BECKMAN COULTER Gen.S全自动血液分析仪分析性能评价 作者：陆红，王明山，王忠永，徐斐，屠鸿翔，朱丽青，林向阳【摘要】 目的 ：对BECKMAN COULTER Gen.S全自动血液分析仪的性能进行系统评价。方法 ：利用Westgard方法评价决策图判断WBC，RBC，HGB，PLT和Hct方法性能的可接受性;利用国际血液学标准化委员会(ICSH)、美国临床和实验室标准协会(CLSI)制定的评价标准对其线性和携带污染率进行评价;利用室内质控变异系数的平均值以及卫生部全血细胞分析能力验证回报结果的相对偏差的平均值简易评价仪器的精密度和准确度。结果：BECKMAN COULTER Gen.S全自动血液分析仪各项指标性能全为优良;在给定的线性范围内线性良好(r >0.998);各参数的携带污染率低，均小于1%;精密度和准确度良好。结论：BECKMAN COULTER Gen.S全自动血液分析仪各方面性能良好，符合实验室性能标准。 【关键词】 BECKMAN COULTER Gen.S全自动血液分析仪;性能;评价随着现代医学的发展， 全自动血液分析仪越来越多地应用于临床，实验室能否通过血液分析仪得到准确可靠的测定结果，取决于分析仪的各项性能指标，因此，在临床使用时，首先要对分析仪的性能进行评价。本研究对BECKMAN COULTER Gen.S全自动血液分析仪分析项目方法性能的可接受性、携带污染率、线性等许多方面进行了评估，现报告如下。1 材料和方法1.1 仪器和试剂 BECKMAN COULTER Gen.S全自动血液分析仪及其配套试剂、质控品、校准品为美国贝克曼库尔特公司产品。1.2 标本来源 本研究的标本来源于健康体检者100例和各种临床病人50例，新鲜静脉抗凝全血采用EDTA.K2抗凝管收集，抗凝剂终浓度为1.52.2 mg/mL。1.3 方法 全血细胞计数(CBC)检测严格按照分析仪的操作说明进行，每日进行日常全血质控。在进行携带污染率、线性评价之前，用S-cal校准品进行校准。1.3.1 分析项目方法性能的可接受性:采用方法评价决策图(Method Evaluation Decision chart，MEDx Chart)1，评价血液分析仪的分析方法性能是否满足质量规范的要求。方法评价决策图中涉及到2个重要指标即不精密度(S)和不准确度(bias)，其分别代表了分析方法的重复性和准确性。参照美国临床实验室改进修正法案(CLIA88)能力验证中分析质量要求的临床允许总误差(allowable total error，TEa)2，绘制Westgard方法评价决策图，根据分析方法的不精密度和不准确度在图中所处的位置，定义分析方法的性能为不符要求性能、临界性能、良好性能和优良性能。将本室2007年3个水平室内质控(低、中、高3个浓度水平)变异系数的平均值代表仪器的不精密度，计算出不精密度占临床允许分析总误差的百分比(s% of TEa);根据卫生部2007年两次全血细胞分析能力验证的5个回报结果相对偏差的平均值来代表不准确度，并计算不准确度所占临床允许分析总误差的百分比(bias% of TEa)。将计算出的s% of TEa标记在Westgard方法评价决策图的横坐标上，bias% of TEa标记在纵坐标上，根据标准化操作点在图上的位置判断方法的性能。参照CLIA88能力验证的分析质量要求，HGB的TEa为靶值7%，RBC的TEa为靶值6%，WBC的TEa为靶值15%，PLT的TEa为靶值25%，Hct的TEa为靶值6%。1.3.2 线性评价：利用国际血液学标准化委员会(ICSH)、美国临床和实验室标准协会(CLSI)制定的评价标准3-5对BECKMAN COULTER Gen.S血液分析仪的线性进行评价。将WBC，RBC，HGB和PLT的高值标本用血液分析仪的稀释液稀释为100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%和10%以及用稀释液做0浓度时的检测，平行检测各稀释标本2次，取其均值为检测值，并与经计算所得的期望值相比较。1.3.3 携带污染率评价：分别选取高、低值的WBC，RBC，HGB和PLT，先连续检测高值标本3次(Hl、H2、H3)，然后连续检测低值标本3次(Ll、L2、L3)，计算公式为：携带污染率(%)=(L1-L3)/(H3-L3)100%。1.3.4 精密度与准确度评价：本研究采用简易评价方案，以2007年本室3个水平室内质控(低、中、高3个浓度水平)变异系数的平均值评价仪器的精密度;以卫生部2007年两次全血细胞分析能力验证的5个回报结果相对偏差的平均值评价仪器的准确度。1.4 数据处理 所有结果采用Excel软件进行分析和处理。2 结果2.1 本底检测 2次检测WBC，RBC，HGB和PLT的本底，计数均为0。2.2 分析项目方法性能的可接受性 各分析项目的不精密度和不准确度(%)数据见表1。结果显示，BECKMAN COULTER Gen.S全自动血液分析仪测定的WBC，RBC，HGB，PLT和Hct的标准化操作点全部落在方法评价决策图的“Excellent”区域，分析性能全部为优良，见图1。2.3 线性评价 WBC，RBC，HGB和PLT在稀释浓度为100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%以及0时的期望值和实测值见表2。结果发现，血液浓度为100%和90%两点的WBC线性不理想，舍去;其余检测参数各稀释度的实测值与期望值之间密切相关(r >0.998)。 