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基础知识:凝胶色谱法1 有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是:( )A它们都是分离蛋白质的重要方法 B、它们的原理相同C、使用凝胶色谱法需要使用缓冲溶液而电泳不需要 D、以上说法都正确2 凝胶色谱法分离蛋白质时使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(SephadexG75),其中G、75的含义分别是()AG表示凝胶的使用量,75表示加75 g水BG表示凝胶的交联程度,75表示需加热75 CG表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示每克凝胶膨胀时吸水7.5 gDG表示凝胶的膨胀体积,75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm33 使用凝胶色谱法分离蛋白质时,洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中,分别使用下列哪些试剂( )蒸馏水 生理盐水 20 mmol/L的磷酸缓冲液 清水 柠檬酸钠A B C D4 在凝胶色谱法分离蛋白质时,洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中,分别使用的试剂的是()清水20 mmol/L的磷酸缓冲液生理盐水蒸馏水A BC D5 血红蛋白释放要使用的物质是()0.9%的生理盐水甲苯 磷酸缓冲液蒸馏水A BC D6 凝胶色谱法分离血红蛋白质的依据是( )A根据蛋白质分子的大小 B根据蛋白质分子质量的大小C根据蛋白质所带电荷的多少 D根据蛋白质溶解度的大小7 下列对凝胶色谱柱相关操作过程正确的是( )A将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴B将橡皮塞下部用刀切出凹穴C插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片8 凝胶常在分离蛋白质时使用,其的种类很多,但都有相同的作用是()A改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度C将酶或细胞固定在凝胶中D与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速度9 利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是()A蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小B蛋白质相对分子质量的大小C蛋白质所带电荷的多少D蛋白质溶解度的大小10 下列有关生物技术实验的叙述,正确的是( )A制作果酒和制作果醋所需的发酵底物、适宜温度等均相同B在植物组织培养过程中,制备的MS培养基需要用酒精消毒C用二苯胺鉴定DNA和用斐林试剂检测还原糖时均需要水浴加热D用凝胶色谱法分离蛋白质时,与分子量较小的蛋白质相比,血红蛋白移动较慢参考答案:1 答案: A解析: 2 答案: C解析: G表示凝胶交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g。3 答案: C4 答案: C解析: 在分离蛋白质时,用生理盐水洗涤红细胞,以去除杂蛋白,然后将其加入蒸馏水中使红细胞破裂,释放血红蛋白,透析需用磷酸缓冲液,以维持pH稳定,故选C。5 答案: B解析: 甲苯作用为溶质,脂类物质也有利于红细胞涨破和血红蛋白的释放,蒸馏水作用是使红细胞吸水涨破,故选B。6 答案: B解析: 凝胶色谱法分离血红蛋白质的依据是根据蛋白质分子质量的大小7 答案: A解析: 制作凝胶色谱柱时,先选择合适的橡皮塞打孔,然后将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴,取适宜长度的玻璃管插入橡皮塞孔内,插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面。将尼龙网剪成与橡皮塞上部一样大小的圆片,覆盖在橡皮塞的凹穴上,再用尼龙纱将橡皮塞上部包好,插入到玻璃管的一端。8 答案: A解析: 凝胶的种类很多,但所有凝胶均是一些微小的多孔球体,小球内部有许多贯穿的通道,由于不同蛋白质相对分子质量不同,在凝胶中走过的路径不同,因而得以分离。9 答案: B解析: 凝胶色谱法所用的凝胶实际上是一些微小多孔的球体,在小球体内部有许多贯穿的通道,相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。10 答案: C解析: 试题分析:制作果酒和制作果醋所需的发酵底物、适宜温度等均不相同,A错误;在植物组织培养过程中,制备的MS培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌,B错误;用二苯胺鉴定DNA和用斐林试剂检测还原糖时均需要水浴加热,C正确;用凝胶色谱法分离蛋白质时,与分子量较小的蛋白质相比,血红蛋白移动路径短,移动较快,D错误。考点:本题考查生物技术实践的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。3
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