DIN 38407-13前言本标准是由德国化学师协会的水质惯例标准委员会及水质化学组联合编写。专业的人员及专门的实验室才可进行以下标准的操作。必须进行相关安全指导。1.范围：本标准中的方法用于定量及定性在水中，地表水，废水中的RnSn（4-n）+类型的有机锡化合物（R=丁基，n=1到4，R=辛基，n=1到2，R=苯基，n=3 或者R=环己基，n=3），单个组分浓度从10ng/L到1000ng/L。高浓度的样品在分析前需稀释。必须注明的是，相关的阴离子没有包括在分析中。从实验室间的测试结果来看，如在较低的范围内的方法应用，会出现回收率准确性及重现性系数较大的变化。2.标准化参考：3.概念及缩写：3.1有机锡化合物：有机锡化合物是含有至少有一种碳-锡化合物的物质，碳-锡化合物的多少是衡量烷基化，芳基化的程度。3.2有机锡阳离子有机锡阳离子是包含碳-锡化合物的有机锡化合物的一部分，带有正电荷。3.3己烷根据本标准的要求，正己烷和2-甲基戊烷（异己烷），都适用于本方法。3.4GC/AED气相色谱，用于原子发射光谱检测器3.5GC-FPD气相色谱，用于火焰光度检测器3.6GC-MS气相色谱，用于质谱检测器4.原则：水中的有机锡由四乙基硼酸钠烷基化，用己烷萃取。含有萃取液的有机相，由硅胶纯化并进行浓缩，四代的有机锡化合物由毛细气相色谱分离，并由合适的检测系统（MS，FPD，AED）进行检测。选择一个适当的内标进行整个过程的校准及结果的定量。5.指定本方法是通过萃取及气相色谱对有机锡化合物进行检测。6 干扰 检查并确保试剂不会产生背景值，因为其中一些试剂可能含有有机锡化合物杂质。虽然在处理样品和相关溶剂时每个烷基化的阶段都用到内标，但在内部实验室测试有机锡化合物的过程中，有时还是会出现明显的错误，这时就要做一个包含整个实验过程所有步骤在内的重复性试验。由于正己烷作溶剂时三苯基锡化合物不会从硅胶中洗脱出来，所以要适量加入丙酮，随之洗脱液容量增加。加入量要保证三苯基锡化合物定量的洗出来时其他杂质不会与其共洗脱。为了使方法本身产生的干扰最小化，硅胶和洗脱液的使用量要最小。分析轻度污染的样品时，其试剂背景会产生干扰，而硅胶和洗脱液可能需要降到上述指定用量的十分之一,层析柱的大小也要相应减小。如果在提取过程中产生了乳胶状的混浊物,应该采取适当的方法使其与有机相完全分离（例如：剧烈振荡，冷冻，加硫酸钠，加入钙离子或镁离子，离心，如果产生气泡的话要减压）悬浮物和严重的有机污染会影响提取的效果。含硼化合物（例如：硼烷）对GC检测产生干扰并且也很可能影响质谱的检测。因此建议对样品进行提纯以保护色谱柱同时提高分离效果。7 仪器7.1 概要脏的玻璃器皿可以用浓硝酸的蒸汽进行清洗，在5升的烧杯中加入约4厘米高的浓硝酸，将待洗容器倒置在烧杯中,用电炉低温加热6小时（加热过程中不要让硝酸沸腾）。将玻璃器皿冷却，先后用水和丙酮冲洗,，在空气中风干。 使用到的器材：7.2 容量瓶, 容量为10ml, 50ml, 100ml和1000ml(参考标准ISO 1042-A10-C)。7.3 单刻度球形移液管，容量为1ml, 2ml, 3ml,4ml,5ml,6ml,7ml,20ml和50ml(参考标准DIN 12691-VPAS 1)。7.4 微量注射器：容量10ml和250ml7.5 棕色细口平底试剂瓶：容量1L,带磨口瓶塞（参照标准DIN 12036-E 1000-G 平底瓶） 7.6 分液漏斗：容量1000ml（参照标准DIN 12451-L 1000 分液漏斗）7.7 毛细管柱：（内径1cm长15cm），装有烧结的玻璃过滤器，没有活塞。