线性范围与厂商宣称要求符合。2.4 携带污染率 WBC，RBC，HGB和PLT的携带污染率分别为0.54%、0.62%、0.55%、0.61%，能满足临床要求，具体见表3。2.5 精密度与准确度评价 具体数据参见表1，结果可见WBC，RBC，HGB和PLT变异系数分别1.7%、0.9%、0.9%、3.3%，精密度结果符合厂商宣称要求;WBC，RBC，HGB和PLT与卫生部给定靶值的相对偏差也分别1.7%、0.9%、0.9%、3.3%，准确度结果也符合厂商宣称要求。3 讨论按照ISO15189要求，临床实验室在建立或对原有分析系统进行改进时，必须对分析方法的分析性能进行评价，并与确定的性能标准或性能目标进行比较，以确定分析方法是否满足临床和实验室的要求。常规需要评价的内容包括：精密度、准确度、空白值、线性和携带污染等。本研究对BECKMAN COULTER Gen.S血液分析仪分析项目方法的可接受性、线性和携带污染率进行了具体的评价，对其精密度、准确度做了简易评价。结果表明BECKMAN COULTER Gen.S血液分析仪测定WBC，RBC，HGB，PLT和Hct的性能全部为优良，线性好，携带污染率非常低，精密度和准确度良好。本研究引入Westgard方法评价决策图，客观评价全血细胞分析方法的性能是否满足质量规范的要求。从图1可见，BECKMAN COULTER Gen.S血液分析仪测定WBC，RBC，HGB，PLT和Hct的性能全部为优良，能够满足临床对实验室的需求。在实际工作中，为了能使检测标本结果快速、准确地报告出来以及减少成本，医学实验室不可能经常对仪器进行全面、系统的性能验证。由于Westgard方法评价决策图利用室内质控和室间质评数据，方便且客观地评价分析项目方法性能的可接受性，减少误差的来源，为实验室工作人员观察分析方法的性能变化提供依据，并分析原因，提高实验室工作效率和质量。由表2可见，WBC，RBC，HGB，PLT线性试验证实能达到厂商提供的范围，且线性良好，各检测参数在各稀释度时的实测值与期望值之间密切相关(r>0.998)。由于方法的分析范围足够宽，对于实验室所服务的人群，95%99%的样品不需经预处理便可以直接分析。但对于超过线性范围的样品，如WBC超过116.8109/L时(见表2)，线性不理想，应用适当的稀释液和稀释方法进行稀释后重分析，但需注意不可超过最大稀释倍数进行稀释。BECKMAN COULTER Gen.S血液分析仪四个检测指标的分析方法，其携带污染率均小于1%，符合厂商宣称要求，因此，完全符合在自动进样模式下检测。本研究利用室内质控和室间质评数据简易客观评价仪器的精密度和准确度。医学实验室基本开展室内质控，因此数据来源方便，但是一些医学实验室只采用某一水平进行室内质控，这样不能全面反应仪器的精密度，本研究采用低、中、高三水平室内质控的平均变异系数来评价仪器精密度，能较全面系统反应仪器的重复性。在对仪器的准确度进行评价时，需有一个可进行比较的真值，本研究利用每年两次卫生部室间质评中给出的靶值作为真值，对仪器进行准确度评价，既解决了真值来源难的问题，又客观评价了仪器的准确度。通过对BECKMAN COULTER Gen.S血液分析仪性能进行系统分析发现，该仪器无本底计数，携带污染率非常低，检测线性良好;仪器准确、精密、可靠，符合实验室性能标准，因此，适用对大批量全血细胞标本进行快速有效的筛检。【参考文献】 1 Gernand W, Solnica B, Naskalski JW. An example of a boot-strap technique application for judging a variability of methodperformance estimates and its consequences for quality con-trol planning J. Clin Chim Acta, 2007, 384(1-2):160-162.2 Medicare, Medicaid,and CLIA programs;extension of cer-tain effective dates for clinical laboratory requirements un-der CLIA. Centers for Disease Control and Prevention (CDC)and Health Care Financing Administration (HCFA), HHS.Final rule with comment period S. Fed Regist,2000,65(251):82941-82944.3 Briggs C, Kunka S, Pennaneach C. Performance evaluationof a new compact hematology analyzer, the Sysmex pocH-100i J. Lab Hematol,2003,9(4):225-233.4 National Committee for Clinical Laboratory Standards. Leu-kocyte Differential Counting NCCLS Approved StandardH20-A2 S.Villanova,PA,1992.5 National Committee for Clinical Laboratory Standards.Howto define and reference intervals in t