薄层色谱总结范文 -薄层色谱总结薄层色谱方法总结1.方法原理 (1)流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。 (2)样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极-（诱导）-偶极相互作用，氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。 2.溶剂使用的溶剂必须是“分析纯”或“色谱纯”，溶剂组成采用体积量比（如正丁醇-冰乙酸-水水=411，V/V/V），或者绝对量（如18ml甲甲苯苯+2ml甲醇）。 其总量应足以使TLC/HPTLC板的浸入深度约为5mm。 展开剂要求新鲜配制，不要多次反复使用,如需分层，则按要求放置分层后取需要的一相（上层或下层），备用。 一、溶剂选择规则 1、。 考虑分离成分的极性、溶解度、吸附度。 2、先加入极性较小的溶剂，若不容再加入少量极性大的溶剂 3、，一般根据相似相溶原则，需要注意，极性相差大的不混溶。 4、混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂。 5、展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。 6、一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例（或者加入第三种溶剂）,达到最佳效果；如果没有分开的迹象（斑点较“拖”），最好是换溶剂。 二、展开剂的选择条件对的所需成分有良好的溶解性；可使成分间分开；待测组分的Rf在0.20.8之间，定量测定在0.30.5之间；不与待测组分或吸附剂发生化学反应；沸点适中，黏度较小；展开后组分斑点圆且集中；混合溶剂最好用新鲜配制。 三、溶剂极性参数表环已烷:-0. 2、石油醚（类，3060）、石油醚（类，6090）、正已烷:0. 0、甲苯:2. 4、二甲苯:2. 5、苯:2. 7、二氯甲烷:3. 1、异丙醇:3. 9、正丁醇:3. 9、四氢呋喃:4. 0、氯仿:4. 1、乙醇:4. 3、乙酸乙酯:4. 4、甲醇:5. 1、丙酮:5. 1、乙腈:5. 8、乙酸:6. 0、水:10. 21、一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离； 2、中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离； 3、强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。 四、展开剂的选择物质分子化学结构中，通常由较极性部分和非极性部分两部分。 例如下面以苯丙烷为极性小部分，随着极性基团部分的增加，总体的极性就增加，展开剂极性也增加了。 以下分开讨论不同化合物极性情况及其对应由于存在糖的多羟基结构，苷元的结构影响变小。 展开剂中使用极性大的有机溶剂（氯仿、醋酸乙酯、甲醇、正丁醇）和水。 乙酸和甲酸的使用，一方面增大展开剂极性，另外也可以抑制硅胶羟基的作用，减少拖尾。 由于混溶性和硅胶耐酸能力的限制，水和酸的使用是有限度的。 3、类极性大的小分子有机酸没食子酸氯仿醋酸乙酯甲酸(5:4:1)、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸、异绿原酸。 例如下面以苯丙烷为极性小部分，随着极性基团部分的增加，总体的极性就增加，展开剂极性也增加了。 依次为肉桂酸、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸。 相应展开剂分别为正己烷乙醚冰醋酸(5:5:0.1)、苯冰醋酸甲醇(30:1:3)、氯仿甲醇甲酸（9:1:0.5）、石油醚乙酸乙酯甲酸（3:6:1）、醋酸丁酯甲酸水(7:2.5:2.5)。 结论这类物质多数是苯乙烯母核的，这个结构的极性本身比较大，另外有酚羟基和羧酸基团，个别有多羟基配基。 皂苷的展开剂差不多，极性大。 注意甲酸通常指的是浓度85%左右的，含有水。 4、类含氮有机物盐酸小檗碱苯醋酸乙酯甲醇异丙醇浓氨试液(126330.6)(氨蒸气饱和)或正丁醇冰醋酸-水(7:1:2)、麻黄碱氯仿甲醇浓氨试液(20:5:0.5)或正丁醇冰醋酸水(8:2:1)甘草酸铵醋酸乙酯甲酸冰醋酸水(15:1:1:2)。 结论分析由于NH2硅醇基的作用很强，在强极性展开剂加有机酸、有机碱扫尾。 对于极性化合物，使用正丁醇对斑点扩散影响较小，因为化合物和硅胶的作用强。 当被分离物质为弱极性物质，一般选用弱极性溶剂为洗脱剂；被分离物质为强极性成分，则须选用极性溶剂为洗脱剂。 如果对某一极性物质用吸附性较弱的吸附剂（如以硅藻土或滑石。 粉代替硅胶），则洗脱剂的极性亦须相应降低。 3.TLC的通用显色方法理想的显色希望灵敏度高，斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好，斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比，在样品组成并不完全已知的情况下，通用显色方法显得尤为重要，通用显色方法主要有 1、紫外照射法方便、不破坏样品； 2、碘蒸气法通用性强，与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用； 3、荧光试剂制造荧光背景，使原来紫外下无荧光物质被鉴别，有荧光物质更明显； 4、硫酸溶剂对绝大多数有机物有效，但有破坏性。 4.薄层层析和纸色谱操作注意事项 1、点样点样器点样于薄层板上,一般为圆点，点样基线距底边1.01.5cm，样点直径一般不大于2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。 