中国协和医科大学 博士学位论文 生殖支原体及解脲脲原体与男性非淋菌性尿道炎相关性的研究 姓名：蒋娟 申请学位级别：博士 专业：皮肤病与性病学 指导教师：叶顺章 20040901 日I J吾 性传播疾病是当今全球最常见的公共卫生问题之一，而非淋菌性尿 道炎则是最常见的性传播疾病之一。临床上非淋茵性尿道炎的处理较为棘 手，相当程度上是因为其病原学不甚清楚所致。除了公认的病原茵沙眼衣 原体外，其它自泌尿生殖道检出的微生物在沙眼衣原体阴性的非淋菌性尿 道炎中的致病性如何? 较普遍定植于人泌尿生殖道的解脲脲原体每每引起 医生和患者的困惑，导玫过度治疗；生殖支原体与非淋菌性尿道炎的相关 性虽已逐渐被认识，但要确立生殖支原体在非淋菌性尿道炎中的病原学地 位，了解其感染的流行病学特点、临床过程，以便及时诊断治疗，从而达 到控制传染源、切断疾病的传播与流行的目的，尚有许多问题亟待解决。 本研究就以上一些问题进行了初步探讨。 导师组成员 叶顺章教授 韩国挂主任医师 王青英研究员 缩路语 A T C C b p C t E B E P h I C m l n M g M h M S M N C N G U N g N G U n P C R o D R C F p C R p H P M N L r p m U p U U S s T D 缩略语 A m e r i c a n T y p e C u l t u r eC o l l e c t i o n b a s ep a i r 碱基对 C h l a m y d i at r a c h o m a t i s 沙眼农原体 e t h i d i u r nb r o m i d e 溴化乙锭 E p p e n d o r f 离心管 h o u r 小时 i n t e r n a lc o n t r o l 内参照 m i n u t e 分钟 M y c o p l a s m ag e n i t a l i u m 生殖支原体 M y c o p l a s m ah o m i n i s 人型支原体 m e nw h oh a v es e xw i t hm e n 男男性接触者 N o n - c h l a m y d i a ln o n g o n o c o c c a lu r e t h r i t i s 非衣原体非淋菌性尿道炎 N e i s s e r i ag o n o r r h o e a e 淋病奈瑟菌 N o n g o n o c o c c a lu r e t h r i t i s 非淋菌性尿道炎 套式P C R o p t i c a ld e n s i t y 光密度 r e l a t i v ec e n t r i f u g a lf o r c e 相对离心力 p o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n 聚合酶链式反应 a c i d - b a s es c a l e 酸碱度 p o l y m o r p h o n u c l e a rl e u k o c y t e 多形核白细胞 r e v o l u t i o n s p e rm i n u t e 转，分 U r e a p l a s m a p a r v u m 细小脲原体 U r e a p l a s m au r e a l y t i c u m 解脲臊原体 s e c o n d 秒 s e x u a l l yt r a r t s m i a e dd i s e a s e s 性传播疾病 中文摘要 全文摘要 目的：研究生殖支原体( M g ) 和解脲脲原体( u u ) 在男性不同人群中的感染或定 植状况，分别探讨两者与男性非淋菌性尿道炎( N G U ) 的相关性，以及u u 不同基因群 与N G U 间的相关性，为明确M g 在N G U 中的病原学地位和进一步研究U u 在N G U 中 的致病性打下基础，为性瘸防治策略的制定提供理论依据。 方法；单纯随机抽样选择四组人群，N G U 患者( G 1 ) 、S T D 门诊非N G U 就诊者( G 2 ) 、 男男性接触者( G 3 ) 和健康体检者( G 4 ) ，运用培养法和套式P C R 法检测U u ，套式P C R 法和产物D N A 测序检测M g ，运用S P S S l 2 0 版统计软件分析人口学、性行为学和i 临床 表现与u u 和M g 的相关性；然后运用P C R 与核酸杂交技术排除淋球菌与c t 感染，进 一步研究M g 在N G U 中的独立致病性；最后，分别用三对P C R 引物对u u 阳性标本进 行基因分群，研究U u 不同基因群与N G U 的相关性。 结果：I 四组人群M g 检出率分别为G l 组2 5 O 、G 2 组6 4 、G 3 组5 5 、G 4 组末检出。各组与G 4 组间有显著性差异，其余各组G 1 G 2 、G 1 G 3 、G 2 G 3 间的P 值 分别为：( O 0 0 0 、 0 0 0 0 和0 8 0 。L o g i s t i c 回归分析排除混杂因子的影响后，只有就诊 时尿道分泌物对M g 阳性的影响有显著性意义。将M gP C R 产物测序结果与G e n B a n k 中的国际标准株A T C CG 3 7 进行B L A S T 比对，发现两例标本在1 6 Sr D N A 序列第3 3 3 位发生了点突变，均为c T 另一例为第4 5 7 与4 5 8 位间插入了碱基G 。