资源预览内容
第1页 / 共54页
第2页 / 共54页
第3页 / 共54页
第4页 / 共54页
第5页 / 共54页
第6页 / 共54页
第7页 / 共54页
第8页 / 共54页
第9页 / 共54页
第10页 / 共54页
亲,该文档总共54页,到这儿已超出免费预览范围,如果喜欢就下载吧!
资源描述
福建医科大学 硕士学位论文 脑心通联合双联抗栓防治冠脉内微栓塞的动物实验研究 姓名:钟文娟 申请学位级别:硕士 专业:内科学(心血管病) 指导教师:陈慧;吴小盈 20100401 脑心通联合双联抗栓防治冠脉内微栓塞的动物实验研究 中文摘要 目的 通过建立大鼠冠脉微栓塞( C M E ) 模型,比较脑心通胶囊联合双联抗栓( 氯吡 格雷+ 阿司匹林) 与单纯联合双联抗栓治疗和单纯脑心通胶囊处理后对C M E 血栓数 量、心肌细胞凋亡率及出血凝血之间平衡的影响,探讨中西医联合治疗的优势, 为寻找调节双联抗栓后造成机体的紊乱提供实验依据。 方法 以清洁级S D 大鼠为研究对象,自心尖部注入同源大鼠血栓建立C M E 模型。 根据预实验结果,选取9 5 只大鼠随机分为6 组,即对照组( C L 组,n = l O ) 、假 手术组( S O 组,n = l O ) 、模型组( C M E 组,n = 1 5 ) 、脑心通胶囊组( N J 组,n = 1 5 ) 、 双联抗栓组( D A 组,n = 3 0 ) 、脑心通胶囊+ 双联抗栓组( N D A 组,n = 1 5 ) 。6 9 只大 鼠获得完整数据( C L 组= 1 0 、S O 组= 1 0 、C M E 组= 1 1 、N J 组= 1 1 、D A 组= 1 3 和N D A 组= 1 4 ) 。术前预给药3 天,术后继续用药7 天,取血后处死动物收集心脏标本。 H E 染色观察C M E 血栓数量,T U N E L 染色结合活化型c a s p a s e 一3 免疫组化法测定心 肌细胞凋亡率,剪尾法检测出血时间,玻片法检测凝血时间,比浊法检测血小板 聚集率。 结果 1 C M E 模型鉴定 与S O 组比,C M E 组出凝血时间明显下降( P 0 0 5 ) ;C M E 组与S 0 组比较,心 肌细胞凋亡率明显增加,二者差异具有显著统计学意义( P O 0 5 ) ;C M E 组与S O 组比较,出凝血时间明显缩短,二者差异具有统计学意 义( P 0 0 5 ) ;C M E 组与S O 组比较,不同浓度A D P 诱导的最大血小板聚集率明显增 加,二者差异具有显著统计学意义( P 0 0 1 ) 。表明冠脉微栓塞后,小面积的心 肌梗死激活了血小板,引起血小板功能亢进,对诱导剂A D P 敏感性增高,引发血 小板聚集增强。( 表4 ) 表4 不同浓度A D P 诱导的最大血小板聚集率的比较( x s ) 注:与S 0 组比较,# t t P 0 0 5 。P A R 血小板聚集率 3 药物干预对大鼠C M E 血栓数量、心肌细胞凋亡率的影响 3 1 药物干预后C M E 血栓数量的比较 与c M E 组比较,N J 组、D A 组、N D A 组C M E 血栓数量百分比显著降低( 2 9 0 4 0 $ 1 8 5 0 $ v s 2 5 6 5 1 9 2 0 $ ,2 1 0 3 1 8 2 0 $ ,1 8 8 0 0 $ 1 9 7 0 $ ,P O 0 1 ) 。D A 组和N D A 组均明显低于N J 组,差异有显著统计学意义( P 均 0 0 1 ) 。N D A 组血栓 数量百分比降低幅度明显强于D A 组( P 0 0 1 ) 。提示药物干预后能够减少冠脉微 栓塞大鼠的血栓数量,脑心通联合双联抗栓效果最显著。( 表5 、图4 ) 表5 药物干预后H E 染色冠脉内微栓塞形成的比较( X s ) 注:与C M E 组比较,料P O 0 1 ;与N J 组比较,$ $ P O 0 1 ;与D A 组比较,P O 0 1 。 