制备和应用固定化酶（2012上海）9酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有A热稳定性 B催化高效性 C催化特异性 D可反复使用性【答案】D【解析】固定化酶指通过物理或化学的方法，将水溶性酶与非水溶性载体结合，既能与反应物接触又能与产物分离，与直接使用酶相比，除催化效率高、特异性强外，还可反复使用酶；酶的热稳定性一般都不强。故D正确。【试题点评】本题考查了固定化酶与直接使用酶的区别及酶的特性，重点在于理解两者的区别，找出固定化酶依据的基本原理，难度中等。（2012江苏）17.下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是（ ）A.从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小B. 作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药C. 尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2 和杂菌【答案】C【解析】化学结合法可能影响酶的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影响酶的分子结构，A正确；消化酶在消化道内起作用，B正确；尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开，而不能再次使用，C错；固定化酵母细胞在凝胶珠中，用无菌水冲洗可洗去CaCl2和表面的杂菌，D正确【试题点评】本题考查酶的应用，涉及固定化酶中的原理、操作和应用等知识。属于了解层次。（2011上海）38通过酶工程可将联苯水解酶用于生产实践。酶工程通常包括酶的生产、酶的固定化和酶的应用等方面。酶固定化的好处是。【答案】酶的分离纯化 便于重复利用能连续进行反应（2010山东）34. 【生物生物技术实践】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_、_方法从油料作物中提取。（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供_，培养基灭菌采用的最适方法是_法。（3）测定培养液中微生物数量，可选用_法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测_，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用_技术使脂肪酶能够重复使用。（4）若需克隆脂肪酶基因，可利用耐热DNA聚合酶催化的_技术。【答案】（1） 压榨；萃取（注：两空顺序无先后）（2）碳源 高压蒸汽灭菌（3）显微镜直接计数 酶活性（或酶活力） 固定化酶（或固定化细胞）（4）PCR（或多聚链式反应，聚合酶链式反应）【命题立意】本题综合考查多种生物技术【解题思路】（1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。（2）植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源。培养基适合用高压蒸汽灭菌发进行灭菌。（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶。（4）利用PCR技术可以扩增基因。（2010江苏）25右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图下列叙述正确的是 A刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液 B图1中X溶液为溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠 C图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触 D图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中【答案】BCD【解析】本题考查了固定化细胞技术的操作过程。熔化的海藻酸钠应冷却后与活化的酵母细胞混合，A项错误；图1中氯化钙溶液可使海藻酸钠形成凝胶珠，B项正确；图2中要进行搅拌以使培养液与细胞充分接触，C项正确；图1中制备的凝胶珠要以过洗涤再移到图2装置中，D项正确。（2009江苏）3下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是 A固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧C利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件 D利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物【答案】A(2007山东)34（8分）【生物生物技术实践】乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：发酵预处理、水解玉米秸杆糖液酒精（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用 酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？ （多选）A酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌C制作酸奶的乳酸菌 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为 （按功能分），培养基中的碳源为 。（4）从生物体提取出的酶首先要检测 ，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用 技术。（5）发酵阶段需要的菌种是 ，在产生酒精时要控制的必要条件是 。【答案】（8分）（1）纤维素（酶） （2）B、E （3）选择培养基 纤维素（4）酶的活性（活力） 固定化细胞（固定化酶）（5）酵母菌 无氧（密闭、密封）- 3 -用心 爱心 专心