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实验七胃肠运动的直接观察离体肠段平滑肌运动的描记目的:1.动物在体胃肠运动及调节2.了解肠段平滑肌的生理特性3.学习离体肠段平滑肌运动描记的实验方法原理:胃肠道平滑肌经常维持一定的紧张性收缩,在体内受到神经和体液的调节。在神经及某些药物的作用下,这种紧张性及运动节律可发生改变。神经调节中,副交感神经通过释放乙酰胆碱使其运动加强,交感神经通过释放去甲肾上腺素使其运动减弱。原理:胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的乙酰胆碱能激动M受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌。阿托品与胆碱受体结合阻断胆碱能递质从而产生抗胆碱作用。新思的明作为胆碱酯酶的抑制剂,抑制乙酰胆碱的分解,使乙酰胆碱的作用持续加强。原理:消化道平滑肌的特点是兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性,自动节律性,对化学物质,温度和机械牵张刺激较敏感等特点,给予离体肠肌一接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。本实验观察当模拟内环境发生变化时,离体小肠平滑肌运动的变化。消化道平滑肌一般特性:1.兴奋性低,收缩缓慢(静息电位变化大,-50至-60mv,由大量K+外流、少量Na+和Cl-内流形成),2.自动节律性(BER,节律自动去极化、复极化的缓慢慢波电位;一旦去极化达到阈电位-40mv,大量Ca2+和少量Na+快速内流即产生动作电位)3.伸展性4.紧张性5.对化学、温度和机械牵张刺激的敏感性慢波电位(基本电节律)频率:胃3次min;十二指肠12次min;回肠末端89次min波幅:1015mV产生机制:可能与细胞膜上生电性钠泵的活动有关。动作电位特点:锋电位上升慢、时程较长(1020ms)、幅值较低。产生机制:主要是Ca2+内流原理:该实验方法不仅在理论上证明平滑肌的生理特性,而且还可用来测量化学物质或药物的生理学特性,被称为生物学鉴定法。材料与设备:l家兔,手术台,手术器械,麦氏浴槽,恒温水浴,RM6240,张力换能器,氧气袋,铁架台,烧杯,酒精灯,滴管,注射器,台氏液,阿托品(0.5mgml),新思的明(1mgml)0.01%肾上腺素,0.01%乙酰胆碱,1molLNaOH,1molLHCl方法与步骤:一.胃肠运动观察:1.手术操作:(1)家兔称重,麻醉(2)将兔子仰卧位固定于手术台上(3)剪腹部毛,沿腹中线切口,剖开腹腔,暴露胃肠。方法与步骤:2.实验项目:(1)观察正常情况下胃和小肠的运动。注意其紧张度(可用手触摸胃测其紧张度)。(2)由耳缘静脉静脉注射新思的明0.25ml,或滴几滴于胃肠浆膜上,观察胃和小肠运动的变化。(3)在新思的明作用的基础上,注射阿托品0.25ml,观察胃和小肠运动的变化。方法与步骤:二.离体小肠平滑肌的生理特性:1.实验准备:装备麦氏浴槽,将其放置于37恒温水浴。麦氏浴槽内盛满37台氏液,将充满氧气的球胆经橡皮管连接至麦氏浴槽乙型通气管上,不断注入氧气,调节气流速度,使气泡一个接一个注入。RM6240方法与步骤:2.在幽门下端分离十二指肠3-4cm,双结扎此肠段,于双结扎中间将肠段剪断,用台氏液反复冲洗肠内容物,在其两端穿线,将一端固定于麦氏浴槽乙型通气管挂钩上,另一端与张力换能器相连。3.待此装置稳定10-20分钟后,使用RM6240记录小肠段平滑肌运动曲线。方法与步骤:4.实验项目:(1)观察记录37台氏液中的肠段节律性收缩曲线。(2)观察记录25台氏液中的肠段节律性收缩曲线。方法与步骤:(3)待台氏液温度稳定在37后,用滴管向浴槽中加入0.01%乙酰胆碱3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。(4)待平滑肌稳定后,加入0.01%肾上腺素3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。方法与步骤:(5)滴加1molLHCl溶液3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。(6)滴加1molLNaOH溶液3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。注意事项:1.实验操作过程中,注意动物保温。经常用温热的生理盐水湿润胃肠。2.取小肠标本时勿牵拉;标本安装好后应在台氏液里稳定5-10分钟,待标本有收缩活动时即可开始实验。3.保证氧气的补充以及换液时台氏液的温度为38度。实验要求:l描述各项实验项目所得实验现象并分析。l描记小肠平滑肌运动曲线,并分析各种因素对其影响的机制。
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