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第一部分 微生物的利用 第二部分 酶的应用(时间:90分钟,满分:100分)一、选择题(本题包括15小题,每小题2分,共30分)1.微生物培养过程中,肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是()A.细菌的大小、形状、颜色B.菌落的大小、形状、颜色C.有无鞭毛D.培养基的不同答案B解析微生物的鉴别和分离,一般要用固体培养基,由于不同微生物在固体培养基上长出的菌落的形状、颜色等各不相同,所以可以作为鉴别的标准。而每一个细菌细胞很小,肉眼无法看到其颜色、形状等。2.在分解尿素的细菌的分离和鉴定中,对先后用到的两种培养基的叙述正确的是()A.加入酚红指示剂作为选择培养基,再加入唯一碳源作为鉴别培养基B.加入唯一氮源作为鉴别培养基,再加入酚红指示剂作为选择培养基C.加入唯一氮源作为选择培养基,再加入酚红指示剂作为鉴别培养基D.加入酚红指示剂作为选择培养基,再加入唯一碳源作为鉴别培养基答案C解析能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌;细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。3.下列关于微生物的培养和分离的叙述中,不正确的是()A.细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B.噬菌体或大肠杆菌可在固体培养基上迅速增殖形成菌落C.灭菌的目的是消灭与培养微生物竞争的杂菌D.涂布分离法分散细菌得到单菌落的效果更好答案B解析噬菌体是病毒,不能直接在培养基上繁殖,必须在宿主细胞内才能增殖。4.下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是()A.操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B.划线操作须在火焰上进行C.在5区域中才能得到所需菌落D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌答案D解析操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌,A项错误;划线操作须在火焰旁进行,B项错误;在5区域中最有可能得到所需菌落,其他区域也可能存在单菌落,C项错误;在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌,D项正确。5.在细菌培养过程中,下列有关操作正确的是()A.使用已灭菌的玻璃刮刀、培养皿,操作过程中不再灭菌B.培养基分装到培养皿后进行灭菌C.倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行D.分离得到的菌落应先接种在平板上,培养24 h后,置于4 冰箱保存答案C解析玻璃刮刀在操作过程中需灼烧灭菌,A项错误;培养基应该先灭菌后分装,B项错误;倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行,以防止杂菌污染,C项正确;分离得到的菌落应先接种于斜面上,置于37 的恒温箱培养24 h后,再置于4 冰箱保存,D项错误。6.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是()A.筛选出能分解尿素的细菌B.对分离的菌种作进一步鉴定C.作细菌的营养成分D.如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素答案B解析筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可,不需要加指示剂。加入指示剂的培养基,目的都是对要分离的菌种作进一步的鉴定。7.研究认为,用固定化酶技术处理污染物是很有前途的,如将从大肠杆菌中提取的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成的制剂,可用于降解残留在土壤中的有机磷农药,与用微生物降解相比,其作用不需要适宜的()A.温度 B.pHC.水分 D.营养答案D解析微生物降解有机磷农药时,需要营养物质,而固定化酶却不需要营养物质。8.尿素是尿素分解菌的氮源,因此在配制培养基时()A.葡萄糖在培养基中含量越多越好B.尿素在培养基中含量越少越好C.尿素分解菌有固氮能力,培养基中的尿素为无机氮D.尿素分解菌无固氮能力,培养基中的尿素为有机氮答案D解析葡萄糖是微生物最常用的碳源,但在培养基中不能加入过多,否则,会使细胞无法吸水而死亡;尿素在培养基中可以提供氮源,加入要适量而非越少越好;同时尿素是尿素分解菌的有机氮源,而不是无机氮源,在分解过程中,尿素会被尿素分解菌分解为氨。9.分离以尿素为氮源的微生物实验中,全营养LB固体培养的作用是()A.扩大培养尿素分解菌B.分离尿素分解菌C.作为对照,用来判断选择培养基(尿素固体培养基)是否起到了选择作用D.没有具体作用答案C解析在LB培养基和尿素培养基上接种等量微生物,结果经培养后LB培养基上有较多菌落,而尿素培养基上只有少量菌落,从而说明尿素培养基起到了选择作用。10.下列说法正确的是()A.植物、霉菌、酵母菌和细菌等所有生物活细胞均能产生果胶酶B.由酵母菌发酵生产的果胶酶是食品工业中使用量最大的酶制剂之一C.果胶酶是分解果胶的一类酶的总称D.温度过高或过低,果胶酶都会丧失活性答案C解析植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶,并不是所有生物活细胞均能产生果胶酶;霉菌发酵生产的果胶酶是食品工业中使用量最大的酶制剂之一;温度过低,果胶酶不会丧失活性。11.固定化酶的优点是()A.有利于酶的活性发挥 B.有利于产物的纯化C.有利于提高反应速度 D.有利于酶发挥作用答案B解析固定化酶的制作目的是降低生产成本。一是能够顺利地从发酵产物中把酶分离出来,二是使酶可以反复利用。从题目中看出,选项B是正确的。