资源预览内容
第1页 / 共81页
第2页 / 共81页
第3页 / 共81页
第4页 / 共81页
第5页 / 共81页
第6页 / 共81页
第7页 / 共81页
第8页 / 共81页
第9页 / 共81页
第10页 / 共81页
亲,该文档总共81页,到这儿已超出免费预览范围,如果喜欢就下载吧!
资源描述
第9章 常见植物的脱毒与快速繁殖技术,植物组织培养,本章主要内容(4学时),蔬菜的脱毒与快繁 果树的脱毒与快繁 花卉植物的脱毒与快繁 农作物的脱毒与快繁 药用植物的试管快繁 树木的脱毒与快繁,第9章 常见植物的脱毒 与快速繁殖技术,(1)掌握马铃薯的生物学习性,掌握马铃薯脱毒培养的过程以及马铃薯脱毒苗的鉴定方法;掌握番茄的生物学特性及快速繁殖方法; (2)掌握苹果的脱 毒方法与快繁技术;掌握葡萄的脱毒与快技术;掌握草莓的脱 毒与快繁技术; (3)掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉的生物学特性,组培快速繁殖方法及自然繁殖法; (4)掌握甘薯的生物学特性,脱毒与快繁的方法及技术; (5)掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术; (6)掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快繁技术。,第9章 常见植物的脱毒 与快速繁殖技术,本章教学目的与要求,第一节 蔬菜的脱毒与快繁,第9章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术,马铃薯,蕃茄,一、马铃薯的组织培养,第一节 蔬菜脱毒与快繁,微型薯,第一节 蔬菜脱毒与快繁,马铃薯是一种全球性的重要经济作物。适应性广,营养价值高,耐贮藏适运输,既是一种重要的粮食作物也是一种调节市场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美洲,当被发现可以食用后,很快传到世界各地,成为栽培很广的一种作物。,第一节 蔬菜脱毒与快繁,危害有17种之多,如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。 马铃薯病毒可使块茎产量减少50%80%。,马铃薯病毒的种类,第一节 蔬菜脱毒与快繁,1、形态特性 根 根系由出生根和匍匐根组成。 茎 分地上部分和地下部分。 叶 全缘,心脏形。 花 为聚伞花序。 果实 浆果。,(一)、马铃薯特性和生物学习性,第一节 蔬菜脱毒与快繁,马铃薯性喜冷气候,不耐高温和霜冻。 发芽适温为1218。 地上茎叶生长温度为1721。 块茎形成要求昼温1424,夜温1214。 结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结,薯块表面粗糙和薯形不整。,2、 生物学习性,第一节 蔬菜脱毒与快繁,通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、PVM、PSW等病毒。,(二)、马铃薯脱毒技术,第一节 蔬菜脱毒与快繁,全国现有马铃薯播种面积300多万公顷,每年需合格种薯45亿公斤,脱毒原种4亿公斤,脱毒小薯或微型薯45亿粒。,我国的马铃薯平均单产仅为13.60吨/公顷,是世界单产最高国这瑞士(48.80吨/公顷)的1/4。最主要的因素就是种薯质量差,品种布局不合理。,我国马铃薯栽培现状,第一节 蔬菜脱毒与快繁,微茎尖组织培养-诱导出苗-联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定-脱毒试管基础苗。 固体、液体培养基相结合-扩繁基础苗-在防虫网室栽植或封闭温室扦插-原原种(或称脱毒小薯)。原原种-原种1代-原种2代-良种1代-良种2代。,1脱毒种薯生产程序,第一节 蔬菜脱毒与快繁,(1)茎尖消毒,一般在室内发芽,芽经热处理(38)2周。然后取1厘米的茎尖,水洗干净,无菌条件下先用70的酒精浸组织15-20秒,再用2次氯酸钠溶液浸泡4-5min,然后用无菌水冲洗3次。,2茎尖培养脱毒,第一节 蔬菜脱毒与快繁,把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶,露出圆滑的生长点,留1-2个叶原基,0.20.3毫米,随即接种于MS液体培养基上,每升加0.1mgNAA 、 0.2mgGA3、0.5BA,2%蔗糖,p H值5.8。