芦丁的提取、分离与鉴定槐花米系豆科槐属植物槐树（Sophora japonica L）的花蕾，自古用作止血药物。治疗吐血，痔疮便血、子宫出血、鼻血等症，所含主要成分为芸香苷，又称芦丁（Rutin，维生素 P），其含量高达 1216%，有调节毛细血管渗透性之作用，临床用作毛细血管止血药，如复方芦丁，也作为高血压的辅助治疗药物。一、目的要求：1掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法。2掌握化学鉴别试验、苷水解和薄层层检查等手段在苷类结构鉴定上的作用。二、已知重要成分性质：1 芦丁（芸香苷， rutin）淡黄色针晶，水中结晶者含 3 分结晶水， C27H30O163H2O 100mmHg 和 110 加热 12 小时后，变为无水物，无水物于 25变棕， 1157软化， 2145发泡分解， 1g 芦丁溶于约 300ml 冷水， 200ml 沸水， 7ml 沸甲醇，溶吡啶，甲酰胺和碱液，微溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿，二硫化碳、乙醚、苯和石油醚。2 槲皮素（ Guereetin）为芦丁的苷元， C15H10O7， MW302.23 ；含二分子结晶水为黄色针晶， （稀乙醇）， 5 7失水， 314解， 1g 溶于 290ml 无水乙醇、 23ml 沸乙醇，溶于冰醋一般在碱水中溶解显黄色，几不溶于水。OHHOOOHORR=glu rha芦丁OHOR=OH槲皮素3 皂苷（ Saponin）粗品为白色粉末， mp 210 20（ dec）。易溶于吡啶。能溶于 200 倍的甲醇，酸水解得下列两种苷元及糖。糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。（ 1）白桦酯醇（ Betulin ）无色针晶， mp2152，能溶于醋酸，丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等；难溶于石油醚和水。OHCH 2OHHOHO槐花二醇（Sophoradiol）无色针晶， mp21920或 224，溶于石油醚、 苯、丙酮、甲醇、难溶于水。三、试剂与仪器试剂：硼砂、槐花米、石灰乳、纱布、蒸馏水、正丁醇、醋酸、乙醇、三氯化铝、盐酸仪器：烧杯、新华色谱滤纸、纱布、加热器、三角烧瓶、玻璃棒、电子天平、抽滤瓶、布氏漏斗、真空泵、分液漏斗、冰箱四、薄层硅胶板的制备硅胶 GF254 10g+0.5%CMC-Na 制版五、提取分离和纯化槐花米粗粉（ 20g ）碱提取在 500ml 烧杯中加入水 250ml ，硼砂 1g 注1在加热至沸腾时，投入槐花米，继续直火煮沸 23 分钟，在搅拌下小心加入石灰乳，调至 8.59 注2 保持微沸 30 分钟，趁热用尼龙布挤过滤。滤渣滤液酸沉淀在 6070 下用浓盐酸调 pH 至4注 3。静置 6小时以上析出沉淀。抽滤，用蒸馏水洗沉淀 12 次至中性。滤液沉淀（芦丁粗品）（弃去）粗称重后按芦丁在热水中 1 200 的溶解度加蒸馏水进行重结晶。将沉淀悬浮于蒸馏水中，加热煮沸 15 分钟，趁热过滤。滤渣（弃去）滤液充分静置，过滤，6070 干燥，称重。芦丁（精制品）注 1：硼砂因能与芦丁结合，起保护邻二酚羟基，不被氧化破坏的作用，实验证明，提取时加入硼砂，产品质量要好些。注 2：加石灰乳既能达到碱溶解提取芦丁的目的，还可以除去槐花米中大量的粘液质和酸性树脂（形成钙盐沉淀） ，但 pH 不能过高和长时间煮沸，因为会导致芦丁的降解。注 3：pH 过低会使芦丁形成锌盐而降低收率。六、芦丁的鉴定1、三氯化铝纸片反应在一张滤纸条上滴加样品溶液后，加！%三氯化铝乙醇溶液两滴，于紫外光灯下观察荧光变化，记录现象。2、芦丁的纸色谱鉴定展开剂：正丁醇 -醋酸 -水（ 4：1：5）上层溶液展开方式：预报和后，上行展开。显色：喷三氯化铝试剂前后，置日光及紫外光灯（365nm）下检视色斑的变化思考题：1）如何从芦丁与斛皮素的紫外光谱特征确定芦丁和斛皮素的结构？2）碱提酸沉法的原理是什么？芦丁、 Vc 片的制备及检查一、实验目的和要求1掌握复方制剂的配伍原理及工艺过程。2掌握复方制剂质量检测。二、适应症：主要用于脆性增加的毛细血管出血症，也用于高血压脑病、脑出血、视网膜出血、出血性紫癜、急性出血性肾炎、再发性鼻出血、创伤性肺出血、产后出血等的辅助治疗。三、实验药品和器材药品芦丁维生素 c微晶纤维素低取代羟丙基纤维素硬脂酸镁蒸馏水器材单冲压片机工业筛 (药筛 )四、实验内容（一）芦丁、 Vc 复方片的制备（ 0.2g/片）1处方每片用量（ mg）100 片用量（ g）芦丁202Vc505微晶纤维素12.22低取代羟丙基纤维素0.6硬脂酸镁0.182制法：(1) 主药芦丁、 Vc 过筛混合，再加微晶纤维素和低取代羟丙基纤维素过筛混合均匀。(2) 制粒：加少量蒸馏水制软材， 过 20 目筛制粒，将湿粒于 4060干燥，用 20 目筛整粒并与硬脂酸镁混匀。(3)压片：将上述颗粒压片（每片0.2g）。3. 用法用量：口服，一日三次，每次 1-2 片（二）片剂质量检查1外观应完整光洁，色泽均匀，有适宜的硬度，以免在包装贮运中发生碎片。2片重差异取药片 20 片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定各片的重量每片重量与平均片重相比较， 超出重量差异限度的药片不得多于 2 片，并不得有 l 片超出限度的一倍。3含量测定芦丁取本品 10 片，精密称定，研细，精密称出适量（约相当于芦丁25mg）照药典中高效液相色谱方法测定。固定相： C-18 硅烷；流动相：乙腈 -水（ 30：70）维生素 C精密称取上述细粉适量（约相当于维生素C 0.2g），置 100ml 的量瓶中，加新沸过的冷水100ml 与稀醋酸 10ml 的混合液 40ml，振摇，使维生素C 溶解，再用混合液稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸迅速滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液 50ml，加淀粉指示液 10ml ，立即用碘液 (0.1mol/L) 滴定，至溶液显蓝色并持续 30 秒钟不褪 ,即得。每 1ml 的碘液 (0.1mol/L) 相当于 8.806mg 的C6H8O6。本品含芦丁 (C27H30O163H2O)与维生素 C(C6H8O6)均应为标示量的90.0110.0。