7.8 烧杯：容量150ml（参照标准DIN 12331-H150 烧杯）7.9 振荡器7.10 分析天平：精确到0.1mg，称量上限160g7.11 实验室天平：称量上限2000g7.12 高速磁力搅拌器：（例如：速度达到1200min-1）7.13 磁力搅拌子：外层为玻璃或聚四氟乙烯材料，大小60mm*4.5mm7.14 称量药匙7.15 圆底烧瓶：容量100ml和250ml7.16 蒸发器（例如：真空度可控的旋转蒸发器）7.17 马弗炉：可维持温度500207.18 烘箱：可维持温度1807.19：石英皿（例如：内径12cm）7.20 干燥器：（参照标准 DIN 12491-200 干燥器）7.21 漏斗：（例如：内径12cm）7.22 分液器：（ 例如：图1所示Schultze分液器）7.23 气相色谱：需使用毛细管色谱柱，可程序升温并有合适的检测器7.24 分流或不分流进样器：柱上进样技术或冷进样系统（自动进样系统比较合适）7.25 检测器：可能用到下列检测器a) 原子发射检测器b) 火焰光度检测器，带有590nm分离滤光镜或610nm干扰滤光镜c) 带有电子轰击源的质谱7.26 评估单位：适合纪录和分析检测器输出的测量数据7.27 广口平底试剂瓶：容量500ml（参照标准 DIN 12039-W 500 平底烧瓶） 8 试剂8.1概要需用分析纯或者更高纯度的试剂，水必须是无污染的。需用到下列试剂8.2 30% (质量百分比)HNO38.3 CH3COOH8.4 40%( 质量百分比) NaOH8.5 CH3COONa8.6 Na2SO48.7硅胶 颗粒大小在0.085mm和0.28mm之间8.8 四氢呋喃(THF) 无水和无过氧化物8.9 (CH3)2CO8.10 CH3OH8.11 C6H148.12 NaB(C2H5)48.13 C4H9SnCl38.14 C8H18SnCl28.15 C12H27SnCl8.16 C16H36Sn8.17 C8H17SnCl38.18 C16H34SnCl28.19 C18H15SnCl8.20 C18H33SnCl8.21 C7H15SnCl3 作为内标8.22 C14H30SnCl2 作为内标8.23 C9H21SnCl 作为内标8.24 C12H28Sn 作为内标8.25 试剂与溶液的配制8.25.1 储液A，表1中列出的有机锡化合物各称量1mg（精确到0.1mg）到100ml容量瓶中，用少量甲醇溶解，再用甲醇定容并摇匀。8.25.2 回收率跟踪液 (作为参照溶液)（见表2），用单刻度移液管移取适当体积的储液到容量瓶中，甲醇定容并摇匀。稀释倍数不得超过100。用A2(1ml)和A3(1ml-6ml)储液配制溶液AH1到AH6。这样配制的回收率跟踪液中有机锡的浓度在10ng/ml到1000ng/ml之间。取决8.25.1称取的最初质量。（ 见表1） 8.25.3 储液B包含内标，称量120mg 二氯二庚基锡，150mg三氯一庚基锡，115mg 一氯三丙基锡和100mg四丙基锡 （精确到0.1mg）到100ml容量瓶中，并用少量甲醇溶解，再用甲醇定容并摇匀。（要准备1mg/ml有机锡阳离子浓度的溶液需称取122.4mg二氯二庚基锡，148.8mg三氯一庚基锡，114.3mg一氯三丙基锡和100mg四丙基锡（如表1所示）8.25.4含内标回收率跟踪液B1,B2（见表3）a) 单刻度移液管移取1ml B储液到100ml容量瓶中，甲醇定容并摇匀（得到B1溶液）b) 单刻度移液管移取1ml B1到100ml容量瓶中，甲醇定容并摇匀。 每一步稀释倍数都不可超过稀释比：1：100。B2溶液用于饮用水，地表水和废水的检测中。B2中有机锡阳离子最终浓度在100ng/ml左右，决定于最初质量（见表1）。