电子显微学报J C h i nE l e c t r M i c r o s e S o e 2 3 ( 4 ) ：5 0 4 5 0 4 2 0 0 4 年 用共聚焦显微镜研究的花粉细胞固定方法 赵军锋，高英杰 ( 河北师范大学生命科学学院分子细胞生物学研究室，河北石家庄0 5 0 0 1 6 ) 激光共聚焦显微镜技术测定细胞生理指标的动 态变化过程中，为了保证测定结果的可靠，需要使细 胞处于相对稳定的环境中。这就要求首先要保证细 胞在载玻片上的位置是固定的，对于组织中的细胞 而言，基本不存在问题，但对于花粉这样的单细胞来 讲却很困难，主要是加药时，细胞会随着药液发生移 动。我们曾用蛋清、琼脂糖等将花粉黏附在载玻片 上，但效果不太理想。而加上盖玻片又容易造成细 胞变形甚至破裂。经过摸索我们采用了带有特氟龙 涂层的载玻片( 图1 ) ，其上涂有一层聚四氯乙烯，厚 度为5 0 , u r n ，未被涂的地方就形成深度为5 0 , u r n 的小 池，将花粉溶液加入小池中，我室测定的百合花粉粒 呈椭圆型，其短轴直径约为4 0 6 0 “m ，小池上加盖 玻片，可将大部分花粉夹在盖玻片与载玻片之间，达 到固定花粉的目的，使实验能够顺利进行。其次，盖 玻片可使花粉溶液不易挥发，不会因为水份的蒸发 对实验结果造成影响，可用于长时间观测。此种载 玻片适用于较大的植物细胞如百合花粉等，对于较 小的细胞可用相应厚度涂层的载玻片。 参考文献略 图1 带有特氟龙涂层的载玻片示意图。