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专题三基因工程与克隆技术(时间:30分钟)考点一基因工程1(2014南通二模)(多选)下列关于生物技术安全性和伦理问题的叙述,正确的是()。A转基因植物合成的某些蛋白质,可能成为某些人群的过敏原B克隆人可能冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念C如转基因植物的外源基因来源于自然界,则不存在安全性问题D运用重组基因技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器解析转基因植物合成新蛋白质具有异物性,有别于原先存在的蛋白质,对一些过敏体质的人可能会成为新的过敏原,A正确;克隆人严重违反人类伦理道德,包括婚姻、家庭和两性关系等传统方面,B正确;即使转基因植物的外源基因来源于自然界,由于改变了出现的方式、时间、地点等,可能会对生物多样性、生态系统的稳定性等造成影响,C错误;运用重组基因技术对致病菌或病毒进行改造后,增强了这些生物的生存力和侵染力,可变成威力巨大的生物武器,D正确。答案ABD2(2014苏锡常镇二模)下图为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoR(0.7 Kb)、 Pvu(0.8 Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离,1 kb1 000个碱基对长度。请据图回答问题:(1)质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是_、_。(2)将图中的目的基因与质粒B进行重组,需要用到_酶。如果是两两重组,可能有_种长度的重组结果。(3)基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤。现运用酶切质粒,完全酶切后进行电泳观察,若出现长度为1.1 kb和_kb,或者_kb和_kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoR I的识别位点之间的碱基对忽略不计)。 解析(1)质粒A缺少标记基因,质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时会破坏复制原点。(2)将目的基因和质粒B进行重组,首先要用限制酶进行切割,再用DNA连接酶连接。由于切割后的质粒与目的基因有相同的黏性末端,两两重组会出现质粒与质粒、目的基因与目的基因、质粒与目的基因3种连接片段。(3)目的基因长4.0 kb,质粒B长2.7 kb,目的基因用EcoR 切割会出现两种长度,1.0 kb和3.0 kb,另外在质粒上EcoR与Pvu的距离为0.1 kb,因此如果用EcoR I切割会出现两种结果,一种是1.0 kb0.1 kb的片段,另一种是3.0 kb0.1 kb的片段,再根据总长度来计算出剩余片段长度。答案1)缺少标记基因复制原点被限制酶切割(2)限制酶(Pvu)和DNA连接3(3)5.63.13.63(2014山东潍坊一模)下图表示转基因烟草的培育过程。请据图回答:(1)图示过程将外源基因导入受体细胞的方法是_,若将外源基因导入动物细胞,目前采用最多、最有效的是_技术。(2)为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因,携带外源基因的质粒上应有_,还应有_,以利于外源基因的表达。(3)该过程中用到的植物细胞工程技术是_,这项技术应在_条件下进行,依据的生物学原理是_。(4)外源基因的检测首先要采用DNA分子杂交技术检测_,其次采用分子杂交技术检测_,最后通过抗原抗体杂交检测_。答案(1)农杆菌转化法显微注射(2)标记基因启动子和终止子(3)植物组织培养无菌细胞的全能性(4)转基因生物的DNA上是否插入了外源基因外源基因是否转录出了mRNA外源基因是否翻译成蛋白质考点二植物细胞工程4(2014南通三模)下列关于植物组织培养及其应用的叙述,正确的是()。A离体的植物组织、器官必须经过灭菌才能接种到组织培养基中B生长素、细胞分裂素的协同调节作用在组织培养中非常重要C以植物芽尖为材料通过组织培养可以获得植物新品种D以人工膜包裹植物愈伤组织和营养物质可制得人工种子解析离体的植物组织、器官必须经过消毒后才能接种到组织培养基中,灭菌会影响组织细胞,A错误;生长素、细胞分裂素的比例不同,会导致离体组织向不同方向分化,故两者协同作用非常重要,B正确;以植物芽尖为材料通过组织培养可以获得无病毒植株,遗传物质和原来相同,不属于新品种,C错误;以人工膜包裹植物胚状体或胚芽和营养物质可制得人工种子,D错误。答案B5(2014河南豫东、豫北十所名校联考)科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄马铃薯杂种植株,为了便于杂种细胞的筛选和鉴定,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质,其培育过程如图所示:(1)植物体细胞杂交依据的生物学原理有_。