实验性急性肾功能不全 武汉大学基础医学院 病生教研室,急 性 肾 功 能 不 全 （Acute Renal insufficiency, ARI）,各种病因引起双侧肾脏在短期内泌尿功能急剧降低，导致机体内环境出现严重紊乱的病理生理过程。,了解实验性肾功能不全动物模型复制方法 观察升汞中毒家兔的一般状态，尿的变化、血浆尿素氮水平以及肾脏大体形态改变 根据实验指标，分析讨论急性肾功能不全的病理生理变化,实 验 目 的,实验动物及模型复制的原理,原 理 肾毒物HgCl2 引起家兔肾小管变性、坏死，导致严重的肾脏功能不全。,观 察 指 标,与对照家兔做比较：,实 验 步 骤,1. 复制模型（已完成）,实验组 HgCl2 肌肉注射1.2ml/Kg 24h 对照组 NaCl 肌肉注射1.2ml/Kg 24h,(1) 称重麻醉: 腹腔注射20%乌拉坦，5ml/kg,2. 手术及操作,部位：左下腹近腹中线1cm 方法：与腹壁呈45进针，进入腹腔有落空感，回抽无血、肠内容物，缓慢推注 效果判断：肌肉松弛，自然卧倒，眼睑反射迟钝，钳夹皮肤无反应等,（2）固定备皮：,固定：,备皮： 颈部正中：甲状软骨- 胸骨上缘 下腹正中：耻骨联合上15cm,（3）膀胱插管收集尿液,下腹部切口，分离组织，暴露膀胱 注射器抽膀胱内尿3ml(备用) 荷包缝合（膀胱无血管区） 膀胱插管,C,（4）左颈总动脉插管,分离 抗凝 耳缘静脉 肝素(1ml/kg) 插管,左颈总动脉插管,3.远心端，45剪口，约为管径的1/2,4.朝心脏方向插管 23cm并固定,颈 总 动 脉,近心端,心脏,远心端,头部,（5）尿液镜检，计录管型数和细胞数（10个视野）,管型 （低倍镜）,细胞 （高倍镜）,（6）尿蛋白定性检查,取尿液3ml于试管中 酒精灯上加热至沸腾 若混浊，加入5%醋酸3-5滴 再煮沸 尿变清，尿内有尿酸盐 混浊加重，尿中有蛋白,（6）尿蛋白定性检查,（7）血浆尿素氮测定,原理：血液中尿素在强酸条件下与二乙酰-肟和氨硫脲（DAM-TSC）共煮沸，生成红色复合物，颜色深浅与尿素氮含量成正比例关系，用分光光度计测定OD值，可计算出尿素氮含量。,方法 每组自颈总动脉取血10ml到离心管,离心,3000rpm 10min,吸出上层血浆置于干净试管中备用； 按下表加入试剂：, 各管加好混匀后置沸水锅中煮沸10min，流水中冷却3min后测OD值（520nm波长）,先以空白管调零，再读取测定管值； 计算：,血浆尿素氮(mg%)=,（8）形态学观察,将家兔处死（耳缘静脉注入空气510ml）,取出肾脏； 观察并比较两组家兔肾脏的大体形态，如体积大小，表面色泽，皮质条纹及色泽等。,实 验 流 程 概 括,1. 复制模型（已完成）,(1) 称重麻醉: 腹腔注射20%乌拉坦，5ml/kg,2. 手术操作及检测指标,(2) 固定备皮：,(3) 膀胱插管收集尿液,(4) 左颈总动脉插管,(5) 尿液镜检，计录管型数和细胞数（ 10个视野）,(6) 尿蛋白定性检查,(7) 血浆尿素氮测定,实验报告的书写,实验目的 实验步骤（简明扼要） 实验结果,分析讨论,分 析 讨 论,根据本实验结果，分析升汞引起急性肾功能衰竭的 机制 结合本实验结果，分析各种现象产生的机理,