(5)比重和渗透浓度：比重：全血为1.0511.060； RBC约为1.090；血浆为1.0251.030。血浆渗量为290310mOsm/kgH2o(6)PH及凝固性:PH7.357.453、血液的功能：运输、协调、维护内环境、防御。,血涂片制备,新玻片的处理旧玻片的清洁血涂片制备的方法：影响手工法血膜厚度的因素：手工法血膜的评价标准：,血细胞染色,常用染色方法：瑞氏染色的原理瑞氏染液的组成：pH对细胞染色的影响：瑞氏染色的质量评价：常采用瑞氏染液的吸光度比值(RA)作为质量评价指标。且RA（A650nm/A525nm）=1.30.1为适宜成熟指数。,三、血细胞显微镜计数法,（一）原理 用一定的稀释液将标本作定量稀释，混匀充入计数池中，在显微镜下计数一定容积中的血细胞数，经换算求得每升血液中的血细胞总数。可用于血液中细胞计数；尿液中细胞、管型计数；精液中精子计数等。,器材,普通光学显微镜微量吸管改良Neubauer计数板盖玻片,1855 年 发明计数红细胞的计数板 血细胞计数板法是最可靠和最经典计数技术改良Neubauer计数板,计数池,质量控制,(一)、技术误差1、采血部位不当2、血液凝固3、稀释倍数不准4、充液不当5、识别错误6、器材不符合要求,(二)、固有误差（inherent errors)泊森分布： SD=m CV=注：SD为标准差 、m为计数的平均数 、CV为变异系数。由此，计数范围大，计数细胞多，计数误差就小。,1/2,1,m,1/2,第二节 血液常用检查(Rt),白细胞计数白细胞分类计数白细胞形态检查红细胞计数血红蛋白测定红细胞形态检查血小板计数血小板形态检查,白细胞(white blood cell,WBC)计数,白细胞呈球形，有核，直径7-25m，在机体内具有防御的功能。正常外周血中常见的白细胞有中性粒细胞(N)、嗜酸性粒细胞(E)、嗜碱性粒细胞(B)、淋巴细胞(L)、单核细胞(M)五种。白细胞的发育：骨髓内的多能干细胞 原始粒细胞 成熟粒细胞。,（一）测定方法及评价1、显微镜计数法 2、血细胞分析仪计数法,（二）、参考值白细胞计数的参考值： 成人：（4-10）109/L 儿童：（5-12）109/L 6个月-2岁小儿：（11-12）109/L 新生儿：（15-20）109/L,见后,若含有有核红细胞，需校正白细胞数。 校正公式： 白细胞数=式中：X校正前白细胞数 Y分类计数时计数100个白细胞 见到的有核红细胞数例：校正前白细胞数为12.5109/L，分类计数100个白细胞 见到有核红细胞25个。则：白细胞数/L=12.5 109/L ,常规考核标准（RCS）RCS=WBC4109/L,RCS30%；WBC(4.114.9)109/L,RCS20%；WBC15109/L,RCS15%；超出上述标准为不合格,白细胞分类计数法（differential count,DC),(一)测定方法及评价制备血涂片血涂片染色白细胞分类计数计算百分率,注意事项1、减少计数误差（计数细胞数、计数方法）。 2、注意有无有核红细胞、幼稚白细胞、寄生虫等。,白细胞分类计数法（differential count,DC),白细胞分类计数的参考值,报告方式,白细胞分类计数结果以各种白细胞所占的比值或百分率表示。发现幼稚或异常白细胞，应分类报告。发现有核红细胞，应报告分类计数100个白细胞见到的有核红细胞数。发现寄生虫应报告。发现细胞形态有异常应报告。,临床意义,白细胞总数高于参考值上限为白细胞增多，低于下限为白细胞减少。中性粒细胞在白细胞中所占百分比最多。