糖化血红蛋白检测执行标准体会 执行卫生标准的目标 中华人民共和国卫生行业标准WS T461 2015 糖化血红蛋白检测 MeasurementofHemoglobinA1c 由中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会于2015年06月23日发布 自2015年12月31日起实施 提高我国糖化血红蛋白临床实验室测定结果质量 适应糖化血红蛋白临床应用发展的需要 更有效地运用糖化血红蛋白 充分发挥其作用 WS T461 2015主要从4个质量环节制定了系统的规范原则 以保证测定结果质量 执行卫生标准的过程 糖化血红蛋白的检测系统 依IFCC参考方法校正 通过NGSP认证 可溯源到美国糖尿病控制及并发症临床试验 适用于不同测试量的医院临床试验室 分析原理我室的糖化血红蛋白仪是台式仪器 应用离子交换高效液相色谱法 HPLC 对人全血糖化血红蛋白A1C的自动化和结果进行准确的测定 标本可被自动稀释后注入分析柱将预先编程设置的由低到高离子浓度的缓冲液注入系统 在这一过程中 血红蛋白经和柱中物质离子反应后达到分离 执行卫生标准的过程 处理好的标本自动被注入分析通路 分离的血红蛋白随后在流经光感测量计时 测量其在415nm的光吸收情况 此仪器将每次分析过程中收集到的数据还原 此间要经过两个水平的计算 然后得出分析结果和分析图谱 A1C的峰被截断 面积计算使用了指数模式的高斯对数 EMG 这样计算排除了可变部分的血红蛋白A1C和氨基甲酰血红蛋白等的干扰成分 样本采集样本不受饮食和采集时间的影响采集静脉血采用含有乙二胺四乙酸 EDTA 抗凝剂的采血管以下是我实验室用的采血管 执行卫生标准的过程 执行卫生标准的过程 标本处理与储存一般情况下 全血标本在4 储存 可以稳定1周 我室周末和节假日的标本在冷库储存 任何不当处理 都会造成结果影响 如置于高温环境 全血标本小凝集等 均可引入大量未知干扰 干扰因素变异血红蛋白HbS HbC HbD HbE等衍生血红蛋白 药物 妊娠醛亚胺的干扰 黄疸 高脂血症以下图片是P3 不稳定的A1C和氨甲酰血红蛋白 高HbS峰的样本图 执行卫生标准的过程 执行卫生标准的过程 执行卫生标准的过程 执行卫生标准的过程 干扰物质黄疸 即胆红素浓度达到20mg dl脂血 即甘油三酯的浓度达到5680mg dl胎儿血红蛋白的浓度达到10 不稳定的A1C的浓度达到4 氨甲酰血红蛋白浓度达到3 5 以上对检测结果均没有干扰 执行卫生标准的过程 分析系统性能指标报告结果以 HbA1c 形式室内质控CV 2 室内质控CV 3 5 校准物使用冻干校准物 复溶或融化后应平衡至室温并充分混匀后再使用 不可反复冻融 质控物应有良好的长期稳定性 至少两个不同水平 可使用冻干或冰冻全血质控物 精密度实验方法分别采用不少于两个水平的质控物或样品 高 低值 每天测定两次 两次时间间隔不少于两小时 每次重复测两个结果 测定20个工作日 以20个工作日的80个结果计算平均值 标准差及变异系数 执行卫生标准的过程 正确度与可接受参考值的差值在 0 5 HbA1c范围内 以控制在 0 3 HbA1c范围内为宜 我室已参加卫生部室间质评工作 校准物和质控物校准物在所选用的仪器 试剂条件下使样品测定结果能溯源至IFCC参考方法 可使用冻干或冰冻校准物 校准物复溶或融化后应平衡至室温并充分混匀后再使用 不可反复冻融 质控物应有良好的长期稳定性 