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疑难血型鉴定和疑难交叉配血1.疑难血型鉴定疑难血型是一种血型难以检定或判定(正反定型不一致)的现象,多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。因此,疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体和特殊抗原或抗体检测角度出发,结合血型血清学和分子生物学研究方法对患者样本进行检测。而对于不规则抗体筛查和鉴定,主要是对抗体种类和特性进行研究,尤其是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定,从而较为准确的分析患者血清抗体的特异性。在工作中遇到此类情况时,应按照以下步骤进行分析和处理:(1)分析可能存在的原因 先排除人为操作因素,再通过了解患者临床资料分析可能的原因,主要包括抗原类影响因素和抗体类影响因素,抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等,抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。(2)设计实验进行验证 疑难血型鉴定流程见流程图1。流程图1 疑难血型鉴定流程2014年1月,在工作中发现正反定型结果不符样本一例,经一系列血清学试验确证该患者为P1Pk血型系统的p表型,经分子生物学基因测序,初步推断A4GALT 基因第3外显子的903CG突变是患者p表型形成的分子生物学基础,该研究成果从不同角度和深度撰写论文,先后发表临床军医杂志和中国输血杂志论文各一篇,并由此逐步展开疑难血型鉴定。在此之后的工作中,通过阅读文献自修学习,鉴定出Am、Bm、B3等血型亚型,形成了一套相对完整的疑难血型鉴定思路和流程。2014年2月和2015年10月,在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗的患者,经一系列血清学试验,确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体,该研究成果先后以论文形式发表于临床军医杂志。在后期工作中,通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查和鉴定结果进行分析,对厦门地区住院患者不规则抗体的分布特征有了较为清晰的了解,该研究成果以论文形式发表于国际医药卫生导报,并形成了一套相对完整的不规则抗体筛查和鉴定流程。2.疑难交叉配血交叉配血是确保安全有效输血的最重要环节,只有交叉配血真正相合(相容)才能保障临床输血治疗的安全性。现一般进行供者和受者ABO、RhD同型配血,只有配血相合时才能输血(特殊情况例外),当出现配血不相合时,则视为“疑难配血”。目前,输血科常用的交叉配血的方法主要包括聚凝胺法、卡式法和抗球蛋白法。当遇到异常的配血实验结果时,应以抗人球蛋白法为准,但任何一种实验方法都存在假阳性或假阴性的可能。因此,需在不同的情况采取不同的检测技术,建立适合本实验室的血液免疫学检测流程。在工作中遇到疑难配血时,可按照以下步骤进行分析和处理:(1)分析可能存在的原因 先排除人为操作因素,再通过了解患者临床资料分析可能的原因,交叉配血不合包括主侧配血不合和次侧配血不合,其产生原因主要如下: 主侧配血不合:患者血清中存在同种抗体、自身抗体、冷凝集素、药物抗体、血浆蛋白紊乱等因素;供着红细胞直抗阳性(相对少见)。 次侧配血不合:患者红细胞黏附免疫球蛋白或抗体,直抗阳性,全凝集或多凝集;供着血清中存在同种抗体、自身抗体、冷凝集素、药物抗体、血浆蛋白紊乱等因素(相对少见)。(2)设计实验进行配血 疑难配血流程见流程图2。流程图2 疑难交叉配血流程临床上最常见的疑难配血情况为受血者血清中产生了不规则抗体,理论上我们应通过不规则抗体筛查和鉴定来确定患者血清中不规则抗体的特异性,选择不含相应抗原的供者红细胞进行输血,然而由于检测过程相对复杂且耗时较长,临床上此类患者配血常采用“盲配”。此外,部分疑难配血患者血清中存在自身抗体,典型代表为自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者。AIHA患者若直抗阳性而间抗阴性,一般不干扰主侧配血,但当AIHA患者直抗和间抗均阳性时,则患者主侧和次侧配血均不相合,临床上AIHA患者以后者情况居多。对于AIHA患者,临床上一般多采用激素疗法而不主张进行输血治疗,但当患者因携氧不足而急需输血抢救时,其配血和输血原则一般为输注主侧凝集强度不高于患者自身对照凝集强度的血液,并且要少量输血。近年来,对于疑难配血患者在相容性输血不能满足的情况下,尚有另一种输血治疗方法,即配合性输血:多采用O型洗涤红细胞或AB型血浆对患者进行临床输血治疗。3.临床输血治疗输血治疗是患者临床治疗的重要方式之一,然而不同临床科室的患者对不同血液制品的需求和输注特征并不相同:骨科和心胸外科等外科患者由于手术出血量较大而红细胞需求量较大,烧伤科患者由于大量凝血因子的消耗而对血浆和冷沉淀的需求量较大,产后大出血的患者则会同时需要输注大量的红细胞、血浆和血小板。因此,对于不同临床特征下的患者,我们要熟悉其临床输血治疗的特征,及时准确的为患者提供血液制品。因此,为进一步加强临床医生对患者输血治疗指征的把控,结合我院临床科室特征,编写简易输血指南一书供全院医护人员参考学习。此外,对于患者临床输血治疗的研究,先后探究了“新鲜冰冻血浆联合冷沉淀输注对产后大出血患者凝血功能影响”和“烧伤患者(成人)凝血功能状况和临床输血治疗的研究”。
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