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血清锌含量测定,火焰原子吸收分光光度法,2012年3月8日,实验目的,掌握火焰原子吸收分光光度法测定血清锌含量的基本原理及操作方法,用以评价人体健康状况。,实验原理(1),原子吸收光谱法是基于气态原子外层的电子对共振线的吸收。气态的基态原子数与物质的含量成正比,可进行定量分析。利用火焰的热能使样品转化为气态基态原子的方法称为火焰原子吸收光谱法。,实验原理(2),原子吸收分光光度计的工作原理:由待测元素的空心阴极灯发射出一定强度和一定波长的特征谱线的光,当它通过含待测元素基态原子蒸气的火焰时,其中部分特征谱线的光被吸收,而未被吸收的光经单色器照射到光电检测器上被检测,根据该特征谱线光强度被吸收的程度,即可测得试样中待测元素的含量。,样本处理及标准曲线的制作(1),样品处理: 0.5ml血浆+2ml 0.16M HNO3 ,混合摇匀备用 标准曲线的制作: (1)母液的配置: 标准锌配置浓度为1000ug/ml,取1ml+混合液9ml,稀释10倍得到100ug/ml工作液,样本处理及标准曲线的制作(2),(2)标准曲线的配置:,仪器条件,1. 波长:213.9nm,进行谱线搜索最佳波长 2. 狭缝宽度:1nm 3. 灯电流:5mA 4. 空气流量:15L/min, 乙炔流量: 2L/min,测定过程,1. 按仪器软件要求设定各项条件 2. 实施点火操作,待火焰稳定后分析 3. 按标准液浓度由低到高进行测定,仪器会直接给出标准曲线以及回归方程和相关系数 4. 样品测定:仪器直接给出锌元素含量,乘以5倍后为实际样品中的含量,注意事项,1. 试剂纯度要求优级纯 2. 用品清洁 3. 易燃气体注意安全 4. 正常参考值:0.75-1.50ug/ml 检出限:火焰0.001ug/ml,实验讨论,1.结合实验结果分析血清锌是否可以作为机体锌的营养状况的良好指标?为什么? 2.对机体锌的营养学评价应该包括哪些方面?,
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