酶的固定化,对酶的活性、酶作用的发挥、反应速度的提高,并没有多大作用。12.下列说法中,不属于在应用酶的过程中常遇见的一些实际问题的是()A.酶与反应物混合,产品难以提纯B.酶在生物化学反应中往往难以回收C.酶遇强酸、强碱、高温等条件易失活D.酶作为催化剂,绝大多数酶是蛋白质答案D解析酶的作用条件比较温和,易受温度、酸碱度的影响;酶在生物化学反应中与反应物、产物混合在一起,很难回收,影响产品质量。13.可以鉴定出分离的分解尿素的细菌的方法是()A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红试剂D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂答案A解析尿素在尿素分解菌的作用下分解产生氨,氨会使培养基的碱性增强,pH升高,酚红指示剂变红。14.某同学为探究温度对果胶酶活性的影响,在不同温度条件下,将等量的果胶酶加入到等量的苹果泥中,在反应同样时间后,再将反应液过滤同样时间,用量筒测定滤出苹果汁的体积。下列曲线图能正确反映实验结果的是()答案B解析果胶酶在0 时活性较低,但也能催化苹果泥形成果汁,果汁量不为0;随着温度升高,果胶酶的活性升高,果汁量增加;当超过最适温度时,果胶酶活性降低,果汁量减少。正确的应是B曲线。15.下图为某同学探究温度对果胶酶活性的影响的实验操作流程图,下列叙述错误的是()A.底物为苹果泥,酶液为果胶酶溶液B.底物与酶混合前的同温处理可以取消C.实验的自变量为底物与酶混合后的温度D.检测的是果汁的体积或果汁的澄清度答案B二、非选择题(本题包括8小题,共70分)16.(6分)(1)现有一份污水样品,某兴趣小组欲检测其中的细菌数,进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液,用_法分别接种于固体平面培养基上,经培养后进行计数。该实验应注意,接种前,从盛有_的容器中将玻璃刮刀取出,放在酒精灯火焰上灼烧,冷却后待用;分组时,需用_作为对照。(2)在上述细菌培养实验中进行计数时,应计数的是接种了()A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数答案(1)涂布分离70%酒精未接种的培养基(2)D解析(1)细菌的分离与计数常用涂布分离法,即用玻璃刮刀将一定体积的稀释液涂布到固体平面培养基上。玻璃刮刀在使用前需进行灭菌处理,即将其浸入体积分数为70%的酒精中,随后取出放在酒精灯火焰上灼烧,冷却后待用。为排除其他因素的影响,提高实验的可信度,实验中要设置空白对照。(2)将菌液涂布到固体平面培养基上后,倒置放在恒温箱中培养,培养一段时间后,统计菌落数。当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,这样通过统计菌落数就可估算出待测样品的细菌数目,所以要选择合理稀释度的样品。17.(6分)请回答微生物培养和分离的有关问题:(1)欲从土壤中分离出能利用尿素的细菌:以_为唯一氮源且加入了_指示剂的培养基,用_法分离细菌。若培养基平板上有菌落存活且颜色变_,则说明分离成功。(2)分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基,其成分_。A.前者含琼脂,后者不含琼脂和琼脂糖B.两者都含有琼脂C.前者含有琼脂糖,后者不含琼脂糖但含琼脂D.两者都不含琼脂和琼脂糖答案(1)尿素酚红涂布分离(或涂布)红(2)C解析(1)分离能利用尿素的细菌,只需以尿素为唯一氮源,加酚红作指示剂,采用涂布分离法分离细菌,只要培养基中的指示剂变红,标志着存在脲酶水解尿素的反应,证明菌株可以以尿素为氮源。(2)分离以尿素为氮源的细菌所用培养基应含有琼脂糖,而分离大肠杆菌所用培养基则不含琼脂糖而含琼脂。18.(8分)如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。(1)图中选择培养基应以_为唯一氮源;鉴别培养基还需添加_作指示剂,产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后,其菌落周围的指示剂将变_色。(2)在5个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是_,每克土壤样品中的细菌数量为_108个;与血细胞计数板计数法相比,此计数方法测得的细菌数较_。答案(1)尿素酚红红(2)涂布分离法1.75少解析(1)脲酶由分解尿素的细菌产生,故需用以尿素为唯一氮源的培养基筛选该类微生物。分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,故培养基中加入酚红指示剂后,菌落周围将出现红色。(2)涂布分离法常用来统计样品中的活菌数,在计数时一般选择菌落数在30300的平板进行计数,并取平均值。每克样品中的菌株数()M。因培养基上两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,故统计结果往往较实际数目少;而用血细胞计数板计数时,死亡的、活的菌体都计数在内。19.(10分)下表是3组生物实验培养基。请回答下列问题:组别培养基a无机盐、蔗糖、维生素和甘氨酸等有机物、水、琼脂b葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、酚红、水、琼脂糖c蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水、琼脂(1)分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基_。在含有脲酶的细菌菌落周围会出现_,这是由于尿素被分解产生的_使pH升高,酚红指示剂产生颜色变化,从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力_。(2)用培养基a进行植物组织培养,则培养基中还需加入_。一般先用_(填“发芽”或“生根”
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