1 转染前一天，4-510* 4细胞接种在 24 孔板上， 0.5mL 含 FBS 和抗生素的 DMEM（或 Opti-MEM，其他培养基）细胞培养基。2 选择用于初期接种的细胞数量，应能在24小时内使细胞汇合达到70-90%。3. 在50l的DMEM（或Opti-MEM，或其他无血清培养基）无血清培养基加入20pmol siRNA(或0.8g DNA)，柔和混匀； 4. 混匀 lipofectamin 试剂，用 50l 无血清的 DMEM 或Opti-MEM，或其他无血清培养基）稀释 1l lipofectamin 试剂（DNA转染时，则加入2llipofectamin试剂） ，轻轻混匀，室温放置5分钟； 5. 将稀释好的 siRNA 和 Lipofectamin 试剂混合；轻柔混匀，室温放置 20 分钟 , 以便形成 siRNA/lipofectamin （或DNA/lipofectamin）复合物。 6. 将 100l siRNA/lipofectamin（或 DNA/lipofectamin）复合物加到含有细胞和培养基的培养板的孔中，来回轻柔摇晃细胞培养板板。7 细胞在CO2培养箱中37温育24h-48h后，进行转染后的其它检测步骤。如果细胞株比较敏感，孵育4-6小时后，除去复合物，更换培养基。