弓形虫与弓形虫病的研究近况 学术讲座提纲 弓形虫 弓形虫病 寄生在猫及猫科类动物肠道细胞内 引起 弓形虫 Toxoplasmagondii 细胞内寄生球虫 在人及190多种动物体内寄生 弓形虫病病原体 世界性分布 猫及猫科类动物 终宿主 和重要传染源 牛 羊 猪等哺乳类动物和人类中间宿主 讲座提纲 P 1 讲座提纲 P 2 弓形虫和弓形虫病国内研究起步较晚 一般医院实验室检查尚未普及临床医生对弓形虫和由它引起的弓形虫病知之甚少 认识不多 经验不足 重视不够 罕见虫 罕见病 在免疫功能健全的人群体内多呈隐性感染阶段 不引起人们注意和重视 70年代后期 猪弓形虫病大流行 引起兽医部门重视 80年代 全国弓形虫病流行病学调查 新技术应用及诊断试剂盒供应 医疗部门介入 出现了以临床为中心弓形虫病的病原学 流行病学研究热潮 近年来 研究进展更快 分子生物学 免疫学及临床学 弓形虫病涉及临床各学科 一 弓形虫简史 1900年 Laveran 拉费朗 从麻雀体内观察到疑似今日弓形虫的虫体 讲座提纲 P 3 拉费朗 Laveran 麻雀 讲座提纲 P 4 1908年 法国学者Nicolle从北非突尼斯 刚地梳趾鼠 Ctenactylusgondii 的肝 脾单核细胞中发现了一种类似利什曼原虫的寄生物 当时被称为 刚地利什曼原虫 Leishmaniagondii 后来认为不同于利什曼 而是一种独立的寄生虫 由于该虫滋养体 速殖子 外形象弓箭的 弓 故命名为 刚地弓形虫 Toxoplasmagondii 也叫 弓浆虫 或 弓形体 法国学者Nicolle 刚地梳趾鼠 1909年 意大利细菌学家Splendore在巴西一只死兔体内发现同样的虫体 当时称 兔弓形虫 Toxoplasmacuniculi 讲座提纲 P 5 讲座提纲 P 6 1910 1939年 世界各国学者从鼹鼠 鼷鼠 松鼠 家鼠 游蛇 鸽 貂 犬 鸡等动物体内发现弓形虫 有趣的是 每一个作者在一种动物体内发现弓形虫时即给一个新名 那段时间有16位学者从18种脊椎动物中发现了弓形虫 命名不同 但基本上属于一种 讲座提纲 P 7 人类弓形虫病 世界公认的是捷克医师Janku1923年首先报告人体弓形虫病例 11个月的病孩 右眼失明 左小脑畸形和脑积水 两侧眼底黄斑部有变形病灶 视网膜切片发现弓形虫包囊 并指出 先天性脑积水与弓形虫有病原学上联系 1937年 Wolf在一例新生儿脑炎患者的脑 视网膜 脑脊液中发现弓形虫 捷克医师Janku 值得注意的是 早期发现病例多数为 先天性弓形虫病 四大特征 有脑积水或小脑畸形 有脉络膜视网膜炎 有脑钙化病灶 有随意运动障碍 后天获得性弓形虫病的发现追溯起来是40年代的事 1941年 Sabin从5Y急性脑炎小孩的脊髓中找到一株弓形虫 作者以患者姓名第一个字母命名RH株 当今世界上广泛采用的强毒代表株 讲座提纲 P 9 讲座提纲 P 10 1950年 Siim提出本病临床分型意见 并从一例淋巴结肿大患者的淋巴结中分离出弓形虫 WHO估计 病因不明的淋巴结肿大 15 系弓形虫所致 1969年 从猫粪便中找到弓形虫卵囊 证实和阐明了弓形虫的无性繁殖和有性繁殖 确定了弓形虫为一种球虫 解放前 我国并不了解此病 55年于恩庶教授等福建平潭首次从家兔和猫体分离出弓形虫虫株当时因缺乏诊断手段 病例不多 未引起重视 于恩庶教授 讲座提纲 P 11 于恩庶教授等福州 长乐用补体结合试验 皮内试验和染色试验调查了农民 小学生 5Y以下儿童和医院病人共851人 阳性率为1 4 8 1 70年代后期 因猪弓形虫病大流行 许多省市发生大批 无名高热猪 病因一直不明 引起兽医部门的重视 64年 谢天华教授江西发现一例眼型弓形虫病 我国人体弓形虫病首次正式报道 谢天华教授 讲座提纲 P 12 到了80年代 卫生部门也开展了全国性流行病学调查 基本上掌握了我国弓形虫病的流行特征 84 85年 四川 陈义民教授和 广州中山 