其变化直接影响到白细胞总数的变化。一般情况下，中性粒细胞增多，白细胞增多，中性粒细胞减少，白细胞总数减少。即中性粒细胞增减与白细胞总数增减的意义基本一致。但也有不一致的情况。,粒细胞的来源,多能造血干细胞,粒-单系祖细胞,粒细胞系,单核细胞系,临床意义,粒细胞的动力学,中性粒细胞根据功能和形态分为三个阶段：干细胞池、生长成熟池、功能池。干细胞池 包括多能干细胞至粒单系祖细胞。,粒细胞的动力学,2.成长成熟池 包括原粒细胞至成熟分叶核粒细胞。其中原粒至中幼粒阶段具有分裂能力，称分裂池；晚幼粒至分叶核阶段不再分裂称成熟池；未释放至外周血中的成熟粒细胞称贮备池。,粒细胞的动力学,3.从骨髓中释放到外周血的成熟粒细胞称为功能池。其中一部分细胞随血液循环称循环池，另一部分附着于小静脉和微血管壁上称边缘池。二者交换形成动态平衡。,多能干细胞,定向干细胞,原粒细胞,早幼粒细胞,中幼粒细胞,晚幼粒细胞,杆状核细胞,分叶核细胞,增殖池(分裂池),干细胞池,贮备池,循环池,边缘池,组织细胞炎症,外周组织象,46天,57天,612h,2-3天,粒细胞动力学示意图,说明：根据细胞分布和细胞动力学特点，粒细胞可分为干细胞池、分裂池、成熟、贮存池、循环池和边缘池五个部分。 平常说的外周血是循环池中的血。,1、生理性变化年龄日间变化运动、疼痛和情绪影响妊娠与分娩,生理变化,年龄因素 形成中性粒细胞和淋巴细胞变化曲线的二次交叉。,6-9d,4-5y,生理变化,日间变化 活动进食后较高 下午高于上午,运动、疼痛和情绪影响 当剧烈运动、剧痛和情绪激动时，可引起白细胞显著增加。,妊娠与分娩 妊娠期白细胞常轻度增加。产后2周左右恢复正常、此后如再次升高，就有产后感染的可能。,2、病理变化,（1）中性粒细胞与白细胞总数的增多与减少 A、中性粒细胞增多 见于：急性感染、急性中毒、急性大出血、严重的组织损伤、白血病及恶性肿瘤。 B、中性粒细胞减少 见于：某些传染病、理化损伤、某些血液病、脾功能亢进 、自身免疫性疾病等。,（2）嗜酸性粒细胞增多或减少,A、增多 见于过敏性疾病、寄生虫病、某些皮肤病、某些传染病、某些肿瘤、某些血液病等。B、减少 见于长期使用肾上腺皮质激素、某些急性传染病的早期。,（3）淋巴细胞增多与减少,A、淋巴细胞增多 见于某些传染病、血液病、恶性肿瘤等。B、淋巴细胞减少 见于长期接触放射线、细胞免疫缺陷病等。,（4）嗜碱性粒细胞增多和减少,A、嗜碱性粒细胞增多 见于慢性粒细胞性白血病、嗜碱性粒细胞性白血病、过敏性疾病、骨髓纤维化及某些转移癌。B、嗜碱性粒细胞减少 一般无意义。,（5）单核细胞增多和减少,A、单核细胞增多 见于某些感染，如结核、伤寒、黑热病、亚急性感染性心内膜炎等；某些血液病。B、单核细胞减少 一般意义不大。,1. 中性粒细胞 胞体圆形，直径10-15 m，为红细胞的两倍。胞质丰富，粉红色，含较多细小均匀的紫红色中性颗粒。细胞核染色质粗糙不匀，排列紧密，为深紫红色。 根据核形状分类：中性杆状核粒细胞 中性分叶核粒细胞 标准：核径最窄处小于最宽处1/3为分叶核 核径最窄处大于最宽处1/3为杆状核,外周血正常血细胞形态,嗜酸性粒细胞 细胞圆形，直径13-15um，略大于中性粒细胞。胞浆内充满粗大、整齐、均匀、排列紧密、有立体感的桔红色嗜酸性颗粒，偶见少许淡蓝或无色胞浆。嗜酸性粒细胞容易破碎，颗粒可分散于细胞周围。,嗜碱性粒细胞 细胞圆形，直径10-12um，略小于中性粒细胞。胞浆少，常呈淡红或淡紫红色，含少量粗大、不均匀、排列不规则的紫黑色嗜碱性颗粒，常盖于核上，及细胞边缘。