1 1.哪些因素引起 DNA 的突变？简要叙述生物体存在的修复方式。 突变引起的物理因素：辐射、紫外线等，化学因素：聚乙二醇，致癌物质等，生物因素：仙台病毒等。 修复方式：错配修复 恢复错配 切除修复（碱基、核苷酸） 切除突变的碱基和核苷酸片段 重组修复 复制后的修复，重新启动停滞的复制叉 DNA 直接修复 修复嘧啶二体或甲基化 DNA SOS 系统 DNA 的修复，导致变异 2.描述乳糖操纵子的调控机制。（看不懂题目，乱写的） 乳糖操纵子的调控属于可诱导调节。在以乳糖为碳源的培养基中，在单个透过酶分子的作用下，少量 乳糖分子进入细胞， 又在单个-半乳糖苷酶分子作用下转变成异构乳糖。 某个异构乳糖与结合在操纵区上 的阻遏物结合后使后者失活离开操纵区，开始了 lac mRNA 的生物合成。Lac mRNA 翻译后生成大量的透 过酶和-半乳糖苷酶，加速了乳糖分子的转变。当乳糖分子都被消耗完毕时，阻遏物仍在不断被合成，有 活性的阻遏物浓度超过了异构乳糖浓度， 使细胞重新建立起阻遏状态， 导致 lac mRNA 合成被抑制。 mRNA 半衰期短，不到一个世代生长期，mRNA 几乎从细胞消失，透过酶和-半乳糖苷酶的合成也趋于停止。 3.简述 DNA 半保留复制的概念。 每个子代分子的一条链来自亲代DNA， 另一条链则是新合成的， 这种复制方式被称为DNA的半保留复制。 4.对生物体转录和复制的特征进行说明比较？（网上找的） DNA 复制和 RNA 转录在原理上是基本一致的，体现在：这两种合成的直接前体是核苷三磷酸，从 它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成；两种合成都需要 RNA 聚合酶和四种核苷酸；两种合成 都是以 DNA 为模板；合成前都必须将双链 DNA 解旋成单链；合成的方向都是 5 3。 DNA 复制和 RNA 转录的不同点体现在：复制和转录所用的酶是不同的，复制用的是 DNA 聚合酶， 而转录用的是 RNA 聚合酶；所用前体核苷三磷酸种类不同，DNA 复制用四种脱氧核糖核苷三磷酸，即 dATP、 dGTP、 dCTP、 dTTP， 而 RNA 转录用四种核糖核苷三磷酸， 即 ATP、 GTP、 CrP、 UTP 做前体底物 ； 在 DNA 复制时是 A 与 T 配对，而 RNA 转录是 A 与 U 配对；DNA 复制时两条链均做模板，而 RNA 转 录时只以其中一条链为模板 ； DNA 复制是半不连续的，可产生冈崎片段，而 RNA 转录是连续的 ； DNA 复制时需 RNA 做引物，而 RNA 转录无需引物；DNA 复制时需连接酶的参与，而 RNA 转录时不需要。 5. 阐述蛋白质生物合成途径 氨基酸的活化翻译的起始（核糖体结合 mRNA 且甲硫氨酰-tRNA*结合到核糖体）肽链的延伸（后 续 AA-tRNA 与核糖体的结合，肽键生成，移位）肽链终止蛋白质前体加工蛋白质的折叠 2 6.简要叙述真核生物 mRNA 的转录后加工的方式，这些加工方式各有何意义 RNA 的编辑：某些 RNA，特别是 mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基， 导致 DNA 所编码的遗传信息的改变。因为经过编辑的 mRNA 序列发生了不同于模板 DNA 的变化。 生物学意义：校正作用 有些基因突变在突变过程中丢失的遗传信息可能通过 RNA 的编辑得以回复 调控翻译 通过编辑可以构建或去除起始密码子和终止密码子，是基因表达调控的一种方式 扩充遗传信息 能使基因产物获得新的结构和功能，有利于生物的进化 7.最早证明 DNA 是遗传物质的经典实验是什么？