3 2 药物干预对心肌细胞凋亡率的影响 1 7 与C M E 组比较,N J 组、D A 组、N D A 组免疫组化法检测心肌细胞凋亡率显著 降低( T U N E L 法:“4 5 1 2 6 v s 8 0 0 1 0 8 ,5 2 9 0 8 7 ,2 8 3 1 0 0 , P O 0 1 ;活化型c a s p a s e - 3 表达法:1 2 2 2 1 1 1 v s 9 0 4 0 9 3 ,5 5 9 1 0 8 ,2 6 9 0 9 1 ,P O 0 1 ) 。D A 组和N D A 组均明显低于N J 组,差异有显 著统计学意义( P 均 0 0 1 ) 。N D A 组心肌细胞凋亡率降低幅度明显强于D A 组 ( P 0 0 1 ) 。提示药物干预后可以减少心肌细胞凋亡,脑心通联合双联抗栓治疗 能够最有效的减少心肌细胞凋亡率。免疫组化法检测活化型c a s p a s e - 3 表达与 T U N E L 法S p e a r m a n 相关系数为0 9 7 5 ,P O 0 1 ,有显著统计学意义。( 表6 ,图5 、 图6 ) 表6 药物干预后免疫组化法观察冠脉内微栓塞后心肌细胞凋亡率的比较( x s ) 注:与C b l E 组比较,幸幸P O 0 1 :与N J 组比较,$ $ P O 0 1 ;与D A 组比较,AP O 0 1 。 4 出血凝血平衡的影响 4 1 药物干预后大鼠死亡率的比较 在排除意外死亡后,通过对术后存活大鼠进行死亡率的比较,差异具有显著 统计学意义( P 0 0 1 ) ,各组之间两两比较采用X 2 分割法,检验水准a 为0 0 0 7 1 , 仅D A 组和N D A 组死亡率差异具有统计学意义( P O 0 0 7 1 ) 。提示相比中西药组, 西药处理后提高了手术中及术后大鼠死亡率,而加用脑心通胶囊大鼠死亡率明显 下降。( 表7 ) 表7 药物处理后任两组大鼠死亡率间的比较 4 2 药物干预后大鼠出血发生率的比较 手术中D A 组心尖穿刺出现出血不止的情况( 超过2 0 m i n ) ,而其他各组均未 出现此种情况,我们认为是药物干预后出现出血的副作用。药物干预后各组大鼠 出血发生率差异的比较具有显著统计学意义( P O 0 1 ) 。C M E 组、N J 组、N D A 组和 D A 组比较,采用X 2 分割法,检验水准a 为0 0 0 8 3 ,出血发生率差异具有统计 学意义( P 均 0 0 0 8 3 ) 。表明阿司匹林联合氯吡格雷预处理后大大提高了手术出 血的发生率,而加用脑心通胶囊后却能够抑制出血发生。( 表8 ) 表8 药物处理后与D A 组出血不止发生率的比较 1 9 4 3 出凝血时间的比较 与C b i E 组比较,N J 组、D A 组、N D A 组出凝血时间明显延长( 出血时间:4 5 9 m i n 1 5 6 m i nY S 2 3 4 7m i n 3 6 2m i n ,4 2 4 3m i n 3 5 8 m i n ,3 0 9 3m i n 3 0 1 m i n ,P O 0 1 ;凝血时间:1 4 1 9 1S 2 6 0 7SV S 2 5 3 0 9S 3 5 4 3S ,3 2 2 0 8 s 3 1 3 3s ,2 9 1 0 7s 2 9 6 6s ,P O 0 1 ) 。D A 组和N D A 组均明显长于N J 组, 差异有显著统计学意义( P 均 0 0 1 ) 。D A 组出凝血时间长于N D A 组,差异有统计 学意义( P 0 0 1 或P O 0 5 ) 。提示药物干预后能够抑制血小板活化,减慢出凝血 过程,延长出凝血时间。尤以双联抗栓组出凝血时间最长。