第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 P E 0 0 8 基于离子阱质谱的骨髓间充质干细胞中磷脂酰肌醇的鉴定 朱超，梁琼麟b ，胡坪a ，王义明6 ，罗国安“5 ，6 ， a 华东理工大学药学院，上海2 0 0 2 3 7 b 清华大学分析中心，北京1 0 0 0 8 4B - m a i hl u o ga a t s i n g h t l a e d u c a 关键词：离子阱质谱；固相萃取；骨髓间充质干细胞；磷脂酰肌醇；定性 骨髓间充质干细胞( b o n em a r r o wm e s e n c h y m es t e mc e l l ，S M M S C ) 是具有多种分化潜能的干细 胞l I _ J ，在特定条件下可分化为多种目的细胞。因此，B M M S C 在疾病治疗，药物模型筛选及病例模 型的建立中得到广泛应用【3 圳。磷脂酰肌醇( p h o s p h a t i d y l i n o s i t o l ，P I ) 作为膜磷脂的重要组成部分是 B M M S C 分化所涉及的信号转导途径中起关键作用的一员。随着分析技术的不断发展，质谱及相关 技术在脂类信号分子的检测方面取得了突破性进展 6 1 。E S I M S 的分辨率可达4 0 0 0 ( r n z 。质荷比1 ，一 般来说，细胞中脂类物质都能检得到。W e n k 等【7J 采用E S I M S 对哺乳动物的脑细胞及酵母细胞的磷 脂酰肌醇类物质进行的全谱分析。为细胞内磷脂酰肌醇的鉴定提供了方法依据，发展了质谱在脂类 相关信号转导途径研究过程中的应用。 本文采用固相萃取和直接注射离子阱质谱对骨髓间充质干细胞中的磷脂酰肌醇进行分离检测。 考察了固相萃取方法的回收率，确定了磷脂酰肌醇的分离方法及质谱测定条件。所得固相萃取前后 的磷脂酰肌醇的离子阱质谱图如图l 所示。通过对每种P 1 分子的二级质谱离子( m z = 2 4 1 、2 8 1 、2 8 3 、 3 0 3 、3 1 5 、4 1 7 、4 1 9 、5 8 1 、6 0 1 ) 的检测，确认了1 2 种P 1 分子的结构组成( 以m z = 8 8 5 、8 8 7 为例， 如图2 所示) 。 B M M S C 中磷脂酰肌醇的定性为我们今后对B M M S C 的分化机理研究提供了必要的技术支持， 特别是研究P I 类物质参与的信号转导途径，可以通过化合物的分子结构来推断该物质在信号转导途 径中是如何起作用的。因此，B M M S C 中的P I 类物质的研究具有非常重要的生物学意义。 。冠置z 晨最燃。z J | l批 I Ll 一，鬣兰， 01|。fk1 ( 8 ) 固相萃取前( b ) 固相萃取后 图I磷脂酰肌醇的离子阱质谱图 棚m z = 8 8 5 ( 3 8 ：4 ) 罗国安教授，清华大学化学系，传真：0 1 0 - 6 2 7 7 2 2 6 3 ：E - m a i h ! 坠Q g 如i 旦曲丛垒鳗丛：盟 本文系国家自然科学基金项目( N o 2 0 8 0 5 0 2 6 ，9 0 7 0 7 0 4 5 ) 和国家9 7 3 项目( N o 2 0 0 7 C B 5 1 1 9 0 3 ，2 0 0 7 C B 7 1 4 5 0 5 ， 2 0 0 5 C B 5 2 3 5 0 3 ) 资助 8 2 6 参考文献 【1 】 1 2 【3 1 【4 】 【5 】 f 6 】 【7 】 P r o c k o pD J S c i e n c e 1 9 9 7 I2 7 6 ：7 1 7 4 F d e d e n s t e i nA J 。C h a - ；i a k h y a nR K , G c r a s i m o vU v C P f ，T i s s u eK i n e t 1 9 8 7 ，8 0 ：8 6 3 8 7 2 B r a z c l t o nT R ，R o s s iF M ，K e s h e tG I ，“a 1 S c i e n c e 2 0 0 0 ，2 9 0 ，1 7 7 5 - 1 7 7 9 M e z e yE ，C h a n d r o s sK J ，G y O n g y iH 矾a ，鲋a 1 S c i e n c e ，2 O ，2 9 0 ，1 7 7 9 一l7 8 2 G e r b u r gK e i l h o f f , F e l i xS t a n g , A l e x a n d e rG o i h l e ta 1 C e l l u l a ra n dM o l e c u l a rN e u r o b i o l o g v ，2 0 0 6 ，2 6 ( 7 8 ) ：1 2 3 3 - 1 2 5 0 邓斌，罗国安分析化学，2 0 0 3 ，3l ( 3 ) ：2 3 2 2 3 8 W e n kM R , L u c a s tL ，P a o l oGD ，e ta 1 N a t u r eb i o t e c h n o l o g y , 2 0 0 3 ，7 ( 2 1 ) ：8 1 3 - 8 1 7 8 2 7