如何用实验证明 DNA 的复制是以半保留的方式进行 的？ 肺炎双球菌的转化实验和噬菌体侵染细菌实验 证明 DNA 半保留方式复制的实验：15N 标记大肠杆菌 DNA 实验 15N 氮源培养基15N-DNA14N 氮源培养基离心：14N-15N-DNA14N 氮源培养基继续培养离心： 14N-DNA，14N-15N-DNA 8.列出你所知道的具有 DNA 外切酶活性的酶及它们在分子生物学研究中的应用。 DNA 聚合酶 I 具有 53和 35外切酶活性 在切除因紫外线照射而形成的嘧啶二聚体中 起着重要作用。也可以除去冈崎片段 5端 RNA 引物，使冈崎片段间缺口消失，保证连接酶将片段连接起 来。 DNA 聚合酶具有 35外切酶活性起校正作用，修复 DNA DNA 聚合酶 （线粒体） 具有 35外切酶活性 线粒体 DNA 的复制 DNA 聚合酶（核内） 具有 35外切酶活性 参与前导链和后随链的合成 DNA 聚合酶（核内） 具有 35外切酶活性 除去 RNA 引物 9.图示多肽合成后的空间输送中信号肽的识别过程。 （课本 145 的图可能是的） 10. 什么是DNA的半保留复制和半不连续复制？如何证明？真核细胞与原核细胞的DNA复制有何不同？ 半保留复制：每个子代分子的一条链来自亲代 DNA，另一条链则是新合成的，这种复制方式被称为 DNA 的半保留复制。 半不连续复制：前导链的连续复制和后随链的不连续复制称为双螺旋的半不连续复制。 不同点：1.复制起点。原核生物只有一个复制起点，真核生物可以有多个。2.复制单元。原核生物有 多个复制单元，可以一次复制多个；真核生物只有一个。3.复制叉移动速度。原核生物快，真核生物慢。4. 复制子大小。原核生物大，真核生物小。 3 11. 简述原核生物与真核生物 mRNA 的主要差别。 原核生物真核生物 场所 转录、 翻译在同一细胞空间且两过程同 步进行 核内：前体 RNA 细胞质：加工修饰后的 mRNA 转录翻译分2步进行 编码蛋白几个多肽 多顺反子 mRNA 1个多肽 起始密码子AUGAUG GUG UUG 半衰期短 5端无帽子结构有帽子结构 3端较短的 poly A 尾巴或没有有 poly A 尾巴 12. 真核生物蛋白质的翻译后加工有哪些？ 1.N 端 fMet 或 Met 的切除 2.二硫键的形成 3.特定氨基酸的修饰（磷酸化，糖基化，甲基化，乙基化，羟基化，羧基化） 4.切除新生肽键的非功能片段 13. 大肠杆菌乳糖操纵子的主要结构和阻遏蛋白的作用机制是什么？ 大肠杆菌乳糖操纵子包含 3 个结构基因：Z、Y、A，以及启动子、控制子、阻遏子等。 阻遏蛋白作用机制：诱导物或异构乳糖与阻遏蛋白结合，会改变其三维构象，使之不能与操纵区结合， 从而激发 lac mRNA 的合成。 14. 简述原核生物与真核生物蛋白质合成的区别 1.原核生物转录和翻译可以同时进行，真核生物要先转录后翻译。 2.原核生物转录在拟核区，真核生物转录在核内。 4 3.原核生物翻译直接由核糖体完成，真核生物核糖体翻译后还要进过内质网、高尔基体等加工。 15. DNA 聚合酶 I 有哪些催化活性？请说明其在 E.coli DNA 代谢中的作用。 DNA 聚合酶活性和 35外切酶活性 即可合成 DNA 链，又可以降解 DNA，保证了 DNA 复制的 准确性。 5 3 外切酶活性 在切除因紫外线照射而形成的嘧啶二聚体中起着重要作用。 也可以除去冈崎片段 5 端 RNA 引物，使冈崎片段间缺口消失，保证连接酶将片段连接起来。 16. 叙述大肠杆菌色氨酸操纵子调节机制要点。 1 trp 操纵子转录起始的调控是通过阻遏蛋白实现的。 2 trp 操纵子转录终止的调控是通过弱化作用实现的。 