步长脑心通调脂-抗炎症-保护内皮功能和抗动脉粥样硬化的系列研究,西安交通大学医学院第一附属医院 王东琦,动脉粥样硬化的进程,Modified from Pepine, CJ, Am J Card, 1998,急性心肌梗死,缺血性中风/ 短暂性脑缺血,不稳定心绞痛,泡沫 细胞,脂质 条纹,中间阶 段损伤,动脉粥样化,纤维 斑块,复合病变破裂,从十几岁开始,从30岁开始,从40岁开始,主要为脂肪积聚,平滑肌细胞和胶原,栓塞 出血,内皮功能不全,周围血管疾病,心脏猝死,稳定性心绞痛,无临床症状,极高危,Lipid lowering with statins UpToDate 13.3 Sep 1, 2005,调脂粑目标的目的是 AS-CHD-SCD,动脉粥样硬化的发病机制和危害性,动脉粥样硬化 脂代谢紊乱学说 调脂治疗-脂代谢平衡 LDL-oxLDL-foam cell,平滑肌移行,泡末细 胞形成,T细胞 激活,血小板 粘附聚集,白细胞 粘附侵入,动脉粥样硬化慢性炎症学说 1999 Ross R 创立 动物模型 衣原体感染,Ross R. Atherosclerosis is an inflammatory disease. N Engl J Med. 1999;340:115-126.,慢性 炎症引 起内皮 的损伤,高血压 糖尿病 高LDL/TG/TC，低HDL 吸烟 肥胖 少动 高龄 高半胱氨酸血症 高尿酸血症 促凝与抗凝紊乱 交感副交感紊乱 衣原体感染 各种病毒感染 遗传因素MEF2A,1、在各种慢性炎症和危险因素的 作用下，氧化修饰的低密度脂蛋白 （ox-LDLc）致使内皮损伤，内皮 功能障碍。,2、损伤的内皮细胞激活， 使单核细胞、血小板在血 管内膜表面聚集和粘附。,3、炎症性单核细胞迁移进入内皮下。 4、炎症细胞单核细胞和巨噬细胞 激活，刺激平滑肌细胞、产生基质金 属蛋白酶（MMP）。,Dynamic Balance of atherosclerosis Eric J.Topol: Textbook of Cardiovascular Medicine 2003; Atherosclerosis P.5-11,5、平滑肌细胞迁移进入内皮下组织,形成 新的粥样斑块的纤维帽。斑块增大,6、平滑肌细胞迁移进入内皮下组织和粥样 斑块的纤维帽。 6-7、内皮细胞迁移并且在各种保护因素的 作用下形成纤维帽。,8-9、纤维帽在各种促炎症因素下破裂或损害 ，表面血小板聚集，形成血栓，导致急生冠 脉事件。纤维帽破裂或损伤后，血栓形成， 在各种保护因素的作用下，在血栓的表面形 成新的纤维帽，使急性冠脉事件，得到新的 平衡。,Dynamic Balance of atherosclerosis: Eric J.Topol: Textbook of Cardiovascular Medicine 2003; Atherosclerosis P.5-11,步长脑心通,中医药是中华文明的宝库，应当在动脉粥样硬化的防治中有更大的贡献。 脑心通是中药复方制剂，由黄芪、丹参、川芎、地龙、水蛭等十六味药物制成，具有益气活血、化瘀通脉的功效。现代药理学证明，该药的主要成分地龙、水蛭有抗血栓形成的作用。川芎有扩管、抑制炎症反应的作用。丹参有降脂、抗炎等多种作用步长脑心通可能在多个环节、广泛领域具有抗动脉粥样硬化的作用。 我们借鉴西药研究的手段和经验研究步长脑心通抗动脉粥样硬化的作用原理，试图从西药的角度论证中医药理论，为新药研发开拓新的途径。,动脉粥样硬化是炎性细胞（主要是单核巨噬细胞）吞噬“入侵”动脉壁的“病原性”脂蛋白即oxLDL的慢性炎症反应过程。巨噬细胞表面清道夫受体（SR）尤其是SR-A和CD36 均介导巨噬细胞吞噬oxLDL。其表达量与泡沫细胞的多少及AS的发展进程有密切关系。 本研究显示阿托法伐他汀明显抑制SR-A和CD36的表达，较对照组分别降低了63.3%和70.5%。