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尿液一般化学检查,中国医大附属盛京医院:佟威威,干化学分析试剂条,PH SG PRO GLU KET BIL URO BLD LEU NIT,尿pH 值,尿液pH值主要取决于尿中酸碱缓冲对的相对含量,是反映肾脏调节机体酸碱平衡能力的一种指标, 正常尿液的pH值为4.58。 尿液pH值的影响因素 疾病 食物与药物 生理活动,原理和方法学评价 指示剂法:BTB 线性窄、颜色干扰 试带法:线性宽、广泛使用 滴定法:操作复杂 电极法:精确度高 质量控制 标本新鲜 试带法 : PH范围宽,无污染、无变质,尿pH 值,临床意义,pH值 pH值 疾病 碱中毒、膀胱炎 酸中毒,糖尿病 肾小管性酸中毒 发热、痛风 食物 蔬菜、水果 肉类及混合性 药物 小苏打、碳酸钾 氯化钾、氯化钙 生理活动 饭后碱潮 剧烈运动、应激,注:低钾性碱中毒时,尿pH值,尿蛋白,蛋白尿(proteinuria) : 正常人尿液中含有极微量的蛋白质,当尿内蛋白质含量150mg/24h称为蛋白尿。 轻度蛋白尿:4000mg/24h,正常尿液蛋白,小分子(4万):肾小球滤过 微球蛋白、溶菌酶、Fc片段 大分子(9万):肾小管分泌 T-H糖蛋白、SIgA 中分子(49万) :白蛋白130mg/24,蛋白尿的成因,血液中小分子量蛋白与阳性电荷蛋白异常增加。 肾小球毛细血管电荷屏障、孔径屏障被破坏。 肾小管重吸收功能受损。 肾小管分泌蛋白增加。,肾小球性蛋白尿,定义:由于各种原因所致的肾小球毛细血管通透性增加,血浆蛋白大量滤过,超过肾小管的重吸收功能形成的蛋白尿。 选择性蛋白尿:尿中无大分子量的蛋白,以白蛋白为主,免疫球蛋白/白蛋白0.5,各种肾小球肾炎常可阳性。,肾小管蛋白尿,愿因:肾小管重吸收能力降低。 特点:以小分子量蛋白为主。 临床意义: 中毒性肾间质损害, 肾小管间质病变, 肾移植后的排斥反应。,混合性蛋白尿,原因:肾小球与肾小管同时病变。 特点:具备上述两种蛋白尿特点。 临床意义: 各种肾小球与肾小管疾病后期. 全身性疾病累及肾脏。,溢出性蛋白尿,原因:血浆中出现异常增多的小分子量蛋白 特点:异常的小分子。 临床意义: 急性血管内溶血 急性肌肉损伤 浆细胞病。,组织性蛋白尿,原因:肾组织破坏和泌尿系统分泌的蛋白质增加 特点:轻度蛋白尿,以T-H糖蛋白为主。 临床意义: 炎症与中毒时升高 易成为管型的基质与结石的核心。,功能性蛋白尿,原因:剧烈运动、发热及紧张等应急状况 特点:一过性轻度蛋白尿 临床意义:泌尿系统无器质性损害。,体位性蛋白尿,定义:直立时出现而卧位时消失的蛋白尿,且无水肿、血尿及高血压等异常表现。 原因:不明,可能是由于直立时前突的脊柱压迫肾静脉所致。,加热乙酸法:特异性强、干扰少、灵敏度低 磺基水杨酸法:简单、灵敏、假阳性 参考方法 试带法:仅对白蛋白敏感、临床筛查 比浊法:线性窄、干扰因素多 比色法:灵敏度低 免疫法及电泳法:灵敏、特异、好的发展前景,方法学评价:,尿微量白蛋白,尿液中的白蛋白超出正常水平、但低于 试带法可检出范围。 检测原理:放免、酶免、免疫比浊 标本收集方式:计时尿、随机尿、晨尿 临床意义:糖尿病、SLE 肾小球疾病、肾间质疾病 高血压、肥胖,尿蛋白电泳SDS-PAGE,蛋白质与SDS结合,形成负电荷的复合体。 聚丙烯酰胺交联网有分子筛效应。 尿蛋白电泳后按分子量大小排列。