17. 大肠杆菌 I 型 DNA 聚合酶 （DNA polymerase I） 有几种酶活性？它在体内有些什么功能？举出一 个这种酶在分子生物学技术中的应用例子。 （同 44 题） DNA 聚合酶活性和 35外切酶活性 即可合成 DNA 链，又可以降解 DNA，保证了 DNA 复制的 准确性。 5 3 外切酶活性 在切除因紫外线照射而形成的嘧啶二聚体中起着重要作用。 也可以除去冈崎片段 5 端 RNA 引物，使冈崎片段间缺口消失，保证连接酶将片段连接起来。 18. 扼要说明真核生物内含子的类型和剪接方式。 GU-AG 类（主要）和 AU-AG 类（次要）内含子：通过形成剪接前体方式 I 类和 II 类内含子：无剪接前体，主要通过转酯反应的方式 19. 简述乳糖操纵子的调节方式。 （前面差不多） 20. 描述大肠杆菌细胞的“错配修复”机制和功能。 机制 ： Dam 甲基化酶能使位于 5-GATC 序列中的腺苷酸的 N6 位甲基化。一旦复制叉通过复制起始位点， 母链就会在开始 DNA 合成钱的几秒钟至几分钟内被甲基化。 此后， 只要两条 DNA 链上碱基配对出现错误， 错配修复系统就会根据“保存母链，修正子链”的原则，找出错误碱基所在的 DNA 链，并在对应于母链 甲基化腺苷酸上游鸟苷酸的 5位置切开子链，再根据错配碱基相对于 DNA 切口的方位启动修复途径， 合成新的子链 DNA 片段。 功能：充分反映了母链序列的重要性，对 DNA 复制忠实性有很大的贡献。 5 21. 真核 mRNA 有哪些转录后修饰事件？详细叙述大部分真核 mRNA3末端的修饰过程。 加 5端帽子结构，3端 poly A 尾巴，进行 mRNA 剪接 加 poly A 尾巴需要由内切酶切开 mRNA 3 端的特定部位， 然后由 poly A 合成酶催化多聚腺苷酸的反应。 22. 真核 RNA 聚合酶有三种，它们分别是什么酶？它们的转录产物分别是什么？ RNA 聚合酶 I rRNA RNA 聚合酶 II hnRNAmRNA RNA 聚合酶 III tRNA 23. 举出三种细胞内 DNA 修复系统的例子，说明它们各自修复的 DNA 损伤类型。 错配修复 复制过程中发生错配 切除修复（碱基、核苷酸） DNA 链上相应位置的碱基或核苷酸发生损伤 重组修复 复制起始时尚未修复的 DNA 损伤部位进行修复 DNA 直接修复 修复损伤的碱基 SOS 系统 DNA 受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，细胞为求生存而产生的 一种应急措施。 24. 在原核生物中， 基因的表达通常以操纵子为单位进行调节。 下列是一些基因调节的顺式行为元件和 反式行为因子，以及一些调控机制：启动子；操纵基因；阻遏蛋白；终止子；弱化子；正调节作用； 负调节作用；反馈抑制；反终止作用；CAP；cAMP。请把这些名词和相应的操纵子相匹配。a，乳糖 操纵子；b，色氨酸操纵子；c，阿拉伯糖操纵子 乳糖操纵子：启动子，阻遏蛋白，负调节作用，正调节作用，cAMP 色氨酸操纵子：弱化子 25. 说出双链 DNA 复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。 拓扑异构酶 I 解开负超螺旋 DNA 解链酶 解开双链 6 SSB 单链结合蛋白 保证被解链酶解开的单链在复制完成前保持单链结构 Rep 蛋白 前导链模板 35方向移动（与一般 DNA 解链酶相反） Dna 蛋白 与解链酶共同作用使复制起点解开双链 26. 简述增强子的特点和性质及作用机制。 增强子（定义）：指能使与它连锁的基因转