学号：136745012毕 业 设 计 （2013届本科） 题 目：苦瓜多糖的分子修饰方法研究 学 院： 科学技术学院 专 业： 生物工程 姓 名： 李光耀 指导教师： 马镝 完成日期： 2013年 06月 5 日毕业论文任务书论文题目苦瓜多糖的分子修饰方法研究下发任务日期2012.5学生姓名李光耀指导教师马 镝一.论文主要内容 1.苦瓜多糖的提取； 2.苦瓜多糖的分子修饰方法研究。二.论文的基本要求查找有关的文献，掌握苦瓜多糖的提取方法，及苦瓜多糖的分子修饰方法，然后独立设计可行性实验，进行实验的准备。整个实验从设计到实施要独立自主完成，掌握实验室常用仪器设备的操作，锻炼动手能力，培养严谨求实的科研态度，对所得实验数据可以系统分析，得到合理的结论。三.论文（设计）工作进度安排阶段论文（设计）各阶段名称日期1查阅文献，写综述2012.5.12012.6.12试验设计及准备2012.6.12012.7.13试验实施2012.7.12013.4.14数据处理2013.4.12013.5.15撰写论文2013.5.12013.6.16论文答辩2013.6备注：四.应收集的资料及主要参考文献1黄芳，蒙义文活性多糖的研究进展天然产物研究与开发19991l (5)：90-98 2王晓娟，魏传晚、徐淑永等生物活性多糖结构与功效关系研究进展 广州化工200432(1)：6-9 3吴东儒糖类的生物化学M北京：高等教育出版社1987 4张惟杰糖复合物生化研究技术M杭州：浙江大学出版社1999 5来鲁华，杨昱婷寡糖的构象分析J生物化学与生物物理进展199522(4)：290-294 6周鹏，谢明勇、傅博强多糖的结构研究J南昌大学学报200125(2)：197-203 7张惟杰复合多糖生化研究技术M上海：上海科学技术出版社1998 8董群、方积年寡糖及多糖甲基化方法的发展及现状天然产物研究与开发19957(2)：60-64 9Hakomori SA rapid permethylation of glycolipid,polysaccharide catalyzed by methylsulfinyl carbanion in dimethyl sulfoxideJBiochcm(Tokyo)19945：205-2ll 目 录中文摘要（关键字）1英文摘要（关键字）2前言31.1 多糖的研究进展31.2 多糖的提取、分离41.2.1 多糖的提取41.2.2 多糖的分离41.3.1 苦瓜及苦瓜多糖的概述41.3.1.1 苦瓜皂苷41.3.1.2 苦瓜蛋白及多肽51.3.1.3 苦瓜素51.3.1.4苦瓜多糖51.3.2 苦瓜多糖的研究进展51.3.2.1 苦瓜多糖的提取51.3.2.2 苦瓜多糖的分子修饰61.3.2.3 多糖分子修饰的展望与应用61.3.2.3.1 多糖分子修饰的展望61.3.2.3.2 多糖分子修饰的应用61.4 本课题的研究目的及意义7苦瓜多糖的提取分离与分子修饰82.1 实验材料与试剂82.1.1 实验材料82.1.2 实验试剂82.1.3 实验仪器82.2 实验方法92.2.1 苦瓜多糖的提取92.2.2 苦瓜多糖脱蛋白92.2.3 苦瓜多糖的硫酸化修饰92.2.4 硫酸化多糖体外清除羟自由基能力102.2.5 苦瓜多糖的乙酰化修饰102.3 结果与分析102.3.1 苦瓜多糖的提取结果102.3.2 苦瓜多糖的脱蛋白结果112.3.3 硫酸化苦瓜多糖112.3.4 不同苦瓜多糖对清除羟自由基结果122.3.5 不同乙酰化度的苦瓜多糖13结果与讨论14参考文献15致 谢17沈阳农业大学学士学位论文摘 要苦瓜是典型的要是同源植物，已有的药理实验研究表明苦瓜汁及其制剂具有显著的抗氧化作用，苦瓜中抗氧化活性成分是近年来苦瓜药理研究的热点之一。本实验对苦瓜多糖的提取、纯化及分子修饰进行了如下研究：1 采用水溶醇提法提取苦瓜粗多糖，酶-Sevage法脱除蛋白，此条件的多糖提取率为9.65%,蛋白脱除率为87.32%。2 通过对苦瓜多糖进行部分理化性质分析，结果表明：MCP为白色粉末，能溶于水，尤宜溶于热水，不溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂。具有典型的多糖反应，且不含淀粉、还原糖、酚类、氨基酸、蛋白质等杂质。3 硫酸化修饰是多糖修饰中常见的方法之一，其修饰结果是将硫酸基团加到多糖的糖基上，修饰后的多糖 称为硫酸多糖。结果表明硫酸化反应的最初阶段具备较高的反应效率，硫酸化多糖的结构对其活性影响很大。4 乙酰化修饰也是多糖修饰中常见的方法之一，其主要是修饰多糖分子支链，修饰后的多糖溶液得到较大的改善，一般来讲，修饰后带有乙酰基的多糖，溶解度增加，有利于活性挥发，而且其乙酰化度受到酸与水的比例影响。关键词： 苦瓜多糖；分离；抗氧化性；分子修饰2AbstractMomordica charantia L is the typical edible plants. The existing pharmacology experiments show that Momordica charantia juice and its preparation have significant hypoglycemic effect. And hypoglycemic activity is a hot topic of pharmacological research of Momordica charantia in cecent years. In this study, extraction, purification and hypoglycemic effect of Momordica charantia polysaccharides are researched as follows:1 The Momordica polysaccharides is extracted by the celluose enzyme method, and enzyme-Sevage method removal of protein . The yield is 9.65% and the protein removal rates is 87.32% at this condition.2 Through the analysis of physical and chemical properties, the results show that MCP a are white powder, soluble in water, especial l soluble in hot water, insoluble in-ethanol, acetone, ethyl acetate,butanol and other organic solvents. It has the typical polysaccharide resction, and no starch, reducing sugar, phenols, amino acids, protein and other impurities.3 Sulfated modification is one of common methods of polysaccharide modification, the modification result is the sulfate group to the sugar base on polysaccharide, polysaccharide is referred to as the modified version of sulfate polysaccharide. Results show that the initial phase sulfating reaction have higher reaction efficiency, structure of sulfated polysaccharide had a great influence on its activity.4 Polysaccharide molecules modified method are many, mainly divided into physical method, chemical method and biological method. In addition to the main chain of the polysaccharide to the decoration, can also be by modifying the branched chain. According to the change of molecular weight before and after modification, can put the polysaccharide modification is divided into two kinds, one kind is to direct modification of polysaccharide molecules, increase the function of the polysaccharide group and the molecular weight, increase its biological activity; Another kind is the degradation of polysaccharide modification, reduce the molecular weight of polysaccharides enhance its solubility in the aqueous phase, thus improve its activity.Key words: Momordica polysaccharide; separate; inoxidizability; molecular modification.前 言1.1 多糖的研究进展糖类是自然界中广泛分布的一类有机化合物，在生命活动过程中起着重要作用，是一切生命体维持生命活动所需能量的主要来源。它的主要存在形式有单糖、寡糖、多糖和结合糖。其中多糖是一类由10个以上单糖分子聚合而成的高分子化合物，广泛存在于动物、植物、微生物（细菌真菌）和藻类地衣中（刘洁等，2011）。多糖不仅为生物提供骨架结构和能量来源