血清中谷丙转氨酶的测定,实验五,（2,4-二硝基苯肼法）,一、实验目的,掌握血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的基本原理。了解血清丙氨酸氨基转移酶的测定方法及临床意义。,510nm,光吸收法测定,相对血清ALT活力,二、实验原理,丙氨酸氨基转移酶(ALT)催化丙氨酸与-酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼在酸性溶液中反应形成相应的2,4-二硝基苯腙，呈黄色，后者在碱性条件下呈红棕色。,三、实验器材,材料：人血清试剂：谷丙转氨酶测定试剂盒用具：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架，恒温水浴锅,（1）取3支试管，按下表加入试剂:,四、实验步骤,冷却至室温后，510nm处比色,比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品管光密度值。,（2）计算：依据朗伯-比尔定律：A=KLC标准管谷丙转氨酶活力：57U/L,样品管谷丙转氨酶活力（U/L）,样品管光密度值标准管光密度值,57,参考值,谷丙转氨酶血清参考值：050U/L,正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液应占比色皿的2/3。每次测定时都需用试剂空白溶液调零，不能用蒸馏水代替微量移液枪的正确使用,注意事项,思考,1、血清谷丙转氨酶测定的临床意义？,