(2)过程常用的酶是_,细胞融合完成的标志是_。(3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂_诱导融合,在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察,根据细胞膜表面的荧光的不同可观察到_种不同的原生质体,当观察到_时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。(4)过程和过程依次为_,过程中的培养基常添加的植物激素是_。(5)若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞中含n条染色体,则“番茄马铃薯”细胞在有丝分裂后期含_条染色体。若杂种细胞培育成的“番茄马铃薯”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于_植株。答案(1)细胞膜的流动性、植物细胞的全能性(2)纤维素酶和果胶酶形成了新的细胞壁(3)聚乙二醇(或PEG)3融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光(4)脱分化和再分化生长素和细胞分裂素(5)2(mn)单倍体考点三动物细胞工程6(2014南京三模)(多选)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()。A动物细胞培养所需的营养物质与植物细胞培养相同B传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞C癌细胞在培养瓶中培养不会出现接触抑制现象D动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染解析动物细胞培养所需的营养物质与植物细胞培养不同,动物细胞培养中需加入动物血清等,植物细胞培养中需加入植物激素,A错误;传代培养时需用胰蛋白酶将细胞分散,B正确;癌细胞无接触抑制现象,可无限增殖,C正确;动物细胞培养需加入抗生素以免杂菌污染,D正确。答案BCD7(2014南通二模)科学家用黑白两种美西螈(两栖动物)做实验,将黑色美西螈胚胎细胞的细胞核移植到白色美西螈的去核卵细胞中,结果发育成的美西螈全部是黑色的。相关叙述错误的是()。A根据实验结果可初步推断动物细胞核控制着生物的遗传B选择胚胎细胞作为供核细胞的原因是其分化程度低,易恢复全能性C培养植入核的卵细胞时,需保证营养物质的供应并控制好环境条件D需对受体美西螈进行同期发情处理,保证移植来的胚胎能顺利存活解析细胞核是遗传和代谢的控制中心,A正确;供核细胞决定了重组细胞的分裂分化能力,胚胎细胞的特点符合条件,B正确;细胞培养的条件是成功的关键,C正确;美西螈是两栖动物,属于卵生动物,受精卵直接在体外完成胚胎发育,D错误。答案D8H7N9禽流感是一种新型禽流感,于2013年3月底在上海和安徽两地率先被发现。科研工作者欲根据图示流程生产预防和治疗H7N9禽流感的抗体,请据图回答有关问题:(1)给小鼠注射的抗原是_,将过程获得的B淋巴细胞直接和骨髓瘤细胞融合,将获得_细胞,这些细胞需在具有_作用的特定培养基上培养,促进融合的常用诱导剂是_。(2)克隆过程代表经选择性培养的杂交瘤细胞,需要进行_和_,才能够获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(3)图示将杂交瘤细胞在_条件下做了大规模培养,提取了大量的单克隆抗体,其最主要的优点是_。(4)理论上,注射了该抗体的人群不能长期对H7N9有防疫作用,试分析原因:_。(5)请说明单克隆抗体的主要作用:_。解析制备用于预防和治疗H7N9的单克隆抗体,需用减毒的H7N9作抗原,B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经诱导剂聚乙二醇或灭活的病毒等诱导融合后会得到多种杂交瘤细胞,在特定的选择培养基中通过筛选后才能获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞;克隆杂交瘤细胞过程中,还需多次将不同细胞分开克隆和专一抗体检验阳性,最后才能够在体外或体内进行大量的克隆化生产,因为H7N9的遗传物质是单链RNA,容易发生变异,所以一旦变异后体内的记忆细胞和抗体就不能对其发挥作用,故抗体不能长期发挥作用;单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量复制等优点。答案(1)减毒的H7N9多种杂交瘤筛选灭活的病毒(或聚乙二醇)(2)克隆化培养专一抗体检验阳性(3)体外特异性强,灵敏度高,并可大量制备(4)H7N9会不断发生变异或抗体在体内保留时间有限(答案合理即可)(5)作为诊断试剂;用于治疗疾病和运载药物(答案合理即可)
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