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单元过关检测(十)1(2017云南师大附中适应性月考)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)cDNA文库属于_基因文库,其构建方法是:用某种生物发育的某个时期的_反转录产生的cDNA片段,与_连接后储存在一个受体菌群中。(2)切割DNA分子的工具是_,它能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的_断开,形成黏性末端或平末端。(3)基因工程中所使用的DNA连接酶有两类。既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端的是_DNA连接酶。(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是_;如果受体细胞是大肠杆菌,需要用_处理细胞,使之成为感受态细胞,才能吸收DNA分子。解析:(1)基因文库包括基因组文库和部分基因文库如cDNA文库。cDNA文库构建的方法是:用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的cDNA片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中。(2)切割DNA分子的工具是限制酶,它作用的化学键是磷酸二酯键。限制酶切割DNA后形成黏性末端或平末端。(3)基因工程中所使用的DNA连接酶有Ecoli DNA连接酶和T4 DNA连接酶两类,前者只可“缝合”黏性末端,后者既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端。(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法;如果受体细胞是大肠杆菌,需要用Ca2处理细胞,使之成为感受态细胞,才能吸收DNA分子。答案:(1)部分mRNA载体(2)限制性核酸内切酶磷酸二酯键(3)T4(4)农杆菌转化法Ca22如图所示为培育两种新品种草莓的流程示意图,请回答下列相关问题:(1)获取人胰岛素基因的方法有_。将胰岛素基因导入草莓细胞之前,需构建基因表达载体,该过程所用到的酶有_。完整的重组质粒,除胰岛素基因外,还必须有启动子、_以及标记基因等特殊的片段。(2)图中过程人工诱导细胞融合的物理法有_。与诱导动物细胞融合的方法相比,过程不能使用的方法是_。(3)要从分子水平上检测目的基因(胰岛素基因)导入受体细胞后是否成功表达,可采用的方法是_。(4)通过过程获得的草莓果实细胞中,_(填“全部”或“部分”)含有胰岛素基因,理由是_。解析:(1)用人工合成法、PCR扩增和从基因文库中获取得到胰岛素基因。基因表达载体的构建需要限制酶和DNA连接酶,其组成除目的基因外,还必须有启动子、终止子以及标记基因等。(2)人工诱导植物细胞融合的物理法有离心、振动、电激等,与诱导动物细胞融合的方法相比,过程不能使用的方法是用灭活的病毒诱导。(3)要检测目的基因(胰岛素基因)导入受体细胞后,在草莓细胞中是否成功表达,从分子水平上可以采用的方法是抗原抗体杂交法。(4)如果只导入一个目的基因,则其配子中不一定有目的基因,因此只有一部分草莓果实细胞中含有胰岛素基因。答案:(1)人工合成法、从基因文库中获取和PCR扩增等限制酶和DNA连接酶终止子(2)离心、振动、电激等用灭活的病毒诱导(3)抗原抗体杂交法(4)部分若只导入一个目的基因,则其配子中不一定有目的基因3(高考新课标全国卷改编)阅读如下资料:资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。资料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的T4溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。资料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。回答下列问题:(1)资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用_法。构建基因表达载体常用的工具酶是_和_。在培育有些转基因植物时,常用农杆菌转化法,农杆菌的作用是_。(2)资料乙中的技术属于_工程的范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对_进行改造,或制造一种_的技术。在该实例中,引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的_序列发生了改变。(3)资料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到_种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内,使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中,兔甲称为_体,兔乙称为_体。解析:(1)小鼠细胞为动物细胞,将基因表达载体导入动物细胞常用的方法是显微注射法;构建基因表达载体常用的工具酶是限制性内切酶和DNA连接酶;将基因表达载体导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法,农杆菌的作用是作为载体,将目的基因导入受体细胞。