U uP C R 阳性 率在四组人群中分别为4 0 O 、4 4 ，7 、2 2 7 、4 6 9 ，G I 、G 2 、G 4 组间无显著性 差异，P 值分别为O 4 1 9 ( G 1 - G 2 ) 、O 3 2 5 ( G 1 G 4 ) 、0 8 6 8 ( G 2 G 4 ) 。G 3 组的u u 阳性 率明显低于其他三组，与G 1 、G 2 、G 4 组闻P 值分别为O 0 0 7 、O 0 0 1 、 o ，0 0 0 ，统计学 上有显著性差异。L o g i s t i c 回归分析未发现U u 定植与N G U 的相关性。2 M g 与N G U 强相关，G I 组中M g 阳性2 5 例( 2 5 0 ) 、G 2 组6 例( 6 3 8 ) p 0 ，0 0 0 ( O R = 4 8 9 ， 9 5 C I1 6 8 - 9 1 2 ) 。G 1 和G 2 组除首次性交年龄和C t 感染外，在人口学、性行为学、临 床表现上无差异，仅6 例( 6 ) 为C t 、M g 合并感染，M g 与N G U 独立相关，p = 0 0 0 2 ， O R - - - - - 5 5 3 1 ，9 5 C I1 s 鸵一1 6 2 5 6 。非衣原体非淋菌性尿道炎( N C N G U ) 中M g 的阳 2 中文摘要 性率达4 4 1 9 ( 1 9 4 3 ) 。3 应用三对引物将U u1 4 个血清型明确分成两个基因群，细 小脲原体( U p ) 和解脲脲原体( U u ) 。未做基因分群时U u 在G 1 、G 2 、G 4 组间无差 异，分群后，u p 在各组间的P 值分别为G 1 G 2O 3 8 0 、G 1 G 4O ，0 0 0 、G 2 一G 4O 0 0 4 ，U u 在G 1 和G 2 间无差异，但在G l - G 4 、G 2 一G 4 问差异显著，P 值分别为O 7 0 4 、O0 0 3 、00 0 9 。 排除c t 感染后三组入群u u 定檀率仍无差异，但u p 在三组间的P 值分别为O ，9 2 5 、0 0 4 、 O 0 0 5 ，U u 在三组间的p 值为O 2 2 6 、O4 0 6 、0 0 1 0 。G 3 组U p 阳性4 例( 36 3 ) 、U u 阳性1 6 例( 1 4 5 4 ) 、U u U p 均阳性1 例。 结论：U u 定植与尿道分泌物或尿道炎无相关性，U u 在男性泌尿道的定植并不能 认为是病原体感染。U u 基因分群提示U u 的定植与高危性行为有关，但与尿道炎仍无 相关性，U p 可能是尿道常规定植的菌群。无论过去有无尿道炎史，无论其性经历如何， M g 与尿道分泌物或尿道炎高度相关，排除C t 感染及其它混杂因素后，M g 与N G U 独 立相关，提示M g 是N G U 的病原菌。 英文摘要 E x e c u tiv eS u m m a r y O b j e c t i v e s T oi n v e s t i g a t et h ei n f e c t i o no rc o l o n i z a t i o no fM y c o p l a s m ag e n i t a l i u m a n d U r e a p l a s m au r e a l y t i c u mi nd i f f e r e n tm a l ep o p u l a t i o n s t od e m o n s t r a t et h ea s s o c i a t i o no fM g e n i t a l i u ma n dUu r e a l y t i c u mw i t hn o n g o n o c o c c a lu r e t h r i t i s ( N G U ) r e s p e c t i v e l y , t oa s s e s s t h ea s s o c i a t i o nb e t w e e nt h eu r e a p l a s m ab i o v a r s ( o rg e n o t y p e s ) 1a n d2a n du r e t h r i t i s ，a n d f i n a l l yt of a c i l i t a t ef u r t h e ra e t i o l o g i c a ls t u d y t op r o v i d et h ee v i d e n c ef o rS T Dc o n t r o ls t r a t e g y m a k i n g M e t h o d sI nt h ef i r s tp a r to ft h i s s t u d y , f o u rd i f f e r e n tm a l ep o p u l a t i o n s ，n a m e l y ：N G U p a t i e n t s ( G 1 ) ，n o n N G Us u b j e c t sa t t e n d i n gS T Dc l i n i c ( G 2 ) ，m e nw h oh a v es e xw i t hm e n p a r t i c i p a t i n g ah e a l t he d u c a t i o np r o g r a m ( G 3 ) a n dh e a l t h yv o l u n t e e r s ( G 4 ) w e r er e c r u i t e d r a n d o m i z e d l y N e s t e dP C R a n dc u l t u r ew e r eu s e dt Od e t e c tU u r e a l y t i c u mN e s t e dP C Ra n d P C Rp