细胞的死亡类型及检测方式 细胞死亡类型 经典的细胞死亡类型： 坏死 凋亡 自噬性死亡 其他死亡类型 Immunogenic Cell Death Ferroptosis等 坏死(Necrosis) 极端的物理、化学性损害因子或严重的病理性刺激（如 缺氧、营养不良等）导致的细胞被动死亡，是非正常死 亡。 细胞器膨胀变形 染色质随机降解 细胞膜发生渗漏 导致细胞内容物释放到胞外，从而引起炎症反应 细胞坏死的常用检测方法 1、形态学（细胞肿大） 2、DNA检测分析（DNA Ladder实验呈弥散状） 3、流式细胞技术（Annexin V和PI双标记） 凋亡(Apoptosis) 由基因调控的自杀程序性主动死亡 特点是核固缩、DNA降解、不引起炎症、质膜不破裂、产 生凋亡小体等 凋亡(Apoptosis) Dale E.B. et al., Nature,2006. Cell death in the nervous system 常用检测方法 1、形态学（核固缩等） 2、DNA检测分析（DNA ladder法或TUNEL法） 3、凋亡相关基因检测（Caspase剪切等） 小脑颗粒神经元凋亡的核固缩和TUNEL法分析 自噬性死亡(Autophagic cell death) 自噬是继凋亡后生命科学研究的热门领域。 自噬是指膜包裹部分细胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋 白质等，形成自噬体，并于内涵体形成自噬内涵体，最后 与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物， 以实现细胞稳态和细胞器更新。 自噬的过程 自噬的研究方法 常用检测方法 1、自噬小体形成 2、自噬Marker检测（p62、LC3B等） 坏死、凋亡和自噬的比较 急性坏死一般由强烈刺激引起，发生较快。但由 于释放内容物，通常激活免疫反应，将对细胞造 成二次损伤。 自噬具有双重性，首先作为保护机制防止细胞死 亡，但是达到一定水平将促进细胞凋亡，因此通 常自噬先于凋亡。 凋亡由于需要经过激活相关基因，剪切DNA等过 程，因此一般发生时间较晚。 坏死、凋亡和自噬的比较 免疫性坏死(Immunogenic Cell Death) Jos L. Marn-Teva et al., 2011, Neuron Glia Biology 最早来自化疗药物促使肿瘤细胞死 亡后，激活免疫反应，导致肿瘤二 次死亡。 坏死的神经元释放内容物，引起炎 症反应，激活小胶质细胞等。 小胶质细胞过度激活释放的炎症因 子等将造成神经元的继发性死亡。 能检测到免疫性细胞坏死相关信号 ，如HMGB1、RAGE和DAMP 等 升高 铁死亡(Ferroptosis) 铁死亡是一类近期发现的细胞死亡形式，该类细胞坏死的特点是依赖 于铁离子。 Erastin能够抑制Cystine/Glutamate逆向转运通道，System XC-，从而导 致依赖于铁离子和活性氧升高的细胞死亡。 铁死亡的鉴别 形态学：线粒体小且膜密度高，没有DNA断裂，脂质发生过氧化 激活剂: Erastin 抑制剂：ferrostatin-1 铁死亡无法被坏死抑制剂、 Caspase抑制剂等阻断 由于脂质发生过氧化，因此 可被C11-BODIPY(581/591)识别 Erastin诱导铁死亡，线粒体变小，膜密度增高 其他非经典死亡形式 Dale E.B. et al., Nature,2006. Cell death in the nervous system