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1.总体计算过程常规样本测试:AD- 吸光度-反应度-浓度定标样本测试:AD- 吸光度-反应度-定标参数质控样本测试:AD- 吸光度-反应度-质控结果2. AD-吸光度 目的:对某个测试每周期采集的 AD 值,先计算该周期采集点的吸光度,本计算过程是后续反应度计算的基础 公式:=(log10本底读 数 )/0.58Abs: 该测试在某周期的吸光度: 该测试所用反应杯的空白 AD,在大生化上,是使用初始化后或进行专门的水本底空白测试后,该测试所用反应杯所读到的水空白 AD,在小生化上,是该测试所用反应杯在第三阶清洗后读到的水空白 AD:该测试在某周期读到的 AD 值读 数0.58: 光径系数,标准光径为 10mm,我们反应杯为 5.8mm,除 0.58 目的是换算到标准光径。3.吸光度-反应度 目的:依据某测试在反应时间段内读到的每周期吸光度,计算该测试最终反应度,本计算过程是后续浓度或定标参数计算的基础。依据分析方法不同,对应的计算方法也不同3.1.终点法=0 空白其中:R:终点法测试的最终反应度:原始反应度0K:体积修正因子:终点法测试反应度空白空白下面进一步说明每个计算参数的各自的计算公式:1) 原始吸光度: 0取反应周期最后若干个采集点点,如果:1) 反应周期采集点不少于 4 个点,则取最后 4 点,去掉最大最小值,取中间 2点计算平均值;2) 如果只有 3 点,则去掉最大最小取中间值;3) 如果只有 2 点,取 2 点的平均值;4) 如果只有 1 点,取该点的值;反应周期开始及结束时间参见“附录一:反应时间段” 。2) 空白吸光度: 空白取空白时间段最后若干个点,如果:1) 空白时间段内采集点不少于 4 个点,则取最后 4 点,去掉最大最小值,取中间 2 点计算平均值;2) 如果只有 3 点,则去掉最大最小取中间值;3) 如果只有 2 点,取 2 点的平均值;4) 如果只有 1 点,取该点的值;空白时间段开始及结束时间参见“附录二:空白时间段” 。3) 体积修正因子:K单试剂项目:K=R1/ (R1+S)双试剂项目:K=(R1+S)/ (R1+S+R2)上述的 R1,S,R2 分别指该项目第一试剂加样量,样本加样量,第二试剂加样量3.2. 两点法/固定时间法=(2 1)/(2 1)其中:R:两点法测试的最终反应度:反应结束点的吸光度2:反应结束点的吸光度1:反应结束点的时间,单位为分钟2:反应结束点的时间,单位为分钟1反应周期开始及结束时间参见“附录一:反应时间段” 。3.3.速率法/动力学法R = =1 =1=1=12=12 说明:以上公式实际上就是使用最小二乘法计算反应时间段所有点的拟合曲线的斜率。其中:R:速率法测试的最终反应度N:读数点的个数:第 i 个点的吸光度:第 i 个点的采集时间,单位为分钟值为 145.815=1值为 84.83335196,=1 =1值为 31.76536995值为 562.1641=12值为 7196.69760464055=14.反应度-浓度视具体定标公式而定,后续补充5.反应度-定标参数依据定标公式求参数附录一:反应时间段反应时间 试剂类型 200 300 350 400 M7开始时间 单试剂 ?,具体依项目设置而定双试剂项目?,具体依项目设置而定单试剂 ?,具体依项目设置而定结束时间双试剂项目?,具体依项目设置而定注 1: 反应周期开始时间,视机型不同而不同,反应周期结束时间依据用户设定的项目读数周期而定。注 2:上表中所说的第 1 周期,是从加入 R1 以后的第 XXX 个周期。附录二:空白时间段
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