.,课题2,多聚酶链式反应（PCR)扩增DNA片段,.,温故知新1,组成DNA分子的基本单位是什么?这些基本单位是如何连接成DNA分子的?DNA分子结构有什么特点？,.,脱氧核苷酸,脱氧核糖,含氮碱基,嘌呤,嘧啶,腺嘌呤（A）,鸟嘌呤（G）,胞嘧啶（C）,胸腺嘧啶（T）,.,.,.,脱氧核苷酸链结构简图,磷酸二酯键,.,5,5,3,3,.,DNA分子的复制需要哪些条件？,DNA分子的复制过程是怎样的？,温故知新2,.,DNA母链：提供复制的模板解旋酶：打开DNA双链4种脱氧核苷酸：合成子链的原料DNA聚合酶：催化合成DNA子链ATP：为复制过程提供能量引物：使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸,DNA复制的条件,.,.,一、PCR原理：,PCR（多聚酶链式反应）技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。,.,DNA母链：提供复制的模板解旋酶：打开DNA双链4种脱氧核苷酸：合成子链的原料DNA聚合酶：催化合成DNA子链ATP：为复制过程提供能量引物：使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸,PCR反应的条件,80100,耐热的DNA聚合酶,缓冲溶液：维持反应的pH值不变,.,二、PCR反应的过程,1、变性：,温度上升到90以上时,双链DNA解聚成为单链。,2、复性（退火）：,温度下降到50左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。,3、延伸：,温度上升到72左右,溶液中的4种脱氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对的原则合成新的DNA链。,.,