植物生理学实验,18学时，1学分。 第3周开始安排5个实验，每个实验15分，合计155=75（平时实验及实验报告成绩），期末考试成绩25分。,植物生理学实验安排,一. 实验题目二. 实验目的及原理三. 实验步骤四. 结果与分析五. 注意事项(自己体会）六. 思考题,植物生理学实验报告 (独立完成，交学委),在老师指导下，合理、安全地使用实验仪器； 实验前，分组查看器皿； 实验后，彻底清洗器皿，按实验前摆放归位； 一旦损坏物品，及时登记； 严禁将任何器皿插入洗液瓶中； 每次实验结束后，由班长安排3-4位同学清洁打扫。,注意事项,一) 植物组织含水量的测定,1. 实验目的,1)了解植物组织含水量与组织水势的关系； 2)比较植物组织某种成分单位干重水平上的含量。,2. 实验原理,水遇热蒸发为水蒸汽，可以用烘干法来测定植物组 织中的含水量。 植物组织含水量的表示方法，常以鲜重或干重%表 示，有时也以相对含水量%表示。 植物组织含水量（%） = （鲜重-干重）/鲜重 100,材料：小白菜（新鲜叶片，高温贮藏萎蔫叶片）。 仪器：打孔器、橡胶垫、称样铝盒、 烘箱、搪瓷盆、棉布手套、天平，等。,3. 材料、仪器设备与试剂,1) 铝盒干燥、标记、称重：A1、A2， B1、B2;（姓名） 2) 打取叶圆片：新鲜叶和萎蔫叶各打约60片叶圆片（注意避开大的叶脉），放至铝盒中，混合均匀。每个铝盒各放30片，2次重复； 3) 称鲜重: 铝盒+叶圆片； 4) 烘干：105，2h左右。（打开盖子，盖子放各自铝盒下面）； 5) 称干重：取出室温，称重（铝盒+叶圆片）。,4. 实验步骤,含水量（%） =（W1-W2）/ (W1-W0）100,5. 结果与分析,二) 植物组织水势的测定,1. 实验目的,1) 因陋就简测定植物组织水势； 2) 与含水量进行比较，分析二者关系。,将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中， 植物组织的水势溶液的渗透势，组织吸水而使溶液浓度变大； 植物组织的水势溶液的渗透势，组织水分外流而使溶液浓度变小； 植物组织的水势=溶液的渗透势，外部溶液浓度不变。 当某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，该浓度溶液为此植物组织的等渗溶液，植物组织地水势等于该溶液的渗透势。,2. 实验原理,在渗透系统中，水总是从水势高处流向水势低处。,用溶液的渗透势()代表植物水势(w)。 wiCRT （单位：兆帕，MPa） i：为解离系数（蔗糖=1.00；CaCl2=2.60；NaCl=1.80） C：为等渗浓度（mol/L) R：为气体常数0.008314 L MPa /（mol K） T：为绝对温度（273+摄氏温度）,材料：小白菜（新鲜叶组和萎蔫叶组）； 仪器设备：注射针头、打孔器、试管，等； 试剂：1 M 蔗糖，纯水，甲烯蓝粉。,3. 材料、仪器设备与试剂,1）打取叶圆片,4. 实验步骤,新鲜叶和萎蔫叶各打约60片叶圆片（注意避开大的叶脉），放至铝盒中，混合均匀。,2）配制蔗糖溶液梯度,把试管分成两组，每组大试管和小试管各6支；在每一组中，用6支大试管分别配制10ml不同浓度的蔗糖溶液(mol/L) ： 0.05、0.1、0.2、0.3 、0.4、0.5 ，（用浓度为1mol/L的蔗糖溶液稀释）；然后，分别取2ml放入对应的小试管中。（注意：试管刻度不准确，用移液管来量取。）,3） 浸泡 每支小试管中分别放入10个叶圆片，充分浸泡30分钟，其间摇晃几次。 4）染色 浸泡完毕后，向小试管中投入尽量少的甲烯蓝，染色。,5）液流操作与观察,用针头吸取小试管中的溶液少许，插入对应浓度大试管溶液的中部，小心的放出少量液流，观察蓝色液流的升降动向，并记录。 蓝色液流上升：浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小（即植物组织失水），表明叶片组织的水势高于该蔗糖溶液的渗透势； 蓝色液流下降：变大； 蓝色液流静止不动：等渗浓度。,轻捏吸管,放入刻度试管,深入溶液中部,挤出小液滴,取出吸管观 察液滴升降,实验步骤,1）打取叶圆片： 新鲜叶和萎蔫叶各打约60片叶圆片（注意避开大的叶脉），放至铝盒中，混合均匀。 2）配制蔗糖溶液梯度：把试管分成两组，每组大试管和小试管各6支；在每一组中，用6支大试管分别配制10ml不同浓度的蔗糖溶液(mol/L) ：0.05、0.1、0.2、0.3 、0.4、0.5 ；然后，分别取2ml放入对应的小试管中。 3）浸泡： 每支小试管中分别放入10个叶圆片，充分浸泡30分钟，其间摇晃几次。 4）染色：浸泡完毕后，向小试管中投入尽量少的甲烯蓝，染色。 5）液流操作与观察：用针头吸取小试管中的溶液少许，插入对应浓度大试管的中部，小心的放出少量液流，观察蓝色液流的升降动向，并记录。,5. 结果分析,w -iCRT （单位：兆帕，MPa）,1. 分别计算新鲜和萎焉叶片的含水量，并进行比较分析。 2. 记录不同浓度溶液中的液流方向。 3. 计算两组叶片的水势，并结合其含水量比较分析。,C = 0.2mol/L,C (0.2+0.3)/2,严重萎蔫叶片的 C 可能 0.5,幼嫩新鲜叶片的 C 可能 0.05,错误结果,1) 称鲜重前确定铝盒是否干燥干净； 2) 拭干叶表水分和泥渍； 3) 避开大的叶脉打叶圆片,混合均匀； 4) 移液管取溶液和纯水； 5) 配制的蔗糖溶液要上下颠倒混匀； 6) 润洗移液管和针头（放回原液）； 7) 叶圆片浸入液面下； 8) 浸泡30分钟后再加甲烯蓝染色； 9) 尽量少加甲烯蓝； 10)轻压胶管使针筒少量吸入染色溶液； 11)滴入后，停止挤压或放松胶管。,6. 注意事项,增加或减少蔗糖溶液中叶圆片数目是否会影响水势测定结果, 为什么?,7. 思考题,1. 实验材料准备不足，影响了实验完成。 2. 怀疑铝盒在烘干前有水分，为何不称一下烘干后的铝盒重量呢？可以换算出来正确的鲜重和干重。 3. 试管的刻度不准确，应该用移液管来统一量取。 4. 结合含水量和水势进行比较分析。,存在问题：,