,临床意义,蛋白尿类别 电泳特点 临床意义 低分子量 在白蛋白及以下区带 单纯肾小管损害、溢出性蛋白尿 中分子量 主要区带在白蛋白及附近 肾小球损害 高分子量 主要区带在白蛋白以上 严重的肾小球滤膜损害 混合性 低、高及白蛋白均有 肾小球与肾小管同时损害,尿液中特殊蛋白质合理选择与运用,溢出性蛋白尿: 凝-溶蛋白(Bence-jones proteinuria) 尿中游离、 血红蛋白与肌红蛋白 肾小球性蛋白尿: 微量白蛋白 免疫球蛋白以及补体C3 肾小管性蛋白尿: -2微球蛋白 (2)-1微球蛋白 (3)溶菌酶 糖尿病肾病早期检测指标:微量白蛋白 肾移植排斥反应与肿瘤: -2微球蛋白,尿 糖,尿糖:指尿中葡萄糖。 参考值: 定性:阴性 定量:0.56-5.0mmol/24h,尿糖的成因:,血糖的浓度 肾血流量 肾糖阈:尿液中开始出现葡萄糖时的血浆葡萄 糖浓度水平。 滤过率减低和重吸收减弱时 肾糖阈减低,葡萄糖 原理,试带法:葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法 (GOD-POD),GLU+O2+H2O,GOD,H2O2+4-氨基安替比林+酚,葡萄糖酸+H2O2,醌亚胺+H2O2,POD,葡萄糖,方法学评价: 班氏法:非特异、受还原性物质的干扰 试带法:特异性强、简便、快速 薄层层析法:确证试验,复杂、成本高 质量控制 试带法:假阳性 漂白粉、次氯酸钠 假阴性 VitC、氟化钠、久放,临床意义,血糖增高性糖尿:糖尿病、甲亢、嗜铬细胞瘤、 Cushing综合征等 肾性糖尿:慢性肾炎或肾病综合征、妊娠等 暂时性糖尿:大量进甜食或急性心梗、 脑颅外伤等出现的应激性糖尿 非葡萄糖性糖尿:乳糖,半乳糖,果糖等。 假性糖尿:尿中有还原性物质,如VitC、尿酸等。,尿酮体(),酮体是乙酰乙酸、-羟丁酸及丙酮的总称。,脂肪,肝脏,酮体,其它组织,CO2+H20,肾脏,酮尿,尿酮体,亚硝基铁氰化钠法 原理 方法学评价: 不能检测-羟丁酸 假阳性:肌酐、肌酸、高色素尿(冰乙酸去除干扰) 假阴性:湿度、光照,乙酰乙酸,丙酮,亚硝基 铁氰化钠,紫色 化合物,+,尿酮体,质量控制 检测前:标本新鲜 丙酮 挥发 乙酰乙酸 降解 检测中:肌酐、肌酸 检测后:酮体类型与病情变化,尿酮体,参考值:阴性,尿酮体 临床意义,糖尿病性酮尿症:糖尿病患者尿中有酮体应考虑酮症酸中毒。 早期: -羟丁酸 尿酮体阴性 缓解期:乙酰乙酸 尿酮体阳性 非糖尿病性酮尿症:儿童发热、禁食或出现妊娠反应的孕妇等均可出现酮尿。 服用双胍类降糖药:可出现血糖已降,酮尿阳性。,尿胆红素(bilirubin、IL)和尿胆原(urobilinogen 、UG),尿胆红素和尿胆原 原理,重氮法:干化学试带法,抗干扰能力差 假阳性:药物 假阴性:VitC、亚硝酸盐 氧化法:,尿胆红素和尿胆原 临床意义,尿胆红素 尿胆原 溶血性黄疸 阴性 阳性 阻塞性黄疸 阳性 减少或消失 肝细胞性黄疸 阳性 轻度增加 正常 阴性 阴性弱阳性,尿胆原和尿胆素的检查,结合胆红素,粪便,粪胆原,肠腔,尿胆原,尿胆素,光照,尿三胆,尿胆原,尿胆素,胆红素,尿液血红蛋白检查,当有血管内溶血时,红细胞破坏,血红蛋白释放入血液形成血红蛋白血症,当血中游离血红蛋白的量1.0-1.35g/L时,血红蛋白可随尿液排出,形成浓茶色、红葡萄酒色或酱油色尿液。