)。 具有特异性强、敏感性高、速度快等特点。 采用该类技术的即时检测仪器有iCHROMATM Reader全定量免疫荧光检测仪等。,第二节 常用的即时检测仪器介绍,二、基于相关技术的即时检测仪器,基于新的时间分辨荧光免疫测定(time resolved fluorescence immunoassay,TR-FIA)技术的有时间分辨荧光免疫测定仪,该仪器采用镧系元素铕(Eu)螯合物作为其荧光标记物,专门为中小型实验室、急诊室和医生办公室而设计。杯形载体中包被有抗体和其他冻干试剂(标记物等)。可用于全血测定,检测的项目包括心肌检测物,如肌钙蛋白I( cTnI)、肌红蛋白(Mb)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、生殖和感染标志物。,二、基于相关技术的即时检测仪器,第二节 常用的即时检测仪器介绍,免疫荧光测定技术相关POCT仪器,定量免疫荧光检测仪外观图,仪器配套的检测板,全定量免疫荧光检测仪检测原理示意图,免疫荧光测定技术相关POCT仪器,检 测 步 骤,免疫荧光测定技术相关POCT仪器,将其加入到含有溶血缓冲液的试管中,混匀(颠倒10次)。,检 测 步 骤,检 测 步 骤,免疫荧光测定技术相关POCT仪器,生物传感器技术相关的POCT仪 生物传感器是对生物物质敏感并能将其浓度转换成电信号进行检测的仪器,由感受器和换能器组成。 采用该类技术的即时检测仪器有葡萄糖酶电极传感器相关的血糖仪、荧光传感器相关血气分析仪等。 这类仪器具有专一性强,灵敏度高,操作系统简便,易自动化,等特点。,第二节 常用的即时检测仪器介绍,二、基于相关技术的即时检测仪器,葡萄糖脱氢酶生物传感器技术,样本采集区,试纸条结构分解图,葡萄糖脱氢酶生物传感器技术,标本采集操作示意:血滴触及试纸边缘缺口处直到黄色测试区完全被覆盖,一次性荧光传感器测试卡示意图,生物芯片技术的相关POCT仪器 生物芯片是最新发展起来的技术,它的特点是在小面积的芯片上同时测定多个项目,可分基因芯片、蛋白质芯片(又称免疫芯片)和细胞芯片。生物芯片以微电加工技术为基础,具有高效、高信息量等突出优点。 生物芯片检测仪器是利用强光照明生物芯片上的生物样品以激发荧光,并通过灵敏度高的光电探测器探测荧光强度,最后由计算机对探测结果进行分析处理以获取相关的生物信息。,第二节 常用的即时检测仪器介绍,二、基于相关技术的即时检测仪器,红外和远红外分光光度技术相关的POCT仪器 这类技术多用于经皮检测仪器,这类检验仪器可连续监测患者血液中的目的成分,无需抽血,还可避免抽血可能引起的交叉感染和标本间的污染,降低检验的成本和缩短报告时间。,第二节 常用的即时检测仪器介绍,二、基于相关技术的即时检测仪器,采用该类技术的即时检测仪器有无创伤自测血糖仪、无创(经皮)胆红素检测仪、无创全血细胞测定仪等。 以无创伤自测血糖仪为例,该仪器包括由红外光发射管构成的红外光源,光通路部分、光电探测转换器、电通路部分及显示部分,该仪器轻便,廉价,能满足无创伤自测血糖含量,准确率大于90。更为便捷的手表式无创伤血糖测定仪已问世,FDA已于2002 年批准上市。,三、基于相关技术的即时检测仪器,第二节 常用的即时检测仪器介绍,第二节 常用的即时检测仪器介绍,三、POCT的特点,1.仪器小型化,便于携带; 2.操作简单化、一般34个步骤即可完成实验; 3.报告即时化,缩短检验周期; 4.经权威机构的质量认证; 5.仪器和配套试剂中应配有质控品,可监控仪器和试剂 的工作状态; 6.仪器检验项目具备临床价值和社会学意义; 7.仪器的检测费用合理; 8.仪器试剂的应用不应造成对患者和工作人员的健康损 害或对环境污染的不利影响。,第二节 常用的即时检测仪器介绍,一台理想的POCT仪器应具备以下特点:,第三节 即时检测仪器的临床应用,一、即时检测仪器的临床应用,在糖尿病诊治方面的应用 在心血管疾病方面的应用 在感染性疾病中的应用 在发热性疾病方面的应用 在ICU病房内的应用 在儿科诊疗中的应用 在循证医学中的应用 在医院外的应用,快速检测血糖仪 快速血气分析仪,二、几种临床常用的即时检测仪器,第三节 即时检测仪器的临床应用,在糖尿病诊治方面的应用 便携式血糖仪是诊断糖尿病POCT仪器中的最佳典范。 应用:动态监测血糖、测定糖化血红蛋白与尿微量白蛋白等指标。 特点:体积小,便于携带,操作简单快速,可用全血标本进行即时测定,标本无需抗凝、用血量少、无标本制备过程、检测周期(TAT)大大缩短。,一、即时检测仪器的临床应用,在心血管疾病方面的应用 对于心血管疾病或怀疑是心血管疾病的患者: CRP即时检测仪器检测常规或超敏CRP 金标定量检测仪检测cTnI、Mb等 干化学分析仪检测CK-MB(单项或三项联合检测) 荧光传感器检测脑钠肽(BNP)等 通过即时检验仪器检测这些项目对于心血管疾病的防治有重要意义。,第三节 即时检测仪器的临床应用,一、即时检测仪器的临床应用,在感染性疾病中的应用 采用生物芯片和免疫金标记技术相关POCT仪器对细菌性阴道病、衣原体、性病等检测较培养法更为快速和灵敏。 POCT仪器也可用于医院中手术前传染病四项(HBsAg、HCV、HIV、TP)检测、内镜检查前的病毒性肝炎筛选等。,第三节 即时检测仪器的临床应用,一、即时检测仪器的临床应用,在发热性疾病方面的应用 CRP即时检测仪器对CRP的检测,与血常规联合应用,对鉴别发热患者感染病原体的性质(细菌或病毒)比单一检测更具特异性,为临床提供更充足的实验指标和诊断依据,可减少抗生素使用的盲目性,该检测组合已得到临床医师的普遍认可和支持。,第三节 即时检测仪器的临床应用,一、即时检测仪器的临床应用,在ICU病房内的应用 POCT检测仪器最能符合ICU病房患者的危急、重症的病情特点。 目前临床上ICU病房已使用的有: 体外系统的电化学感应器,可周期性地控制患者的血气、电解质、红细胞压积和血糖等; 体内系统,将生物传感器安装在探针或导管壁上,置于动脉或静脉管腔内,由监视器定
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