,取材和接种,第一节 蔬菜脱毒与快繁,温度:2125 光照度:2000-3000 lx 光照时间:12h/d 2-3周长愈伤,4-5周长绿点,3-6月长成2-3厘米小芽,越慢越好,出芽很快的扔掉。,培养条件:,第一节 蔬菜脱毒与快繁,培养成功的马铃薯脱毒苗,经ELISA(试剂盒)鉴定后(试管苗应每3月检测一次,每年4次)采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。 取试管苗单节切段扦插在(或平放)固体培养基上,每瓶可插20个左右茎段,经20d左右发育成510cm高小植株,继续进行切段繁殖,此法速度快,每月可繁殖58倍,试管苗多节接种在液体培养基上,进行浅层静止液体培养。,(2) 继代和生根,第一节 蔬菜脱毒与快繁,MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙10,3%蔗糖; 20-25,3000-4000LX,14-16hr光照; 每3周继代一次,单芽茎段约1厘米; 原则试管苗用2年3年。,马铃薯继代培养基:,第一节 蔬菜脱毒与快繁,马铃薯试管苗,第一节 蔬菜脱毒与快繁,炼苗室温度:白天2327,夜间不低于14。 炼苗具体方法:移植前7d左右,将长有35片叶、高23cm的试管苗,在不开瓶口的状态下,从培养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管苗,在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。,(3) 驯化,第一节 蔬菜脱毒与快繁,1、指示植物鉴定 在马铃薯的病毒鉴定中,汁液鉴定是最常用的方法,病毒、病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。 2、鉴定寄主的准备 马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红,茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。,(三)、马铃薯无病毒苗的鉴定材料,第一节 蔬菜脱毒与快繁,叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状,用纱布滤出汁液,再用蒸馏水稀释倍作为接种物(混入目的金刚砂)。 用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面,以右手指蘸取接种液,均匀的在叶背面擦过,以不造成叶片产生伤痕为度,最后把叶面上多余的接种物用清水洗净,放置在的防虫室中,一般天可发病。,.接种液制备及接种,第一节 蔬菜脱毒与快繁,() 直接块茎繁殖 () 扦插繁殖 () 组织培养切段繁殖 A:继代培养 B:低温保存,(四)、马铃薯无病毒株的繁殖,第一节蔬菜脱毒与快繁,二、番茄的组织培养,(一)、形态特征和生物学习性,番茄的叶片为长羽状,在叶轴上生有裂片,顶生裂片,小裂片,间裂片,这些裂片是叶的深裂,缺刻的变化。两性花,聚伞花序,浆果。 蕃茄耐低温,喜光照,对水分需求量极大,喜肥,适于微酸性或中性土壤。,第一节蔬菜脱毒与快繁,(二)、番茄的组织培养,1、外植体:幼嫩叶片 。 2、消毒:用0.1%升汞浸泡4min,再用无菌水冲洗3-4次 。 3、愈伤组织培养条件:MS + BA2mg/L + IAA1mg/L ,温度25,每天光照10h,光照度2000lx 。 4、分化培养:分化培养基MS+BA4中。 5、生根培养:MS+IAA2 mg/L。 6、炼苗栽植:将培养有根试管苗的瓶口打开。煅炼3d后取出,洗去根上带有的培养基,移栽到营养土中,浇透水,并罩上塑料薄膜,以保温保湿,4-5d后去掉薄膜,新叶长出时即定植田间。,第一节蔬菜脱毒与快繁,(三)、番茄的胚培养,1、外植体制备:授粉后30-40d收获果皮完整的果实,果实放入95%乙醇中表面消毒,浸在5%NaCI中5min,用无菌蒸馏水充分淋洗。果实放在无菌吸水纸上,除去种子上的胶状复被。 2、培养基:启动:MS+硫胺素0.3mg/L+2,4-D2mg/L+椰乳100ml/L,pH6.0;继代: MS+ 2,4-D2mg/L;分化:MS+BA1.5mg/L;生根:MS+NAA2mg/L。 3、培养条件:愈伤组织启动和继代,用暗培养,27。芽再生和生根在室温20-30.16h/d 的光照,2000lx。