实验四 糖发酵实验,一、目的要求,1.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。 2.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。,二、基本原理,糖发酵试验是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。,二、基本原理,酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫Ph5.2（黄色）-6.8（紫色），当发酵产酸时，可使培养基由紫色变为黄色。 气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。,三、实验材料,1.大肠杆菌，普通变形杆菌（ Proteus vulgaris）斜面各1支； 2.盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各3支（内装有倒置的德汉氏小管），试管架，接种环等。,图1 糖类发酵试验,四、操作步骤,1、编号 用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。 2、接种 取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支，按编号1支接种大肠杆菌，另1支接种普通变形杆菌，第3支不接种，作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支，同样1支接种大肠杆菌，1支接种普通变形杆菌，第3支不接种，作为对照。 3将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37温室中培养24小时。,注意事项： 接种后应轻轻摇动试管，使其均匀，防止倒置的小管进入气泡。否则会造成假象，得出错误答案。,观察结果:,观察结果时，看各管颜色变化及杜氏小管有无气泡。 产酸产气用“”表示； 只产酸不产气用“+”表示； 不产酸也不产气用“”表示。,假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵试验应该出现什么结果？,思考题：,