南通医学院附属医院检验科质量手册生化专业组作业指导书尿酸测定标准操作程序(SOP-201)1.目的：确保测定结果准确、可靠。2.SOP-201变动程序：由操作者提出，并经科主任审核。3.范围：测定人或动物血清、血浆及体液中的尿酸。4.溯源：全国临床检验操作规程（第二版）。5.操作程序：5.1 测定原理：本试剂采用改良Trinders方法,其反应为： 尿酸酶 尿酸+O2+H2O尿素+CO2+H2O2 过氧化物酶 H2O2+AAP+TBHBA醌亚胺+H2O式中AAP=4-氨基安替比林，TBHBA=3-羟基-2，4，6三溴苯磺酸。通过上述二步反应，最终产生醌亚胺色素，其浓度随尿酸含量的比例而变化，在波长520nm处读取吸光度即可计算其含量，试剂中加亚铁氰化钾可抑制样品中胆红素的干扰。5.2 试剂：5.2.1 试剂：过氧化物酶 300U/L 3-羟基-2，4，6三溴苯磺酸 2.5mmol/L 亚铁氰化钾 0.05 mmol/L 磷酸盐缓冲液 150 mmol/L 4-氨基安替比林 0.7 mmol/L 含非反应性填充物及稳定剂 试剂：磷酸盐缓冲液 150mmol/L 尿酸酶 500U/L 复星长征尿酸校准液 0.36 mmol/L5.2.2 标准品：RANDOX。 5.2.3 质控品：BECKMAN 高、中、低质控液。5.3 标本采集：静脉采血后及时分离血清，避免溶血。5.4 操作步骤：5.4.1 标本编号，分离血清，按顺序置样本架上。5.4.2 仪器校准：标准方法与上述方法相同。5.4.3 试验参数：AU1000HI7600AU1000HI7600标本（ul）53反应类型+试剂1（ul)200150S1516试剂2(ul)5043E11634波长1（nm)520546S2-波长2（nm)600660E2-方法ENDEND温度（）37375.4.4 参考值：150-430mol/l。5.4.5 室内质控： 质控品高值范围XXX-XXXX mol/L 质控品中值范围XXX-XXXX mol/L 质控品低值范围XXX-XXXX mol/L 质控方法：每天测定样品前做一组质控，在测定样品中间放一组质控品，最 后再测一组质控品，前、中、后共三组，观察每组质控的值是否有误差。 控制限（x2s）超过+2s或-2s均为失控，遇此情况，应寻找原因，另作处理。 当测定的质控品浓度达不到原瓶靶值或允许范围时，应将其重复测定20次，计算均值和标准差，再以此值作为质控用的靶值。5.5 注意事项:5.5.1 试剂自生产日起避光贮存于2-8,可稳定至瓶签所示失效日期,启用后2-8可稳定30天,若试剂混浊或以水为空白在520nm外吸光度0.4时,则不能使用。5.5.2 血清或血浆标本,均应不溶血,血浆只能用肝素EDTA抗凝,血及尿中尿酸置20-25可稳定3天,冷冻保存可达6个月。5.5.3 尿酸含量大于1.5mmol/L时,应取生理盐水将样品稀释后再测试,计算时乘以稀释倍数。5.5.4 为确保测定结果准确可靠,每批测试均应放置正常和异常质控血清与被检样品同时测试,用以检查试剂和仪器的性能。5.5.5 遇高浓度维生素C的标本,可使测定结果偏低,故不少试剂盒中加入抗坏血酸氧化酶,防止维生素C和干扰。5.6 临床意义:5.6.1 血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助,痛风患者血清中尿酸增高,但有时亦会出现正常尿酸值。5.6.2 在核酸代谢增加时,如白血病,多发性骨髓瘤,真性红细胞增多症等血清尿酸值亦常见增高。5.6.3 在肾功能减退时,常伴有血清尿酸增高,粥样硬化,糖尿病,甲减或其他遗传病亦可见高尿酸血症。5.6.4 在氯仿中毒,四氯化碳中毒及铅中毒,子痫,妊娠反应及食用富含核酸的食物等均可引起血中尿酸含量增高。5.6.5 尿酸水平降低,可见于威尔逊氏病。5.6.6 单位换算：SuA（mmol/L） 16.8=SuA（ mg/dl）授权人质量负责人部门负责人操作人员姓名日期肌酐测定标准操作程序（SOP-202）1.目的：确保测定结果准确、可靠。2.SOP-202变动程序：由操作者提出，并经科主任审核。 3.范围：测定人或动物血清、血浆及体液中的肌酐。4.溯源：全国临床检验操作规程（第二版）。5.