平板划线法平板划线法 倒平板技术倒平板技术 通过灼烧灭菌，防止瓶 口的微生物污染培养基。 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固 后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒 置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发 ，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造 成污染。 获获获获得得纯净纯净纯净纯净 培养物的关培养物的关键键键键是是 防止外来杂菌的入侵！防止外来杂菌的入侵！ （二）纯化大肠杆菌 微生物微生物接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法等 平板划线法: 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的 操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面. 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而 来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前 都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需 要灼烧接种环吗？为什么？ 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后 再进行划线？ 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么 总是从上一次划线的末端开始划线？ 4.整个过程中有哪些无菌操作？ 平板划线的操作平板划线的操作 为了避免接种环上 可能存在的微生物污染 培养物 以免接种环温度太高， 杀死菌种。 一旦划破，会造成划线不均匀，难以 达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形 成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长， 会形成一个条状的菌落。 为了杀死上次划线结束后，接种环上残 留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌 种直接来源于上次划线的末端，从而通过划 线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐 渐减少，以便得到菌落。 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前 都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需 要灼烧接种环吗？为什么？ 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其 冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时， 为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线 条起始处要少，每次从上一次划线的末端开 始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而 逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来 的菌落。 4.整个过程中有哪些无菌操作？ 练一练 稀释涂布平板法