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植物叶片DNA提取方案CTAB 法基本步骤如下:取鲜样02 g 左右置研钵中,加2不溶性PVP、液氮研磨至粉末状,转入2 mL 离心管;加入07 mL 65预热的CTAB 提取液,混匀,65水浴30 min; 加入等体积酚 氯仿 异戊醇(25241),混匀,室温10 000 rmin离心10 min;取上清液,重复步骤12 次;取上清液,加12 体积的5 molL NaCl,加23体积的异丙醇,置20冰箱2 h,沉淀DNA;4、10 000 r min 离心10min;弃上清,用70乙醇溶液洗沉淀2 次,风干,用50 L TE溶解; 加入无DNase 的RNase 至终浓度为10 gL,37保温30 min,20保存备用。(8)加入终浓度5099ml的RNase,37保温1h;(9)用等体积的氯仿异戊醇抽提1次,12000rpm,离心10min;(10)上清液中加入O1倍体积的Nacl,2倍体积的无水乙醇,冰箱中-20放置05h,12000rpm,离心10min,去上清液;(11)用70的无水乙醇洗涤沉淀2次,自然干燥后溶于50plTE;)2%CTAB提取液:100 mmolL TrisHCl(pH8.0),1.4 molL NaCl,20 gL CTAB,20 mmolL EDTA,1巯基乙醇(用前加)。
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