至少两个不同水平 高 低值 选用冻干或冰冻全血质控物 质控物复溶或融化后应平衡至室温并充分混匀后再进行测定 不可反复冻融 冻干粉质控物在更换试剂或色谱柱时可能会有基质效应 程度取决于所用方法 采用冻存管分装 储存于 70 或更低温度 可以稳定1年以上 执行卫生标准的过程 测定参考区间设置为4 6 低于参考区间或高于15 的样本应进行复查 并与临床医生沟通对测定结果与临床表现不符的样品应进一步检测安全措施血液样品及来源于血液的校准物 质控物有可能含有致病微生物 应避免入口或与皮肤接触 在使用后应按国家规定的具有危害性的生物品处理 执行卫生标准的过程 测定程序实验室应制定标准操作程序 至少包括以下内容 项目名称 方法学原理 样本 采血管 抗凝剂 储存 校准程序 校准日期间隔 校准方 校准方法 室内质量控制程序 样品的测定程序 干扰因素 参考区间 范围 试剂 色谱柱 可测定样品数量 适用于使用色谱柱的方法 维护程序 所用试剂 耗材应按规定存放 在有效期内使用 所用色谱柱达到检测数量限应及时更换 适用时 所用仪器应定期维护 保养 执行卫生标准的过程 本院280例受试者 多样本 多人群的实验结果将HbA1c水平与中度上升的视网膜病变发病率相关联 强力证明了HbA1c临床判断水平设定6 5 可作为糖尿病的诊断标准 确认血糖值与HbA1c的关系 尤其是在2型糖尿病中的应用价值 确认不同人群中血糖值与HbA1c的关系 我院存在很多患者每天仅在早餐前测定空腹血糖 发现这个值为5 8mmol L 处于正常范围内 但再检测糖化血红蛋白却发现为11 这意味着该患者在过去的3个月内 平均血糖水平已接近14mmol L 暗示其将来发生糖尿病并发症的危险性非常高 尽管早餐前血糖结果尚满意 但是一天其它时间的血糖水平却严重超标 需要对患者饮食 运动及药物治疗作出重新评估 并作出相应调整 此外患者还需较现在更为频繁地测定血糖 执行卫生标准的成效 用于糖尿病的诊断 健康人的HbA1c为4 0 6 0 未控制的DM病人HbA1c可高达10 15 随机检测HbA1c 若9 预报糖尿病的标准度约为78 灵敏度为68 特异性94 HbA1c 10 表示有80 以上为糖尿病 灵敏度43 特异性99 有效率86 所以 目前并不主张单独用HbA1c来诊断糖尿病 原因是精确度不高 对HbA1c的测定 可协助判断预后糖尿病合并视网膜病的病人 其HbA1c为8 10 表示病变中等程度 可用激光进行治疗 若大于10 则为严重病损 预后差 对妊娠性糖尿病 判断是否致畸 死胎和子痫前期则更有意义 故测定HbA1c是妊娠糖尿病控制的重要参数 执行卫生标准的成效 有助于糖尿病慢性并发症的认识 血糖测定只代表即刻的血糖水平 提示患者当时的身体状况 并不能作为评价疾病控制程度的指标 是血糖控制的评价指标 作为糖尿病患者长期血糖控制的评价指标 糖化血红蛋白 HbA1c 的测定目的在于消除波动的血糖对病情的控制观察的影响 因而对血糖波动较大的 型糖尿病患者 测定糖化血红蛋白 HbA1c 是一个有价值的血糖控制指标 对于2型糖尿病患者 可作为辅助检查 用于判定口服药是否失效而须用胰岛素治疗 执行卫生标准的成效 执行卫生标准的意义 糖化血红蛋白是糖尿病患者检测病情的最佳手段 是国际公认的糖尿病监测的 金标准 医学专家建议糖尿病患者应每月检查糖化血红蛋白值 平稳血糖 保护自己 控制糖化血红蛋白达标 对于控制糖尿病并发症的发生 发展尤为重要