,第一节蔬菜脱毒与快繁,第二节 果树的脱毒与快繁,葡萄,苹果,第9章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术,草莓,一、苹果的脱毒与快繁,(一)、苹果的形态特性和生物学特性,苹果(Malus pumila)属落叶乔木,树木高大。果实为假果。 苹果喜凉;喜光;适合在微酸性到中性土壤中栽种。,第二节果树脱毒与快繁,(二)、脱毒技术,1、病毒种类:苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟病毒等 。 2、微尖嫁接脱毒:砧木:去顶的离体培养幼苗,接穗:试管培养的无毒新稍;嫁接后培养生叶,移栽即可。 3、热处理脱毒:把植株置于38 下25-50天。 4、茎尖培养脱毒:把0.1-0.3mm的茎尖离体培养。 5、脱毒苗的鉴定:抗血清法,电子 显微镜法,ELISA法、指示植物法。,第二节果树脱毒与快繁,(三)、苹果茎尖脱毒快繁技术,1、材料与消毒:带芽或茎尖的茎段;常规消毒,用无菌水洗35次 ;切茎尖约0.10.5mm。 2、芽的诱导:MS或LS+BA2+300500CH或LH+3%蔗糖的培养基上,诱导芽的分化。 3、继代增殖培养:MS+BA0.51+CH300 培养基上增殖。 4、生根培养:1/2MS或 White,Nitsh附加IAA1、IBA0.2和GA33 等。,第二节果树脱毒与快繁,(四)苹果花粉培养,1、选材与预处理:选取中心花蕾吐红,周围花蕾明显增大,但花序尚未分离的花蕾,置于冰箱中1-3预处理。 2、消毒:70%的酒精浸约0.5min,再在10%漂白粉上清夜中浸1520min。 3、胚状体诱导:接种到MS+2,4-D0.4 + KT0.2 + IAA4 + 38%蔗糖培养基上,2530下培养。 4、生根:同茎尖脱毒中所用方法。,第二节果树脱毒与快繁,(五)胚培养,1、取材消毒:取授粉3050d内的幼果,用70%酒精擦拭。取出种子,剥出幼胚或成熟胚。 2、启动培养:接种在BA0.25+IAA0.5的1/2MS培养基上。培养条件为2530和15002000lx光照14h。 3、分化增殖:移植到加有BA0.51.0和CH300的1/2MS培养基上 ,在光下培养条件同上。 4、生根培养:同茎尖培养。,第二节果树脱毒与快繁,二、葡萄的脱毒与快繁,(一)、形态特征和生物学习性 葡萄属落叶木质藤本植物,葡萄地上部分的茎细。节上具有卷须,可向上攀援。叶近圆型或卵型,35裂。 葡萄原产于温带地区,不太抗寒。葡萄的根系抗寒力很弱,在57时即受冻。,第二节果树脱毒与快繁,(二)、葡萄的组织培养,1、选材接种:从生长旺盛的葡萄新梢顶端取12的茎尖。消毒。分离出约2长的茎尖,接种到培养基上。 2、培养基:MS培养基(无机盐减半为好),再添加BA12,NAA0.01,LH100,蔗糖2%,琼脂0.6%,而B5培养基愈伤组织化严重,茎尖生长不好。 3、苗分化:BA0.5,同时添加GA30.2,黑暗处理可促进幼茎的伸成,提高成苗率。 4、根分化:将苗转入MS+IAA0.4+NAA0.05培养基中进行生根。,第二节果树脱毒与快繁,(三)、葡萄无病毒苗的培养,葡萄受到26种病毒的危害。由于病毒的危害,葡萄的长势减弱,产量降低,果实的糖分含量减少,风味变劣。葡萄卷叶病是危害最大的病毒病。,第二节果树脱毒与快繁,(三)、葡萄无病毒苗的培养,1、热处理脱毒: (1)葡萄无性系处理:材料置于38,CO2120010-6的人工空气侯箱内。经30min处理,较易从枝条尖端或休眠芽中除去扇叶病毒。 (2)将感染材料的修面芽插入健康指示植物的蔓中,然后在38的环境中保持2个月,以后取出枝条和接种芽继续生长。 (3) 直接将葡萄蔓浸泡在50的 温水中1020min,可以治疗皮尔斯病,但不能治疗黄点病及卷叶病。,第二节果树脱毒与快繁,2、组织培养脱毒技术 (1)、茎尖接种后变绿、增大期的培养:在25,相对湿度80%,16h的长日照条件下水培生成的嫩茎取0.20.3mm 茎尖接种于 1/2MS,添加NAA0.1,BA1.0,Kt0.5,腺嘌呤4.0,蔗糖30g/L,琼脂6.0,pH5.8培养基上。 (2) 从畸形叶和茎叶伸长期:采用1/2MS,添加IAA0.2,BA0.1,KT0.5,腺嘌呤4.0,蔗糖30g/L的培养基。 (3)地上部和地下部的伸长期:Galzy(1964)培养基,添加NAA0.1。,(三)、葡萄无病毒苗的培养,第二节果树脱毒与快繁,三、草莓的脱毒与快繁,(
网站客服QQ:2055934822
金锄头文库版权所有
经营许可证:蜀ICP备13022795号 | 川公网安备 51140202000112号