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专题六|生物科技系统第1讲/某大丁程术园ss攻克薄骏点azzz3在本讲内容的复习中,应汪音以下几占(D用列表比较法理解限制酶.DN4A连接酶和载体的作用。(2)用实例分析法理解基因工程的原理与过程。(3)用列表比较法理解两个不同点:植物组织培养和动物细胞培养的不同、植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同。(4)用图解法理解单克隆抗体的制备过程。人厂潼州用许忠侠球n绍胆的全能性.经胥腹的济动伯网霆闯槛螂缨织赌养能门团坂物佛经胥汀交目加基的狄欣圆朋仨辜害幂鸯的骺谨径唧细醴产撇蜇室彗化生产将目的荣图导人罗体绍胆一团目的基图的查洪与鉴痢卒鳗墨一一_募酗2佩炳常浩循新细不形成个体转蒙国动牲的|加加作助观林秀挂佳玖国动物细胞挚的全能性莲四工秽牢刹余坤狄徙窍陈动物个体莲国诉疗罪园加加志政仄荣与园经胞腹的流动性团技探仁东医水誓暴步董物覆槎北学陂生葡法司Je6园焦驿中泓有的选白质基春喱薯口历口0莲辗硐一己克疮的卫淘巴绍胞和骨佩瘾绍肥渡居的箱运产国名一技体的舜掣考点一|基因工程与蛋白质工程以图表、材料、流程图等形式,综合考查基因工程与细胞工程的原理、操作过程及应用是高考常考形式。基因工程中限制酶和DNA连接酶的作用特点及在构建基因表达载体中的应用是难点,也是易错点,如课前诊晚1卷1联知识一简洁串记1.比较记忆基因工程的三种工具(填表)限制酶DNA连接酶载体作用切割_目的基因和载体拼接DNA片段,形成_重组DNA携带目的基因进入-受体细胞作用部位两个核昨酸之间的“磷酸二酯键R芸|0KX玲林莲余识别双链OEcofDNA连|能在宿主细胞内稳DNA分子的|蒲酶只能连接|定存在并大量复制荨用柿种特定核|_獒性本端|有一个至多个$息|“一一余希H刃|rmpva河g限制酶切割位点在特定位点|能连接_黏性末端|具有特殊的上切翰月标记基因门EcoRI限制|EcofDNA连接用咤呈洗|酶SmaI陋酶、工DNA连接l2门生物、动植物病毒等2.熠记基因工程的四个操作步骤(填空)(目的基因的获取途径:方法具体操作直接分离从自然界已有的物种中分离,如从_基因文库中获取邢加门丿化学合成已知核昨酸序列的_较小基因,直接利用DNA合成仪用化学方法合成,不需要模板逗转录法以RNA为模板,在_送转录酶作用下人工合成方法具体操作沥加门一PCR技术扩增原理:_DNA复制条件:模板DNA、_引物、脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶变性:90一95“C,DNA解旋+过|复性:55一60“C,区引物与单链DNA结合程|一延伸:70一75“C,在回热稳定的DNA耿合团酶作用下合成子链G)G)基因表达载体的构建一一重组质粒的构建:基因表达载体的组成:门目的基因二RNA职合酶识别和结合的部境园厂告动子:心乐吊元吴皇表达一位,驱动基因转录载体|厂终止子:RNA聚合酶脱离部位,终止转录|心八史鉴别受体细胞中是否导人含有标记基囚:目的基因的基图表达载体邝_构建过程:质粒DN&分子相种限制酶处理一个切口两个切口两个未端获得目的基因DNA连接酶重组DNA分子(重组质柯)(3)将目的基因导入受体细胞:植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法(用Ca“处理)受体细胞受精卵、体细胞受精卵原核细胞
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