3.2体外受精和早期胚胎培养,学习目标： 1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。,一、试管动物技术,(1)概念： 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经过移植产生后代的技术 试管动物技术的三步 第一步：卵子和精子的成熟和受精 第二步：培养为早期胚胎 第三步：胚胎移植,阅读教材，思考：,卵母细胞采集的方法有哪些？采集的卵母细胞都能直接和获能的精子受精吗？,2、收集精子的方法有哪些？体外使精子获能的方法有哪些？,3、一般在什么溶液中完成受精过程？,4、,5、发育培养液的成分有哪些？胚胎早期培养的目的？,1、,教材72页图3-14中，卵母细胞培养的目的？ 精子离心处理的目的？,（培养成熟，至减中期）,（分离精子，便于获能处理）,二、试管动物技术的过程,1、体外受精,卵母细胞的采集和培养,采集方法：,超数排卵:用促性腺激素处理，从输卵管中冲取卵子。,注意：卵子能直接与获能的精子在体外受精。,常用对象：实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等,注意：要在体外经人工培养成熟后，才能与精子结合完成受精。,刚屠宰母畜的卵巢中取卵或活体动物卵巢中取卵。,常用对象：大家畜或大型动物，如牛等,1、体外受精,精子的采集和获能,收集的方法：,获能的方法：,假阴道法、手握法、电刺激法,培养法:,化学诱导法:,如：啮齿动物、家兔和猪等,如：牛、羊等家畜,放入人工配制的获能液中,放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,卵巢,卵母细胞,新鲜或解冻的精液,卵母细胞培养,精子离心处理,M期卵母细胞,精子获能处理,获能精子,体外受精,受精卵培养,在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程,受精,哺乳动物体外受精过程的示意图,2、胚胎的早期培养,培养液成分：,早期培养的目的：,两盐、两素、两酸、血清等,检查受精状况和受精卵的发育能力,牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段 试管婴儿：8-16个细胞阶段,胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。,3、胚胎移植,不同动物胚胎移植时间不同。,课内小结,有性生殖 无性生殖,核移植技术、 胚胎移植,遵循 不遵循,体外受精 胚胎移植,比较试管动物和克隆动物,来自2个个体 主要来自核供体,巩固练习,1、下列关于试管动物技术的叙述正确的是：,A、应用该技术繁育后代的过程属于无性繁殖类型 B、应用该技术繁育后代的过程属于有性繁殖类型 C、试管动物技术是利用体细胞繁育后代的技术 D、试管动物技术培育动物过程全部在体外进行,B,2 、 哺乳动物体外受精的过程是 ( ) 卵母细胞的采集 精子的采集 卵母细胞的人工培养 精子的获能处理 精子与成熟的卵子在受精溶液中共同培养 用CaCl2处理精子 用一定浓度的肝素溶液处理卵母细胞 体外受精 受精卵培养,B,4、胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。,(1)从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是 ；从良种公牛采集的精子需_后才能进行受精作用。 (2)在体外培育受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供 气体以维持 。,(3)图中过程A称为_， 它在胚胎工程中的意义在于 。 (4)研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是 ；获得转基因母牛后，如果 即说明目的基因已经表达。,使卵母细胞成熟,获能,5%的CO2,培养液的pH,胚胎移植,提高优良母畜的繁殖力,显微注射法,牛奶中含有人类白细胞介素,