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实验性急性肾功能不全 武汉大学基础医学院 病生教研室,急 性 肾 功 能 不 全 (Acute Renal insufficiency, ARI),各种病因引起双侧肾脏在短期内泌尿功能急剧降低,导致机体内环境出现严重紊乱的病理生理过程。,了解实验性肾功能不全动物模型复制方法 观察升汞中毒家兔的一般状态,尿的变化、血浆尿素氮水平以及肾脏大体形态改变 根据实验指标,分析讨论急性肾功能不全的病理生理变化,实 验 目 的,实验动物及模型复制的原理,原 理 肾毒物HgCl2 引起家兔肾小管变性、坏死,导致严重的肾脏功能不全。,观 察 指 标,与对照家兔做比较:,实 验 步 骤,1. 复制模型(已完成),实验组 HgCl2 肌肉注射1.2ml/Kg 24h 对照组 NaCl 肌肉注射1.2ml/Kg 24h,(1) 称重麻醉: 腹腔注射20%乌拉坦,5ml/kg,2. 手术及操作,部位:左下腹近腹中线1cm 方法:与腹壁呈45进针,进入腹腔有落空感,回抽无血、肠内容物,缓慢推注 效果判断:肌肉松弛,自然卧倒,眼睑反射迟钝,钳夹皮肤无反应等,(2)固定备皮:,固定:,备皮: 颈部正中:甲状软骨- 胸骨上缘 下腹正中:耻骨联合上15cm,(3)膀胱插管收集尿液,下腹部切口,分离组织,暴露膀胱 注射器抽膀胱内尿3ml(备用) 荷包缝合(膀胱无血管区) 膀胱插管,C,(4)左颈总动脉插管,分离 抗凝 耳缘静脉 肝素(1ml/kg) 插管,左颈总动脉插管,3.远心端,45剪口,约为管径的1/2,4.朝心脏方向插管 23cm并固定,颈 总 动 脉,近心端,心脏,远心端,头部,(5)尿液镜检,计录管型数和细胞数(10个视野),管型 (低倍镜),细胞 (高倍镜),(6)尿蛋白定性检查,取尿液3ml于试管中 酒精灯上加热至沸腾 若混浊,加入5%醋酸3-5滴 再煮沸 尿变清,尿内有尿酸盐 混浊加重,尿中有蛋白,(6)尿蛋白定性检查,(7)血浆尿素氮测定,原理:血液中尿素在强酸条件下与二乙酰-肟和氨硫脲(DAM-TSC)共煮沸,生成红色复合物,颜色深浅与尿素氮含量成正比例关系,用分光光度计测定OD值,可计算出尿素氮含量。,方法 每组自颈总动脉取血10ml到离心管,离心,3000rpm 10min,吸出上层血浆置于干净试管中备用; 按下表加入试剂:, 各管加好混匀后置沸水锅中煮沸10min,流水中冷却3min后测OD值(520nm波长),先以空白管调零,再读取测定管值; 计算:,血浆尿素氮(mg%)=,(8)形态学观察,将家兔处死(耳缘静脉注入空气510ml),取出肾脏; 观察并比较两组家兔肾脏的大体形态,如体积大小,表面色泽,皮质条纹及色泽等。,实 验 流 程 概 括,1. 复制模型(已完成),(1) 称重麻醉: 腹腔注射20%乌拉坦,5ml/kg,2. 手术操作及检测指标,(2) 固定备皮:,(3) 膀胱插管收集尿液,(4) 左颈总动脉插管,(5) 尿液镜检,计录管型数和细胞数( 10个视野),(6) 尿蛋白定性检查,(7) 血浆尿素氮测定,实验报告的书写,实验目的 实验步骤(简明扼要) 实验结果,分析讨论,分 析 讨 论,根据本实验结果,分析升汞引起急性肾功能衰竭的 机制 结合本实验结果,分析各种现象产生的机理,
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