若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果。 点样时必须注意勿损伤薄层表面 2、展开将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为为宜，密封，待展开至规定距离（一般为815cm），取出薄层板，晾干，待检测。 注展开缸如需预先用展开剂预平衡，可在缸中加入适量的展开剂，密闭，一般保持1530分钟。 3、显色与检视供试品含有可见光下有颜色的成分可直接在日光下检视，也可用喷雾法或浸渍法以适宜的显色剂显色，或加热显色，在日光下检视。 有荧光的物质或遇某些试剂可激发荧光的物质可在356nm紫外光灯下观察荧光色谱。 对于可见光下无色，但在紫外光下有吸收的成分可用带有荧光剂的硅胶板（如GF254板），在254nm紫外光灯下观察荧光板面上的荧光猝灭物质形成的色谱。 把我的祖传秘方告诉你吧PE(60-90)EtAc/PE=1:2EtAc/PE/AcOH=15:5:1EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:1:1:18年来我用这四种体系,没有出现过什么问题.我一直在用的是乙酸乙酯环已烷，不断调节比例，直到有满意的Rf值，有拖尾时可能要加酸或碱，我一般乙酸和三乙胺。 我用了好几年了，都还好。 不妨一试！铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。 匀浆配比一般是硅胶G:水=123，硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。 研磨匀浆的时间，根据经验来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断，越稠越难下滴。 匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。 涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那么明显。 通常，板的质量对薄层鉴别的影响不是很大，影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。 点样尽量用小的点样管。 如果有足够的耐性，最好只用1微升的点样管。 这样，点的斑点较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明。 样品溶液的含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样斑点扩散大。 样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。 点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放入干燥器里晾干。 展开剂配制选择合适的量器把各组成溶剂移入分液漏斗，强烈振摇使混合液充分混匀，放置，如果分层，取用体积大的一层作为展开剂。 绝对不应该把各组成溶液倒入展开缸，振摇展开缸来配制展开剂。 混合不均匀和没有分液的展开剂，会造成层析的完全失败。 各组成溶剂的比例准确度对不同的分析任务有不同的要求，尽量达到实验室仪器的最高精确度，比如取1ml的溶剂，应使用1ml的单标移液管，移液管应符合计量认证要求，尽管多数时候这不是必须的。 展开系统的饱和一般使用的是双槽的展开缸，一槽用来放展开剂，另一槽可加入氨水或硫酸。 把待展开的板放入两槽间的平台，斜架着，盖上展开缸的盖子。 让展开剂的蒸气充满展开缸，并使薄层板吸附蒸气达到饱和，防止边沿效应，饱和时间在半个小时左右。 展开时难免要打开盖子把薄层板放入展开剂中，不过对薄层板与蒸气的吸附平衡影响不大，当然动作应该尽量轻、快。 温湿度的控制温湿度对薄层影响都很大。 不冻结的前提下，通常温度越低分离越好，较难的分离需在低温下分离，例如人参皂苷。 湿度的影响，估计主要是影响薄层板的吸附能力，导致选择性（容量因子）的变化，湿度应根据实际情况确定。 温度控制使用空调器或冰柜，湿度控制是通过在另一展开槽放置相应浓度的硫酸。 显色喷显色剂显色最重要是有好的雾化器。 solvent polarityViscosity(cp20)Boiling point()UV cutoff(nm)i-pentane(戊烷)0.00-30-n-pentane0.000.2336210Petroleum ether(石油醚)0.010.3030-60210Hexane(己烷)0.060.3369210Cyclohexane(环环己烷)0.101.0081210Isooctane(异辛烷烷)0.100.5399210Trifluoroacetic acid(三氟乙酸)0.10-72-Trimethylpentane(三甲基戊烷)0.100.4799215Cyclopentane(环戊烷)0.200.4749210n-heptane(庚庚烷烷)0.200.4198200Butyl chloride(丁基氯氯;丁酰氯)1.000.4678220Trichloroethylene(三氯乙烯;乙炔化三氯)1.000.5787273Carbon tetrachloride(四氯化碳)1.600.9777265Trichlorotrifluoroethane(三氯三氟代乙烷)1.900.7148231i-propyl ether(丙基醚;丙醚)2.400.3768220Toluene(甲苯)2.400.59111285p-xylene(对二甲苯)2.500.65138290Chlorobenzene(氯苯)2.700.80132-o-dichlorobenzene(领二氯苯)2.701.33180295Ethyl ether(二二乙醚;醚)2.900.2335220Benzene(苯)3.000.6580280Isobutyl alcohol