1,第十章,抗生素类药物的分析,2,抗生素    是指由微生物所产生、极微量即具有选择性地抑制或杀灭其他微生物的一类有机化合物。,一、抗生素药物的特点,抗生素    在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。,第一节    概述,1.  生物合成（发酵）2.  化学合成或半合成,3,控制抗生素质量的复杂性,*活性基团多不稳定,*发酵条件不易控制,生产工艺复杂,稳定性差,发酵液中含有的杂质各种异构体、降解产物、无机盐、脂肪、蛋白质、热原、毒性物质,*发酵过程易受污染,*降解后    疗效                  失效                  毒副作用,4,二、抗生素药物的质量分析方法,（一）鉴别,1.  理化法,2.  生物学法,（1）化学法（2）仪器法,5,（二）检查,常增加“安全性检查”,【检查】异常毒性                热原                细菌内毒素                降压物质                无菌,6,例    盐酸四环素    ChP（2010）       【检查】                     酸度                     溶液的澄清度                     有关物质             干燥失重                     异常毒性             光吸收                     杂质吸收度         热原                     降压物质             无菌,7,（三）含量测定,1.  生物学方法,以生物学方法或生化方法测定生理活性物质，并按效价单位（IU）计算的测定方法,抗生素微生物检定法,8,抗生素微生物检定法,以抗生素抑制微生物生长或杀死微生物的能力作为衡量效价的标准,管碟琼脂扩散法比浊法,ChP,9,管碟琼脂扩散法        本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。,10,管碟琼脂扩散法,11,培养16小时后,12,微生物检定法,优点  *与临床效果一致  *灵敏度高  *干扰物质少  *可用于未知药物,缺点  *操作繁琐  *耗时  *准确度、精    密度差,13,ChP（2010）,附录  A    抗生素微生物检定法,培养基及其制备方法,检定试验设计,检定法,两性霉素B、克拉霉素、杆菌肽、罗红霉素、硫酸链霉素、硫酸庆大霉素、磺苄西林钠、红霉素、盐酸去甲万古霉素等原料及其制剂,14,以理化方法测定主药含量，按有效物质的质量计算的测定方法,优点*准确度高*简便快速,缺点*不一定代表生物效价*易受杂质干扰*仅用于己知药物,2.  理化方法,15,ChP（2010）【含量测定】,青霉素类         滴定法                         UV                         HPLC法                         微生物检定法,头孢菌素类     HPLC法,汞量法碘量法,16,细菌        枯草菌真菌        青霉素类、头孢类、                                                  灰黄霉素放线菌    链霉素,广谱            青霉素、头孢类G+                       红霉素（金葡菌）   G-                        卡那霉素、庆大霉素绿脓杆菌    阿莫西林,三、抗生素的分类,4.  按化学结构和性质分类,3.  按作用机制分类,2.  按抗菌谱分类,1.  按产生菌分类,抑制转肽酶交联方式    青霉素抑制蛋白质合成过程    红霉素影响细胞膜通透性        多粘菌素,内酰胺类        多烯大环类氨基糖苷类            多肽类四环素类                苯烃胺类大环内酯类            蒽环类等,17,第二节    内酰胺类抗生素,青霉素类青霉素钠（钾）氨苄西林（钠）阿莫西林（钠）普鲁卡因青霉素,头孢菌素类头孢氨苄头孢羟氨苄头孢拉啶头孢噻吩钠,18,青霉素类,头孢菌素类,氢化噻唑环,氢化噻嗪环,一、结构与性质,（一）结构,19,青霉素类,酰胺侧链,6-氨基青霉烷酸（6APA）,酸性,不稳定,20,青霉素G（苄青霉素）,（K）,（Na ）,Benzylpenicillin potassium青霉素钾,Benzylpenicillin sodium青霉素钠,Benzylpenicillin procaine普鲁卡因青霉素,（普鲁卡因）,21,氨苄西林（氨苄青霉素）,ampicillin,22,阿莫西林（羟氨苄青霉素）,amoxicillin,23,普鲁卡因青霉素,procaine benzylpenicillin,24,磺苄西林钠,sulbenicillin sodium,25,7-氨基头孢菌烷酸（7ACA）,头孢菌素类,酰胺侧链,酸性,不稳定,26,头孢氨苄,cefalexin,27,头孢羟氨苄,cefadroxil,28,头孢拉定,cefradine,29,头孢噻吩钠,cefalotin,30,（二）性质,*与碱金属成盐     易溶于水,pKa=2.52.8,1.  羧基,酸性,*与有机碱成盐     难溶于水,31,K+,青霉素,溶解性,32,2.  手性C,（5%头孢唑啉钠溶液               1824）,旋光性,*,*,*,*,*,33,3.  