,尿液血红蛋白检查,试带法: 原理:亚铁血红素的过氧化物酶样活性 假阳性:氧化剂 假阴性:Vc、亚硝酸盐 免疫法:操作简便、特异性强,尿液血红蛋白检查 临床意义,血管内溶血疾病的诊断 红细胞破坏 生物因素 红细胞膜缺陷 不稳定血红蛋白疾病 免疫因素,尿亚硝酸盐,来源: 细菌对硝酸盐的还原作用 体内NO氧化 检测原理:亚硝酸盐还原法 尿NIT检出率3个条件: 致病菌存在硝酸盐还原酶 膀胱内足够的停留时间 尿中含有硝酸盐,尿亚硝酸盐,尿路感染快速筛查 阳性 大肠埃希菌感染 阴性不排除 阳性不确定 亚硝酸盐+白细胞酯酶+显微镜检查,白细胞酯酶,检测原理:酯酶法 干扰因素: 假阳性:多见 假阴性:高比重尿、Vc 临床意义:泌尿系统感染,尿液其他化学成分,尿液肌红蛋白(Mb) 尿液本周蛋白(BJP) 尿液2-微球蛋白 尿液1-微球蛋白 人绒毛促性腺激素(hCG),尿液肌红蛋白(Mb),当肌肉组织受损伤时,Mb可大量 释放 至细胞外进入血循环,因其相 对分子量较小可迅速通过肾小球滤 过而由肾脏排出,尿中Mb检查阳 性,称肌红蛋白尿,尿液肌红蛋白(Mb),外观:深红色、不透明的酱油色、深 褐色等 隐血试验:阳性 检测方法:目前多采用ELISA或RIA, 灵敏度、特异性均较好,尿液肌红蛋白(Mb) 临床意义,用于鉴别机体是否发生肌肉损伤 阵发性肌红蛋白尿 创伤 组织局部缺血 代谢性Mb尿 原发性(遗传性)肌肉疾病,尿液本周蛋白(BJP),BJP 是游离免疫球蛋白轻链,能通过肾小球滤过膜,当浓度增高超过肾小管重吸收的极限时可自尿中排出,即本周蛋白尿。BJP在pH4.90.1条件下,加热至40-60时可发生凝固,温度升至90-100时可再溶解,而温度减低至56左右,又可重新凝固,故又称为凝溶蛋白。,尿液本周蛋白(BJP),热沉淀-溶解法:灵敏度低 对甲苯磺酸法:简便、灵敏度高 免疫比浊度法:速度快、灵敏度高、精确 度高、稳定好,尿液本周蛋白(BJP),参考值:阴性 临床意义: 多发性骨髓瘤 巨球蛋白血症 原发性淀粉样变性 其他疾病,尿液2-微球蛋白测定 2-微球蛋白(2-M)是一种相对分子质量11800、含100个氨基酸和1个二硫键的蛋白质,使体内除成熟红细胞和胎盘滋养层外、所有细胞特别是淋巴细胞和肿瘤细胞上人类白细胞抗原的清链蛋白组分,因电泳时出现于2区带而得名。,尿液2-微球蛋白测定,临床意义: 尿液2-微球蛋白测定主要用于评估肾脏早期损伤时肾小球和近端肾小管功能。 肾小管-间质性疾病 药物和毒物所致早期肾小管损伤 肾移植术后 假阴性:酸性尿,尿液1-微球蛋白测定,1-微球蛋白(1-M)为相对分子质量仅26000的一种糖蛋白,由167个氨基酸组成。,尿液1-微球蛋白测定,临床意义: 评估肾脏早期损伤时肾小球和近端肾小管功能。 与2-微球蛋白相比不受肿瘤影响、无酸性尿假阴性,人绒毛促性腺激素(hCG),由胎盘合体滋养细胞分泌的一种具有促性腺发育的糖蛋白激素,对促性腺激素受体具有高度的亲和性。 hCG 亚基:具有生物学活性 亚基:免疫学特异性,制备单克 隆抗体,人绒毛促性腺激素(hCG),检测原理 ELISA 单克隆抗体胶体金 化学发光免疫 RIA 检孕卡法 胶乳凝集抑制 血凝抑制,人绒毛促性腺激素(hCG),单克隆抗体胶体金,羊抗鼠IgG,羊抗人IgG,胶体金标记的 鼠抗人hCG,人绒毛促性腺激素(hCG),参考值: 定性:阴性; 半定量:2ng/L,人绒毛促性腺激素(hCG),临床意义 早期妊娠诊断:妊娠3540d可阳性 先兆流产:200ng/L流产的可能 48ng/L难免流产 不全流产: hCG 阳性 完全流产: hCG 阴性 异位妊娠:较正常妊娠时低 葡萄胎、绒毛癌:是正常妊娠的100倍,重点回顾,尿蛋白 尿糖 尿胆红素 尿干化学检测的影响因素 尿HCG,谢 谢!,
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