陈观今教授作了弓形虫超微结构研究 88年浙江首先研制成单克隆抗体 用ELISA检测血中循环抗原 90年 上海二医大 夏爱娣教授首次建立弓形虫人株ZS2的基因库 并从中筛选出一个含有弓形虫特异DNA顺序的克隆 应用Southern印迹法及斑点印迹法检测 显示同位素32P标记的探针 能与弓形虫DNA呈特异杂交 89年 于恩庶教授等应用免疫印迹法和中和试验 分离出人和动物弓形虫5株 并发现株间有Ag差异 90年 沈继龙教授 徐秉琨教授等应用染色试验 乳胶试验 免疫荧光技术 ELISA及免疫印迹技术分析3株3型弓形虫抗原 证明株间有Ag差异 讲座提纲 P 13 二 国内外弓形虫病流行情况 Toxoplamosis 属于动物源性疾病 许多哺乳类动物和多种鸟类是人类弓形虫病的传染源 广泛分布于全世界五大洲的各地区 温带 热带和寒带 人群感染极为普遍 许多国家和地区感染率在25 50 之间 欧美国家较高 如法国 阳性率81 4 3336 4099 美国25 33 有人估计全球约有1000Millions 十亿 人被弓形虫感染 平均感染率33 其实 弓形虫就在我们身边 讲座提纲 P 14 Jacob曾说过 我们正处在弓形虫感染的汪洋水之中 足以说明弓形虫与人类之间的关系 近十几年来 根据血清学调查 我国人群弓形虫抗体阳性检出率为25 50 个别地区90 并发现弓形虫感染率与养猫呈正比 Jacob 讲座提纲 P 15 随着人们生活水平 生活质量的提高 尤其是改革开放以来 不少城市里的不少人 对犬 猫等 宠物 情有独钟 其实 这一些宠物恰恰是传播弓形虫病的重要的传染源 文献报道 孕妇弓形虫感染率为32 9 孕妇中不明原因的流产 死产者 其弓形虫感染率是正常孕妇的7 77倍 因感染弓形虫而致死胎 其发生率农村孕妇为6 79 城市孕妇为0 47 国内新生儿脐血弓形虫Ab测定 阳性率为29 88 讲座提纲 P 16 福建徐晓云报告 弓形虫感染的孕妇比未感染孕妇生产先天性畸形儿的危险性大10倍 江苏朱奇教授1986年在江苏六县用IHA调查4328人 阳性率为2 6 16 16 平均为9 7 我们教研室曾于1987 1989年对南通市弓形虫感染也作个调查 用IHA检查1261人 阳性率为0 63 27 27 平均为3 17 其中 南通县100名小刀手弓形虫Ab阳性率为7 南通市肉联厂直接与猪接触的187位工人阳性率为5 35 王正仪教授等1983年调查北京农民221人 阳性率为28 5 市区居民590人 阳性率为12 9 在地区分布上 农村高于城市 可能与畜 禽接触机会有关 63名执刀厨师弓形虫Ab阳性率为4 76 附院228例正常孕妇的弓形虫Ab阳性率为1 75 而8例有畸胎史的妇女其弓形虫Ab阳性率为12 8 南通市福利院11例残疾儿童弓形虫Ab阳性率为27 3 讲座提纲 P 17 特别需要注意的是 孕妇感染弓形虫后 不论有无临床症状 都会影响胎儿发育 严重致畸甚至死亡 同时可使孕妇流产 死产或早产 也会增加妊娠合并症和影响胎儿智力 弓形虫是严重先天性疾病的病因以及弱智儿的一个重要病因之一 有效地防治和控制弓形虫和弓形虫病与优生优育 切实提高人口素质密切相关 国内许多大城市已经把弓形虫抗体的检测列入孕前 婚前检查的必检项目 近几年来研究证实 弓形虫病与某些眼病 如脉络膜视网膜炎等 某些神经系统疾患 慢性病毒性肝炎 恶性肿瘤 淋病 不孕症甚至爱滋病等免疫功能低下疾病呈正相关 因此 重视和加强攻形虫与弓形虫病的研究只能有 不能无 利在当代 功在春秋 讲座提纲 P 18 讲座提纲 P 19 三 人类感染弓形虫病的途径和方式 1 传染源 包括所有的哺乳类动物和多种鸟类 现已证实有 14种家畜 家禽 46种野生动物 7种鸟类 5种爬行两栖动物等都有自然感染 人类主要由动物传播 其中猫 猪 绵羊等是重要传染源 它们的自然感染率分别为5 60 54 1 和25 猫粪中弓形虫卵囊数目达1000万个 排出的卵囊 