脑心通则轻度抑制两者表达，并呈剂量依赖性，1g/L脑心通使CD36及SR-A表达分别降低22.3%和25%，大约是阿托伐他汀的1/3。,Effects of Naoxintong and Atorvastatin on on SR-A expression,P0.05 vs. control；P0.05 vs. each group of NXT；P0.05 vs. other groups of NXT,在AS慢性炎症反应过程中， IL-6和TNF-是两个传统的细胞炎症因子，主要由单核巨噬细胞分泌。 脑心通抑制IL-6和TNF-分泌，最大抑制效果分别为1mol/L阿托法他汀的32%和33.9%。,P0.01vs. control；P0.01vs .each group of Naoxintong；P0.01vs. other groups of Naoxintong,Influences of Naoxintong and Atorvastatin on cell inflammatory reaction promoted by oxLDL,VSMC增殖是AS发生、发展过程中最重要的环节之一。ox-LDL通过诱发一系列与细胞增殖有关的反应，包括增加原癌基因的表达，刺激白细胞介素-1及血小板源性生长因子的产生等，促进VSMC的增殖。 本研究结果显示10mg/L的ox-LDL可刺激VSMC增殖，脑心通具有抑制ox-LDL诱导VSMC增殖的作用。,不同药物对VSMC增殖的影响,）,与ox-LDL组相比*P0.01，*P0.05,血管内皮损伤及功能障碍的特征表现为由内皮细胞产生的NO水平降低及所介导的内皮依赖性血管舒张功能受损，同时伴有ET-1含量的增加。 脑心通不但能够促进正常状态下的血管内皮细胞NO的表达与释放，而且能够促进损伤状态下的内皮细胞NO表达与释放，在高剂量组尤为明显，呈现出剂量依赖性的趋势和效应。说明脑心通能够促进血管内皮细胞的NO的表达释放而发挥保护性作用，,脑心通对ox-LDL损伤HUVEC前NO分泌量的影响,* P0.01 vs对照组比较；* P0.05 vs对照组比较；a P0.01 vs其余脑心通组比较.,脑心通对ox-LDL损伤HUVEC后NO分泌量的影响,* P0.01 vs ox-LDL组比较；* P0.05 vs ox-LDL组比较；b P0.05 vs其余脑心通组比较,各组动物血脂水平的比较,a 为p0.05，b为p0.01，与8周时相比较;c为p0.05,d为p0,01,与高脂组相比较;e为p0.05,f为p0,01,与辛伐他汀组相比较,图C,图B,图A,肉眼观察可见高脂组腹主动脉内膜苏丹染色显示阳性区广泛,有明显粥样斑块形成, 脂质斑块增厚卷曲，弥漫至整个腹主动脉管壁。脑心通治组可见斑块成颗粒状，较薄，面积虽多辛伐他汀组，但显著少于高脂组。,兔腹主动脉苏丹染色（1） A为高脂组，B为脑心通组，C为辛伐他汀组。 红色区为粥样脂纹和斑块。,图A,图B,图C,40倍,40倍,40倍,可见高脂组粥样斑块形成，内皮细胞消失，粥样斑块明显增厚，大量无定形坏死物聚集，并可见灶状泡沫细胞及炎细胞浸润，病变累及肌壁浅肌层（图A）。脑心通组斑块厚度较辛伐他汀组增厚，但明显较高脂组薄，由少量泡沫细胞聚集，肌层及外膜无明显异常（图B）。辛伐他汀组斑块最少。,光镜Massons 三色染色（图-3）可见高脂组胶原细胞分布不均，有部分溶解（图A），脑心通组胶原细胞分布较为均匀，几乎没有溶解(图B)，辛伐他汀组胶原细胞分布均匀，位于内膜表面，没有溶解（图C）。,兔腹主动脉切片Massons 三色染色（1040） A为高脂组，B为脑心通组，C为辛伐他汀组。,透射电镜高脂组可见有大量的泡沫细胞形成，胶原纤维排列紊乱，有溶解坏死（图A），脑心通组泡沫细胞较少，胶原纤维排列基本正常（图B）,辛伐他汀组几乎没有泡沫细胞，胶原纤维排列纹理清楚（图C）。,兔腹主动脉透射电镜 A为高脂组，B为脑心通组，C为辛伐他汀组。,谢谢!,