8.25.5 空白溶液:1L的细口平底试剂瓶中装入1L水,加入甲醇1ml作为回收率跟踪液，搅拌溶液20min。8.25.6 参照溶液在每个工作范围中都要准备6份参照溶液,其最大浓度与最低浓度直比为10：1.即: 参考溶液中有机锡阳离子浓度包含大约1000ng/l,850ng/l,700ng/l,550ng/l,400ng/l,250ng/l,分别的,高浓度区,大约240ng/l,200ng/l,160ng/l,120ng/l,80ng/l和40ng/l,中间浓度区,大约35ng/l,30ng/l,25ng/l,20ng/l,15ng/l和10ng/l.以此类推准备低浓度区的参照溶液.当测试饮用水、地表水、废水时，将1L水转移入6个1L窄口瓶，并用移液管插入液面以下，往每个窄口瓶中加入1ml 跟踪样品（AH1-AH6，AM1-AM6，AU1-AU6；参见表二），注意该步骤需在剧烈振荡下进行，以保证跟踪样品能够迅速均匀地在水中分散开。振荡持续至少20分钟。 8.25.7醋酸缓冲溶液，将82g醋酸钠溶于500ml水，转入1L容量瓶中，加入冰醋酸，调节PH值到4.5，加水定容至刻度线，摇匀。 8.25.8衍生试剂A（水相的，质量百分比为2%），称量200mg四乙基硼酸钠，装入10ml容量瓶，加水定容至刻度线。该溶液不稳定，不可过夜保存，须现配现用。不管其它阳离子的种类是什么，四乙基硼酸阴离子总是与水中的有机锡阳离子反应，形成相应的带有乙基的化合物。其它各种四乙基硼酸化合物的适用性需在使用前进行检查。8.25.9衍生试剂B（四氢呋喃，质量百分比为20%），称量2g四乙基硼酸钠，装入10ml容量瓶，加四氢呋喃定容至刻度线。8.25.10干燥剂，将250g300g硫酸钠粉末180温度下，在石英皿中干燥至少4小时，然后将硫酸钠粉末转移入广口瓶中，广口瓶放在干燥器中冷却至室温，将干燥器密封好。8.25.11层析柱所用硅胶，将硅胶置于石英皿中，在马弗炉中（50020），至少烘12小时，注意保证最高温度不超过520。然后等炉温降到200时，将硅胶转移至广口平底瓶中，在干燥器中冷却至室温，加水使得质量百分比浓度达到3%，封住瓶口，在振荡器中振荡2小时。取硅胶三个不同部分用比重测定法测定其含数量来决定硅胶均匀度和含水量，要求误差不得超过0.1%。注意不可一次配超过120g硅胶。8.25.12层析柱，将5g硅胶注入层析柱，表面覆盖一层3g左右的干燥剂，用30ml己烷冲洗，待用。注意确保柱体填充的均匀性。（例如：将填充材料悬挂浸入己烷）商业上常用的柱体是使用过的（参照第6条）。8.25.13提取液的制备含有丙酮的己烷常用于纯化含有三苯锡混合物的萃取液。用己烷不能把三苯锡混合物从硅胶上洗涤下来，因此适当添加丙酮和提取液的体积。为避免提取液的污染，要确定加入丙酮的量，因此，需要对每一批硅胶进行预检（5%10%的丙酮加入到30ml中的提取剂中是比较合适的）。将提取液和一定体积的丙酮转移入100ml的容量瓶中，加己烷定容至刻度线，摇匀。9.步骤9.1取样和样品制备当测试饮用水、地表水、废水样品时，按照下列步骤，包括萃取物（如9.2条款）转移入1L窄口瓶。当测试地表水和废水样品时，用水稀释样品至浓度范围在10ng/L1000ng/L。因此可以检测有机锡混合物的浓度，例如用筛选法和有选择地确定初始样品质量。在评估中要考虑到实际分析的地表水和废水的体积。设定并标记窄口瓶容量刻度线，加入样品至刻度线。在阴暗处保存样品并在24小时内使用。注意事项：窄口瓶上的容量标记线并不总是精确的，但与整个分析过程中造成的误差相比是可以忽略不计的。9.2 样品处理9.2.1 一般情况下