组织胚胎学,主讲 徐邦生,第一章 绪论,一、组织胚胎学的研究内容 组织学：研究正常机体的微细结构及其相关的功能。包括： 细胞细胞是机体形态结构和功能的基本单位 组织组织是由形态相似，功能相关的细胞和细胞间质(细胞外基质)组成。有四大基本组织：上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织。 器官器官是由几种不同的组织按功能需要合理构筑而成。 系统由多个功能相关的器官组合在一起构成。,细胞,组织,器官,系统,胚胎学： 是研究人体发生、发育及其变化规律的科学，主要研究从受精卵开始，通过细胞的分裂、分化逐渐发育成新个体的全过程。还包括在胚胎发育过程中形成的先天性畸形及其原因。,二、组织学的研究技术,（一）一般光学显微镜术（光镜、LM ）： 最大分辨率为0.2微米(m)，可将物体放大约1500倍。 最常用的方法是石蜡切片、HE染色。 过程：取材、固定、包埋、切片、脱蜡、染色、透明、封片。,HE 染色（苏木精-伊红染色)（hematoxylin-eosin）,苏木精将细胞核染成紫兰色 伊红将细胞质染成粉红色。,嗜碱性、嗜酸性、中性。 亲银性：有些组织结构可直接使硝酸银还原而显色，称亲银性。 嗜银性：有些结构需加入还原剂后才能显色，称嗜银性。 异染性：有些组织成分用甲苯胺蓝等碱性染料染色后不显蓝色而呈紫红色，这种现象称异染性。,肝 HE染色,常用长度单位,毫米（mm):1mm=1000m 微米(m）:1m=1000nm 纳米(nm),除石蜡切片外，还有：冰冻切片、涂片、铺片、磨片等。,（二）电子显微镜技术（电镜，EM ）,透射电镜（TEM ）和扫描电镜（SEM ） 最大分辨率为.纳米(nm)、超微结构 电子显微镜是以电子束代替可见光，以电磁透镜代替光学透镜，最后将放大的物像投射到荧光屏上进行观察。,扫描EM可观察细胞表面的立体结构。 戊二醛固定、合成树脂包埋、超薄切片、重金属染色。 电子密度高、电子密度低。,冷冻蚀刻法是透射电镜下研究膜相结构的一种方法。 标本经过骤冷、断裂、蚀刻、镀铂、复型、腐蚀等步骤，将生物膜的类脂双分子层的疏水层断开，制成铂碳复型膜。,光、电镜图,扫描EM,图细胞膜,（三）一般组织化学和细胞化学技术,一般组织化学是通过化学的或物理的反应原理显示组织切片或细胞内的某些化学成分,进行定位、定量，研究它与功能的关系。 如糖类、脂类、酶类、核酸等与试剂发生化学的或物理的反应，形成有色的终末产物，在光镜下观察。 如在电镜下观察，即电镜组化。,1、过碘酸雪夫氏反应（PAS 反应）,过碘酸氧化多糖生成醛基，再与Schiff试剂形成紫色沉淀。 可显示细胞内的多糖。 多糖-多醛 -紫色沉淀 过碘酸 Schiff试剂,2、免疫组织化学技术,免疫组织化学基本原理是利用抗原与抗体能特异性结合的特点，检测细胞中某种肽类及蛋白质等大分子物质的分布。,3、荧光组织化学,在免疫组织化学的基础上，再用荧光素标记抗体，以荧光显微镜进行观察。,4、原位杂交术,是一种核酸分子杂交组织化学术。它可用于检测细胞内mRNA和DNA序列片段，原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达，研究遗传基因、抗原基因、受体基因、癌基因等在染色体上的定位和表达。 原位杂交是一种简单、直接和精确的核酸定位方法，具有极高的敏感性和特异性，已成为当前细胞生物学、分子生物学研究的主要手段。,（四）细胞和细胞化学定量术,1、显微分光光度测量术：是应用显微分光光度计，以物质分子对光波的选择性吸收为基础，在显微镜下对生物样品中的化学物质进行定量分析。 2、流式细胞术：是近年来发展起来的细胞分类和定量研究技术。 3、形态计量术：是运用几何学和统计学原理，将观察组织和细胞获取的二维平面图像资料，推导出三维立体定量的方法。,（五）细胞分离术,利用离心方法和通过细胞分离器，可把一种或多种细胞从含有多种细胞的群体中分离出来。 1、差速离心法 2、密度梯度离心法,（六）组织培养技术,观察活细胞的结构。 组织学的研究方法很多。 与仪器的进步有关 荧光显微镜 倒置显微镜 倒置相差显微镜 共聚焦激光扫描显微镜,三、组织学在医学中的地位,是医学中重要的基础学科。 与病理学和临床各科关系密切。 与生物化学、免疫学、生殖医学等相关科学互相渗透。现代医学研究的热点，如细胞凋亡、细胞突变、癌变及其逆转，细胞识别与细胞通讯，细胞增殖、分化和衰老的调控，细胞与免疫等都与组织学有密切的联系。 许多边缘科学，如组织化学，分子生物学、分子遗传学等，都渗透着组织学的知识。,四、组织学的学习方法,形态与机能相结合 理论与实践相结合 建立动态变化和立体的概念 前后联系、总结对比,本章节要点,1、组织胚胎学的研究内容是什么 2、光镜下常用的染色方法有哪些？何谓嗜酸性及嗜碱性。 3、何谓PAS反应,