,嗜碱性粒细胞,嗜碱性粒细胞,单核细胞 细胞圆形或不规则形，为外周血中最大的细胞，直径15-25um，胞浆丰富，染淡蓝或灰蓝色，呈毛玻璃样半透明，含有大量细小、灰尘样嗜天青颗粒，可见空泡。细胞核大，呈不规则圆形、肾形、马蹄形或不规则分叶，有时折叠扭曲。染色质细致、疏松如网状。,淋巴细胞 大淋巴细胞：体积较大，直径10-15um，胞浆丰富，呈透明蓝色，常有少量粗大、大小不均的紫红色嗜天青颗粒。细胞核染色质疏松。 小淋巴细胞：细胞圆形，直径6-10um，胞浆很少，有的仅在核的一侧出现一线蓝色胞浆，甚至完全没有。细胞核圆形，偶见凹陷，染色质粗糙致密，可有块状。,（二）、外周血细胞常见的病理形态,中性粒细胞的毒性变化1、大小不等2、中毒颗粒3、空泡变性4、杜勒小体（Dhle body）5、退行性变,1、大小不等,2、中毒颗粒,3、空泡变性,4、杜勒小体（Dhle body）,5、退行性变,中性粒细胞核象变化,1、中性粒细胞核象左移 外周血中中性杆状核粒细胞增多和杆状核阶段以前的幼稚阶段细胞出现称为核象左移。 （1）轻度核象左移 6%，只有杆状核粒细胞。 （2）中度核象左移 10%，有少量的晚、中幼粒细胞。 （3）重度核象左移 25%，可见早幼粒、原始粒，伴有中毒颗粒等质变化。,2、中性粒细胞核象右移,外周血中中性分叶核粒细胞增多伴多分叶，同时分5叶核以上的细胞3%时称为核象右移。 常见于造血功能衰退或造血物质缺乏、DNA减少的表现。如：恶性贫血、应用抗代谢药物等。在疾病的进行期突然出现核象右移的变化，则表示预后不良。,淋巴细胞的病理形态,1、异形淋巴细胞2、具有卫星核的淋巴细胞,卫星核的淋巴细胞,其他异常白细胞,巨多核中性粒细胞棒状小体Pelger-Hut畸形Chediak-Higashi畸形Alder-Reilly畸形May-Hegglin畸形,巨多核中性粒细胞,巨杆状核粒细胞与过分叶粒细胞,棒状小体,Pelger-Hut畸形,Chediak-Higashi畸形,Alder-Reilly畸形,May-Hegglin畸形,骨髓造血干细胞-红系祖细胞-原红细胞-早幼-中幼-晚幼-网织红细胞-成熟红细胞,造血微环境,Epo,红细胞计数（red blood cell count,RBC）,红细胞在正常情况下几乎占血容量的1/2，平均寿命是120天，每天约有8%的衰老和退化变性的红细胞经脾破坏，血红蛋白降解，可参与铁、胆色素、蛋白质代谢和血红蛋白的重新合成。 红细胞外形：双凹圆盘形，平均直径7.2m，厚约2m ，无核。 主要成分（除水外）：血红蛋白占34%-能结合多种气体，O2和CO2 ，并协同维持酸碱平衡。,RBC计数方法与参考值,测定方法及评价1、显微镜计数法2、血细胞分析仪计数法参考值 成年男性 （4.0-5.5）1012/L成年女性 （3.5-5.0）1012/L新生儿 （6.0-7.0）1012/L,RBC计数的质量控制,1、计数误差 同白细胞计数。2、白细胞的影响若白细胞过高者需要扣除：(1)直接扣除(2)在高倍镜下识别计数,五、血红蛋白(hemoglobin,Hb)测定,五、血红蛋白(hemoglobin,Hb)测定,血红蛋白结构： 由珠蛋白和亚铁血红素结 合组成。空间结构：每个血红蛋白有4条珠蛋白肽链 每条肽链包裹1个亚铁血红素， 形成具有四级空间结构的四聚体。,分类：（每个珠蛋白分子含两条 链和两条非 链） 正常人：HbA （22）占90%，成人主要血红蛋白。HbA2（22）占2%-3%，成人次要血红蛋白。HbF （22）占1%以下，胎儿主要血红蛋白。,