共轭体系,UV,34,青霉素钠UV7-20,35,36,4.  内酰胺环,水溶液        不稳定、易开环,干燥纯净    较稳定,易降解失效,37,温度,氧化剂,（头孢噻吩钠水溶液2524h失活8%）,（青霉素钠水溶液3024h失活56%）,Cu2+、Pb2+、Hg2+、Ag+,38,青霉素的降解反应,39,温度对青霉素钠稳定性的影响,pH2，30,40,二、鉴别反应,（一）呈色反应,1.  羟肟酸铁反应,OH-,41,OH-,红、棕、褐,42,2.  类似肽键的反应,43,*双缩脲反应,紫色,44,例    阿莫西林（2）         氨苄西林钠        ChP（2010）       【鉴别】（1）取本品约10mg，加水6ml溶         解后，加碱性酒石酸铜试液0.5ml，即显紫         色。,ChP（2010）    HPLC，IR，Na+,45,*茚三酮反应,46,例    阿莫西林    ChP（2010）       【鉴别】（4）TLC法    对照品法         显色剂    0.3%茚三酮的乙醇溶液                       （90加热15分钟）,47,3.  其他呈色反应,酚羟基,*与重氮苯磺酸盐反应,头孢哌酮,48,49,例    头孢哌酮    ChP（2010）      【鉴别】   取本品约10mg，加水20ml使溶        解，取4ml，加1%碳酸钠溶液与重氮苯磺        酸试液各1ml，摇匀，溶液显橙黄色。,ChP（2010）    羟肟酸铁，HPLC,50,1.  K+、Na+的火焰反应,附录,+ 0.1%四苯硼钠 + HAc白,+ 醋酸氧铀锌黄,（三）各种盐的反应,51,例    青霉素钠    ChP（2010）       【鉴别】（4）本品显钠盐的火焰反应       （附录  ）。,例    青霉素钾    ChP（2010）       【鉴别】（3）本品显钾盐的火焰反应       （附录  ）。,52,2.  重氮化-偶合反应,芳香第一胺类反应,芳伯氨基,53,普鲁卡因青霉素,普鲁卡因,54,HCl,重氮盐,偶氮化合物,55,例    普鲁卡因青霉素    ChP（2010）       【鉴别】（3）本品显芳香第一胺类的鉴别         反应（附录）,56,（三）光谱法,1.  IR,药品红外光谱集,对照图谱对照法,USP       对照品对照法,57,例    青霉素钠     ChP（2010）      【鉴别】（3）本品的红外光吸收图谱应与        对照图谱（光谱集222图）一致。,58,青霉素钠,59,阿莫西林,60,2.  UV,61,青霉素V钾       268、274      1.201.25,头孢唑林钠      272            264292,苯唑西林钠      339            A=0.6,头孢氨苄              262            220245,头孢噻肟钠      262            400440,62,Cu2+,63,64,三、特殊杂质的检查,*高分子聚合物,*吸收度杂质,*有关物质,*异构体,65,头孢他啶        头孢他啶聚合物,头孢曲松钠    头孢曲松聚合物,头孢哌酮钠    头孢哌酮聚合物,（葡聚糖凝胶柱色谱法）,66,67,例    头孢氨苄中有关物质的检查,其他杂质（高低浓度对比法）,7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(对照品法),-苯甘氨酸（对照品法）,1%,1%,1%,68,例    青霉素钠的吸收度检查,A264nm    0.80 0.88（1.80mg/ml）A280nm     0.10,69,95：139.  属于-内酰胺类的抗生素药                 物有                  A.  青霉素                    B.  红霉素                  C.  头孢菌素                  D.  庆大霉素                    E.  四环素,70,99：89.  下列哪个药物会发生羟肟酸               铁反应                 A.  青霉素                 B.  庆大霉素                     C.  红霉素                 D.  链霉素                       E.  维生素C,71,例1.  能发生重氮化一偶合反应的抗         生素类药物是           A.  青毒素                   B.  庆大霉素    C.  苄星青霉素        D.  盐酸四环素    E.  普鲁卡因青霉素,72,例2.  可与茚三酮产生颜色反应的药         物为   A.  维生素E   B.  醋酸液尼松   C.  磺胺嘧啶   D.  司可巴比妥   E.  氨苄西林,73,第三节    氨基糖苷类抗生素,一、结构与性质,（一）结构,74,链霉素,streptomycin,75,（二）性质,（-NH2）,1.  碱性        可与酸成盐,溶解性    水溶性,（多羟基、氨基）,76,链霉素,77,2.  旋光性    手性C,3.  稳定性,链霉素pH57.5稳定,OH-,78,链霉素,79,链霉素,巴龙霉素、庆大霉素、奈替米星    无UV特征,链霉素          max  230nm,