资源预览内容
亲,该文档总共1页全部预览完了,如果喜欢就下载吧!
资源描述
热透镜光谱法无标记检测仅凝血酶 陈霞,缪雪艳,周晓东,胡继明叼 ( 武汉大学分析生物医学研究所,武汉4 3 0 0 7 2 ) 适配子是经体外筛选( S E L E X ) 的D N A 或R N A 单链寡核苷酸,具有类似于抗体对抗原的高 亲和性和高特异性,其靶标物可以是药物分子、无机小离子、氨基酸、蛋白质甚至细胞。相 对于抗体,适配子具有分子量小、结构简单、易合成修饰和可长期保存的优点,所以自9 0 年代出现以后,越来越受到研究者的青睐,已报道的研究手段有S P R ,Q C M ,C E ,R S ,荧 光光谱和电化学等。本文首次将高灵敏的光热分析法引入到适配子的研究中,如图1 所示, 纳米金外层负电荷与T B A ( 5 - G G T T G G T G T G G T T G G 3 ) 内侧碱基形成共轭体系,在高盐 环境下,对外显示1 1 3 A 外侧磷酸负骨架,静电排斥,纳米金不能够聚集。Q 凝血酶的加入, 使T B A 结构变为G 四链体,脱离纳米金,与a 凝血酶特异结合,纳米金聚集。我们检测a 凝血酶加入前后光热信号的变化从而实现对痕量q 凝血酶的识别和定量。 慧- 气”l , 、一l ,谭t 气急, Z j :0 = 睁扣 重 蓦 f a ,t _ _ - m ,喇 图l基于A u N P s 检测凝血酶的示意图 圈2 凝血酶浓度与光热信号工作曲线 F i g 1 ,c 峰m 啦d e 洲。no f t l l e 枷s - b a s e d s t r a t e g y Figf2 翟三二譬孟蓼盖r 晰0 f o r t l a r o m b l nu uVuuul口10u1 。o l 铲u 按实验方法制作工作曲线,a 一凝血酶在l O - 7 0p M 范围内与T 有良好的线性关系,回归方 程为T ( m V ) = 5 6 11 4 3 + 0 2 5 5 6 3 C ( p M ) ,相关系数R = 0 9 9 3 6 ,检出限低至0 5p M ,可以和荧 光光度法相媲美,且无需衍生。本文首次用光热法实现了对C t 凝血酶的高灵敏检测,借助于 光热在强散射背景下仍可检测的优势,可信度高,操作简单,并有望将它用于实际检测。 参考文献: 1 】J i n gW a n g ,G e n x iL i ,C h u n h a iF a n A d v M a t e r J ,2 0 0 7 ,1 9 :3 9 4 3 【2 C T u e r k ,L G o l d S c i e n c e 叨,19 9 0 ,2 4 9 :5 0 5 【3 】A D E l l i n g t o n ,J W S z o s t a k N a t u r e 阴,19 9 0 ,3 4 6 :818 【4 】H u iW e i ,E r k a n gW a n g ,S h a o j u nD o n g C h e m C o m m 【J ,2 0 0 7 ,3 7 3 5 基金项日:国家自然科学基金( N o 2 0 8 0 5 0 3 4 ) 通讯联系人:胡继明,男,教授,博士生导师,研究方向:激光光谱分析,生物传感器等 1 4 6
网站客服QQ:2055934822
金锄头文库版权所有
经营许可证:蜀ICP备13022795号 | 川公网安备 51140202000112号