操作程序：5.1 测定原理： 肌酐的化学速率法测定是根据肌酐与苦味酸反应，生成桔红色的苦味酸肌酐复合物的拟一级反应动力学。在碱性反应环境中，样品中的肌酐或干扰物质和苦味酸的反应速度不同，选择适宜的速率监测时间，可以提高肌酐的特异性。5.2 试剂 5.2.1 试剂：0.04mol/L苦味酸溶液； 试剂：0.32mol/L 氢氧化钠溶液；碱性苦味酸溶液：根据工作用量，将0.04mol/L苦味酸和0.32mol/L氢氧化钠溶液等体积混合，可加适量的表面活性剂（Triton X-100）,放置20分钟以后即可应用。)5.2.2 标准品：RANDOX 5.2.3 质控品：BECKMAN 高、中、低质控液5.3 标本采集：静脉采血后及时分离血清，避免溶血5.4 操作步骤：5.4.1 标本编号，分离血清，按顺序置样本架上。5.4.2 仪器校准：标准方法与上述方法相同。5.4.3 试验参数：AU1000HI7600AU1000HI7600标本(ul)1515反应类型+试剂1（ul)200150S1819试剂2(ul)50150E11022波长1（nm)520505S2-波长2（nm)600600E2-方 法FIXEDEND温度（）37375.4.4 参考值：44-144mol/L。5.4.5 室内质控： 质控品高值范围XXX-XXXX mol/L。 质控品中值范围XXX-XXXX mol/L。 质控品低值范围XXX-XXXX mol/L。 质控方法：每天测定样品前做一组质控，在测定样品中间放一组质控品， 最后再测一组质控品，前、中、后共三组，观察每组质控的值是否有误差。控制限（x2s）超过+2s或-2s均为失控，遇此情况，应寻找原因，另作处理。当测定的质控品浓度达不到原瓶靶值或允许范围时，应将其重复测定20次，计算均值和标准差，再以此值作为质控用的靶值。5.5 注意事项：5.5.1 干扰速率法测定的非肌酐色源物质有两类：一类为快速反应假肌酐物质，在样品与碱性苦味酸混合20秒内迅速出现反应，产生非肌酐的有色化合物 。另一类为慢性反应假肌酐物质，一般在样品和碱性苦味酸混合后80-100秒才开始反应。这样在20-80秒之间，出现“窗口期”，此时肌酐与苦味酸的呈色反应占主导地位。1980年对速率法进行严格评价后提出，速率法仍受到a-酮酸的正干扰和胆红素的负干扰。5.5.2 速率法线性范围可达2000umol/l,血清样本值过高可用盐水稀释；尿液标本用蒸馏水作20-50倍稀释。测定结果乘以稀释倍数。5.5.3 为确保测定结果可靠，每次测定均需放置正常和异常质控血清，与被检样品同时测定，用以检查试剂和仪器的性能。5.6 临床意义： 肌酐经肾小球滤过后不被肾小管吸收，通过肾小管排泄。在肾脏疾病初期，血清肌酐值通常不增高，在正常肾血流条件下，肌酐值如升高至176-353umol/l提示为中度至严重的肾损害。所以血肌酐测定对晚期肾脏病临床意义较大。正常肌酐浓度约为尿素氮的10分之一，在病理情况下和肌酐、尿素变化不一定平行，二者比例有一定诊断意义。尿素氮/肌酐比例大于10时应考虑增高，主要为肾外因素，见于高蛋白饮食、胃肠道出血、蛋白分解代谢亢进（烧伤、感染、消耗性疾患大量应用类固醇激素）。比值小于10见于肾实质疾病以及合并低蛋白饮食、腹泻、呕吐、 肝功能不全以及人工透析等。授权人质量负责人部门负责人操作人员姓名日期尿素氮测定标准操作程序（SOP-203）1.目的：确保测定结果准确、可靠。2.SOP-203变动程序：由操作者提出，并经科主任审核。3.范围：测定人或动物血清、血浆及体液中的尿素氮。4.溯源：全国临床检验操作规程（第二版）。5.操作程序：5.1 测定原理：本方法由Talke和Schubert首先提出，反应式如下： 尿素酶尿素+H2O2NH3+CO2 GLDH NH3+a-酮戊二酸+NADH+H+谷氨酸+NAD+H2O 在340nm处测定NADH的吸光度下降率与尿素浓度成正比。5.2 试剂：5.2.1 试剂: Tris 100mmol/L GLDH 8000U/L -KG 7.5 mmol/L 保护剂、稳定剂适量 试剂:尿素酶 9000U/L ADP 0.6mmol/L NADH 0.76 mmol/L5.2.2 标准品：RANDOX。5.2.3 质控品：BECKMAN 高、中、低质控