在外界存活1Y 1 5Y 讲座提纲 P 20 传播途径有先天性和获得性两种 前者指胎儿在母体子宫内经胎盘而感染 又称垂直感染 后者指出生后的人体由外界获得的感染 又称水平感染 2 传播途径和方式 先天性传播 母体在孕期感染后 虫体经血流传入胎儿 造成各种先天性畸形 缺陷 残废或死亡 而且可使孕妇出现流产 早产 死产或增加妊娠合并症 讲座提纲 P 21 讲座提纲 P 22 新生儿先天性弓形虫病死亡率极高 即使存活下来也常有畸形 心脏病 眼病和智力发育不全等多种后遗症 美国每年约有3000名婴儿出生时患有弓形虫病 这些婴儿中5 15 死亡 8 10 脑及眼明显损伤 10 13 视觉损伤 获得性传播 弓形虫感染以获得性传播为主 对其感染途径的探讨 历来为多数学者所重视 关于本病的水平传播问题 过去一直认为是通过食入含有弓形虫的肉或未煮熟的肉制品的途径来解释 但后来从大量的流行病学观察中所见 并不能使人对上述解释满意 如在印度调查素食者感染率与肉食者几乎没有差异 224名素食成年人感染率为14 印度佛教徒感染率为21 讲座提纲 P 23 一些食草类的牛 羊 既不吃肉 与猫也很少有直接关系 但感染率很高 到1969年基本弄清弓形虫生活史后才知道 本病传播途径主要是吃了猫粪污染的含弓形虫卵囊或包囊的食品导致弓形虫病的发生 传播方式 A 经消化道传播 猫粪中排出的卵囊污染手或食物 包括未煮熟的猪 牛 羊肉 蛋 未消毒的牛奶 经口感染 讲座提纲 P 24 B 经接触传染 猫 猪 犬 兔等动物的痰和唾液中均检出弓形虫 当人类与家畜密切接触 如手 脸被以上动物舐吸或咬伤时 弓形虫可经受损皮肤或黏膜使人感染 有人报告 不养猫的海岛上的居民弓形虫的感染率为7 而养猫的海岛上居民的感染率高达43 77 84年甘绍伯调查北京地区接触畜禽者 弓形虫的感染率为15 3 对照组者为7 9 讲座提纲 P 25 90年赵忡堂等检查济南地区家庭养猫者的感染率显著高于不养猫者 饲养时间 1Y 1 2Y和 2Y感染弓形虫的危险性 分别为未养猫者的1 3 2 8 3 5倍 表明养猫特别是饲养时间1Y 可能为弓形虫感染的主要原因之一 C 经昆虫或吸血节肢动物传播 目前研究证实 已在蚊 虱 蚤 蜚蠊和臭虫等17种节肢动物体内分离到弓形虫 显然 自然界的这一些节肢动物可作为弓形虫卵囊的机械携带者 当它们污染食物时可传播本病 讲座提纲 P 26 D 经输血或器官移植传播 弓形虫病在动物或人类均可发生弓形虫血症 可波及各脏器造成全身性感染 因此输血或器官移植可能成为传播本病的另一重要途径 E 经空气飞沫或尘埃传播 实验动物的鼻腔分泌物中 可分离到弓形虫 在病人的唾液 痰 鼻黏膜及牙槽等处也分离到弓形虫 因此 弓形虫卵囊随动物粪便排出后污染外环境 通过呼吸道传播的可能性不能排除 讲座提纲 P 27 3 人群易感性 人类对弓形虫普遍易感 胎儿和幼儿对弓形虫的易感性比成人高 老年人 肿瘤患者及应用免疫抑制剂者对弓形虫易感性 免疫功能未成熟或免疫功能下降 换句话说 孕妇 免疫抑制剂治疗者 器官移植者 AIDS 受血者 肿瘤患者等免疫功能下降者 为弓形虫感染的高危人群 包括兽医 屠宰人员 饲养人员及从事弓形虫病实验室工作人员等职业接触者 人群感染弓形虫后 多数呈隐性感染 无临床症状 带虫 或仅表现为局部淋巴结肿大或仅在做血清学检查时被发现 讲座提纲 P 28 四 弓形虫病防治研究进展 1 生物学和免疫学方面 小鼠体内外相结合的保种方法成功 不同品系小鼠易感性有所区别 ABO血型中 A型者有较高的易感性 与染色体畸形有因果关系 2 建立弓形虫特异性系列四项检测防治方法 涂片 盲传 活检 免疫学多种方法 能客观地有效提供流行病学诊断及科研应用 3 形成具一定特色免疫血清学诊断方法IHA 1 256 亚临床 1 1024 活动性感染 1 2048 重度活动性感染 讲座提纲 P 29 4 探索弓形虫病新的治疗药物 目前公认的有效的抗弓形虫药物有乙胺嘧啶