(2)从资料乙中可以得出是对基因进行改造,结果是得到耐热性提高的蛋白质,因此属于蛋白质工程的范畴,该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新蛋白质的技术。对基因进行改造后,第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成二硫键,引起了空间结构的改变,所以最终是由于氨基酸序列的改变导致了空间结构的改变。(3)胚胎工程中胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。资料丙中甲兔提供受精卵,所以甲兔是供体;胚胎在乙兔子宫内发育,所以乙兔为受体。答案:(1)显微注射限制性内切酶DNA连接酶农杆菌可感染植物,将目的基因转移到受体细胞中(2)蛋白质现有的蛋白质新蛋白质氨基酸(3)同供受4我们日常吃的大米中铁含量极低,科研人员通过基因工程等技术,培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻,改良了稻米的营养品质。如图为培育转基因水稻过程示意图,请分析回答:(1)铁结合蛋白基因来自菜豆,且基因的脱氧核苷酸序列已知,可以用_法获得此目的基因或_扩增目的基因。(2)构建重组Ti质粒时,通常要用_分别切割_。将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用_处理农杆菌,使重组Ti质粒易于导入。(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻细胞经过_获得的愈伤组织共同培养时,通过培养基2的筛选培养,可以获得_;培养基3与培养基2的区别是_的浓度比例,所以在培养基3中经过_可获得完整植株。检测培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻_。解析:(1)获取目的基因的方法有三种:从基因文库中获取;利用PCR技术扩增;人工合成(化学合成)。如果基因的脱氧核苷酸序列已知,可以用化学合成法获得此目的基因,再用PCR技术进行扩增。(2)构建重组质粒的过程中,通常要用同一种限制酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段,使它们产生相同的黏性末端,然后再用DNA连接酶连接成重组质粒。将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用CaCl2溶液处理农杆菌成为感受态细胞,易于重组Ti质粒导入。(3)水稻细胞经过脱分化可获得愈伤组织。质粒上的标记基因为潮霉素抗性基因,因此通过培养基2的筛选培养,可以获得含有重组质粒的愈伤组织。培养基2长出愈伤组织,培养基3长出试管苗,这与培养基2、3中生长素和细胞分裂素的浓度比例不同有关,所以愈伤组织在培养基3中经过再分化可获得完整植株。题目基因工程的目的是提高大米的铁含量,故欲检测培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻(成熟)种子中铁含量。答案:(1)化学合成(或人工合成或从基因文库中获取)PCR(2)(同种)限制性核酸内切酶(或限制酶)含目的基因(或铁结合蛋白基因)的DNA片段和质粒CaCl2(或Ca2)(3)脱分化含有重组质粒(有潮霉素抗性)的愈伤组织生长素和细胞分裂素再分化(成熟)种子中铁含量5(2017郑州模拟)狂犬病病毒的核酸是RNA,G蛋白和N蛋白是狂犬病病毒的主要抗原,它们刺激人体后可诱导人体产生相应的抗体和细胞免疫反应。如图表示用生物工程制备抗狂犬病病毒单克隆抗体的过程。请回答下列问题:(1)制备该单克隆抗体的技术属于生物技术的_工程。图中细胞1是小鼠体内注入_后而获得的_细胞,细胞2为_细胞。细胞1具有产生_的功能,细胞2的突出特点是_。(2)若细胞1基因型为HH,细胞2基因型为SS,则细胞3的基因型应该是_。在两两融合后的众多细胞中,基因的组合类型还可能有_。(3)培养液的配方通常含有糖、氨基酸、无机盐、微量元素等,与植物细胞培养基有所不同的是,还含有_。细胞在培养瓶中贴壁生长,随着细胞的增多,需要定期用_使细胞从瓶壁上脱离下来,以便分装到更多的培养瓶中继续培养。(4)单克隆抗体与抗癌药物结合可制成“生物导弹”,可明显减少用药量,原因是_。答案:(1)细胞狂犬病病毒(抗原)B淋巴骨髓瘤特异性抗体能够无限增殖(2)HHSSHHHH、SSSS(3)动物血清、血浆胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)(4)单克隆抗体能够与癌细胞特异性结合6(高考福建卷改编)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:(1)步骤中,在核移植前应去除卵母细胞的_。(2)步骤中,重组胚胎培养到_期时, 可从其内细胞团分离出ES细胞。(3)步骤中,需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的_设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用Hind和Pst
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