( 表9 ,图7 、图8 ) 表9 药物干预后出凝血时间的比较( x S ) 注:与O I E 组比较,| c 柙 0 0 1 与N J 组比较,$ $ P O O l ;与D A 组比较,P O 0 5 , P O 0 l 。 4 4 血小板聚集率的比较 与C M E 组比较,N J 组、D A 组、N D A 组不同浓度A D P 诱导的最大血小板聚 集率显著降低( 5 P o m L :6 3 6 1 4 6 7 v s 3 9 0 0 5 4 3 ,5 2 5 3 7 9 , 1 8 5 3 4 6 9 ,P O 0 1 :2 0 m L 6 8 5 0 5 7 3 V S 4 4 4 4 6 9 5 ,1 0 6 3 5 6 2 ,2 4 8 9 7 5 6 ,P O 0 1 ) 。D A 组和N D A 组均明显低于N J 组,差异有 显著统计学意义( P 均 O 0 1 ) 。D A 组不同浓度A D P 诱导的最大血小板聚集率显著 低于N I ) A 组( P 0 0 1 ) 。提示药物干预能够抑制冠脉微栓塞后大鼠的血小板活化, 降低血小板聚集,对A D P 诱导的血小板聚集率显著降低,从而可能抑制血栓形成。 双联抗栓治疗组最大血小板聚集率降低幅度最大( 表1 0 ,图9 ) 表1 0 药物干预后不同浓度A D P 诱导的最大血小板聚集率的比较( X s ) 注:与C M E 组比较,料P 0 0 1 ;与N J 组比较,$ $ P 0 O l ;与D A 组比较,A A P 0 0 1 。 2 1 附图 图l : E 染色观察冠脉内徽栓塞结果 C L 组( 圉A ) 和S O 组( 目B ) 极少见到冠脉内微挂塞形成,锄m 低f 自镜( 目c ) 可见到稚脉内微m 桂 o l E 组高倍镜( 圈D ) 日见血栓主g 自m 小板、纤维秦和或红细胞等组成。圈 cz 胍染色1 0 0 ,图D : 睫枭色4 0 0 ,图中标R 长度2 0 F 日。 、 I 、 A ,BC V 图2T L | N E L 蛙检测心肌细胞* 亡结果 C L 组( 图 ) 和S 0 组( 图B ) 极少见到掏亡的一G , J g 啪胞,a E 组( 圈c ) 日t 的心肌细胞叫增多。棱染 成萑黑色的为橱t 心肌细胞。T U N E L 法x 4 C g ,圈中袱长度2 0 帅。 圉3 :话化型c a s p B s e 一3 表达法检测。肌细胞捐t 结果 c L 组( 圈 ) 和s o m ( 罔B ) 饭见到月t 的心肌细胞0 I E 组( 图c ) 亡= I n 心肌细胞明i 增多。臆浆 黼零j 餮窿 染成棕色的为调t o 肌目胞。活化型c a s p s e3 表选法X4 0 0 图中标尺长度2 0 岫。 目4 :药物干预目雎船色观察R 内馓栓皋结* c I I E 组( 图 ) 咏内罐m 挂叫显增多,町组( 瞄B ) 、D A 组( 圈C ) 、 组( 圈D ) 冠脉内0 E m 栓数量 百分比敞敬减少。旺染色1 0 0 圈中栝尺长度2 0 妇 圈5z 药物干预后T U I _ _ E L 检测心肌细胞摘亡结粜 眦组( 圈 ) W 亡的。肌艟明显增多耵组( 圈B ) 、D 组( 图c ) 帅 组( 圈D ) 心肌细胞凋t 齄量 依扶碱少。棱染成蓝黑色的为翻亡心肌细胞。啪L 法4 0 0 t 图中标尺长度2 0 衄 圈6 :药物f 预后活化型c a s ! o 一3 表选法检测心肌细胞捅亡结果 0 I E 组( 圈 ) * 亡的心肌镕胞明坩多,町组【雷B ) ,D 蛆 圈c ) 、m 组( 圈心肌日腿确t 数量 依攻减少。胞壤染成棕色的目亡心肌目腮。话化型c a 8 p 丑8 e3 表选珐4 0 0 ,目中标尺长度2 0 岫一 m 一 - H M 岔a 一 己 1 0 一 图7 药物干预后各组出血时问的比较( 与c 脏组比较,柑P
网站客服QQ:2055934822
金锄头文库版权所有
经营许可证:蜀ICP备13022795号 | 川公网安备 51140202000112号