单克隆抗体 高 二 人教版 钱江晚报 张先生好心去献了 一次血 结果却接到通 知 他的血液不能用 街头头献血检检出乙肝阳性 假阳性 张张先生第二天请请 假去医院做了复检检 进进行了一堆检查检查 后 医生告诉诉他 各 项项指标标正常 没有得 乙肝 新闻链接新闻链接 1 一般情况下 医院是如何检测人体内是 否存在乙肝病毒的 2 抗体如何产生的 3 一种浆细胞能产生多种抗体吗 4 传统获得抗体的方法是什么 温故知新 不仅产量低 纯度低 而且抗体的特异性差 抗原动物体内 从动物的血清中 分离所需抗体 反复反复 注射注射 传统抗体的获得方法 B 1 B 2 B 3 B 4 多种抗体 单一抗体 不仅产量低 纯度低而且抗体的特异性差 抗体不纯抗体不纯 筛选单一的筛选单一的B B淋巴细胞淋巴细胞 不能在体外大量增殖 不能在体外大量增殖 抗原抗原动物体内动物体内 从动物血清中从动物血清中 获取抗体获取抗体 反复反复 刺激刺激 传统抗体获得方法的缺点 单克隆抗体单克隆抗体 怎样能得到既能无限增殖 又能产怎样能得到既能无限增殖 又能产 生特异性抗体的细胞 生特异性抗体的细胞 一个大胆的猜想一个大胆的猜想 德国 科勒 英国 米尔斯坦 单单单单克隆抗体克隆抗体 获得杂交瘤细胞 获得能产生所需 抗体的杂交瘤细 胞 动物细胞培养 1 如何得到B淋巴细胞 2 如何诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融 合 3 融合过程中会出现几种类型的细胞 4 上述过程得到的细胞哪种是我们 需要的 其特点是什么 怎样淘汰 我们不需要的细胞 5 淘汰后的细胞所产抗体是单一的吗 如何检测 6 如何获得大量 单克隆抗体 一 单克隆抗体的制备过程 提取单克隆抗体 补充资料 已知细胞合成DNA有D和S两条途 径 其中D途径能被氨基嘌呤阻断 人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途 径 但一般不分裂增殖 鼠骨髓瘤 细胞中尽管没有S途径 但能不断分 裂增殖 获得杂交瘤细胞 获得能产生所需 抗体的杂交瘤细 胞 动物细胞培养 1 如何得到B淋巴细胞 2 如何诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融 合 3 融合过程中会出现几种类型的细胞 4 上述过程得到的细胞哪种是我们 需要的 其特点是什么 怎样淘汰 我们不需要的细胞 5 淘汰后的细胞所产抗体是单一的吗 如何检测 6 如何获得大量 单克隆抗体 一 单克隆抗体的制备过程 提取单克隆抗体 多孔板 阳性孔 有限稀释法 1 取出阳性孔培养液将其稀释到每毫升10个细 胞 2 如果在多孔板中每孔加0 1毫升 使每孔内落 入一个细胞 3 根据检测的阳性结果再次进行克隆化 通过适当的 稀释达到分离 单个细胞进行 培养的目的 获得杂交瘤细胞 获得能产生所需 抗体的杂交瘤细 胞 动物细胞培养 1 如何得到B淋巴细胞 2 如何诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融 合 3 融合过程中会出现几种类型的细胞 4 上述过程得到的细胞哪种是我们 需要的 其特点是什么 怎样淘汰 我们不需要的细胞 5 淘汰后的细胞所产抗体是单一的吗 如何检测 6 如何获得大量 单克隆抗体 一 单克隆抗体的制备过程 提取单克隆抗体 3 整个制备过程需要几次筛选 细胞融合技术和动物细胞培养技术 2 为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合 两者融合产生的杂交瘤细胞兼有两个亲本细胞的特性 既能大量繁殖 又能产生专一的抗体 4 单克隆抗体有什么优点 特异性强 灵敏度高 并可以大量制备 1 本过程利用了细胞工程的哪些技术 第一次 得到杂交瘤细胞 第二次 在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体 的杂交瘤细胞 二 单克隆抗体的应用 1 作为诊断试剂 抗人绒毛膜促性腺 激素单克隆抗体 2 用于治疗疾病和运载药物 癌症小病人把愿望画在镜子上 二 单克隆抗体的应用 作 业 1 基础作业 完成学习指导本节练习 2 兴趣作业 思考用小鼠制备的单克隆抗 体能治疗人类的疾病吗