实验一 半抗原免疫原的制备,实验目的:1 了解半抗原免疫原的合成方法及基本原理；2 将半抗原吲哚乙酸用混合酸酐法与载体蛋白牛血清白蛋白偶联。,吲哚乙酸,分子量: 175.18,半抗原-载体连接方法3,氯甲酸异丁脂法,半抗原-COOH,载体蛋白-NH2,Cl-COO-CH2CH(CH3)2,半抗原-COO-COO-CH2CH(CH3)2,半抗原-CO-NH-载体蛋白,实验原理：,HO-CH2CH(CH3)2,试剂和仪器：试剂：吲哚乙酸(IAA)，牛血清白蛋白(BSA)，三正丁胺，N-N二甲基甲酰胺(DMF)，氯甲酸异丁酯，NaOH；仪器：反应器，磁力搅拌器，微量加样器，滴管等。,实验步骤：52.3mgIAA 2mlN-N二甲基甲酰胺(DMF) 75l三正丁胺 40l氯甲酸异丁酯 磁力搅拌分钟 形成IAA混合酸酐210mgBSA 11ml蒸馏水11mlDMF 420l1mol/lNaOH 搅拌,实验步骤：将IAA混合酸酐逐滴加入到BSA溶液中继续搅拌1h200l1mol/lNaOH搅拌5h反应物装入透析袋 对10%DMF透析d 对蒸馏水透析4d取出反应物分装-20 保存,不断搅拌,思考题：小分子半抗原为什么要与载体蛋白先偶联才能作为免疫原？载体蛋白的选择原则。半抗原与载体偶联时，因其所带基团的不同需不同连接方法，试加以简述。,