1,通知：下周（第10周）停课1次,2,第五章 超临界流体色谱法 Supercritical Fluid Chromatography(SFC),3,6.1 超临界流体色谱法概述,1 定义,使用超过临界温度和临界压力的流体（Supercritical Fluid）作流动相的色谱方法。,相图,4,超临界流体与气体和液体的物理性质比较,在临界点附近，温度和压力的微小变化可导致超临界流体物理化学性质的显著改变。,5,2 特点,流动相具有与液体相近的密度，因此它有强溶解性，对分离具有选择性。 流动相的黏度近于气体，可减少柱的过程阻力，适合采用细长色谱柱，提高柱效。或使用更高的流速，提高分析速度。 溶质在流动相的扩散系数介于气体和液体之间，具有较快的传质速率，使分析速度快于液相色谱，峰形变窄，灵敏度提高。 改变流动相压力参数即可改变超临界流体的性质，改善色谱分离。（程序升压法） 流动相便宜、绿色、易除去，可用于制备。 SFC既可用GC中的检测器，又可用HPLC检测器。 适合于分离分析难挥发和热稳定性差的物质。,6,7,6.2 SFC仪器结构,8,典型的分析及半制备型超临界流体色谱仪流程,9,1 流动相输送装置 室温常压为气体的流动相：可将高压钢瓶中的流动相减压至所需压力或用升压泵增压。 室温常压为液体的流动相：采用无脉动注射泵输送。,10,2 进样系统 一般采用HPLC进样部件六通进样阀 3 色谱柱 填充柱：HPLC柱 毛细管柱：气相色谱中的开管柱（交联柱）,11,4 检测器 原则上可利用LC和GC的检测方法。实际过程主要考虑不同的流体和检测方法的匹配问题。 HPLC检测器，如UV、ELSD，但在高压下要进行相应改进。 GC检测器，如FID，经毛细管减压并加热成气体。,限压阀,12,13,6.3 色谱操作条件及其影响因素,流动相，改性剂，添加剂 固定相 温度 压力 流速,14,1. 流动相,最常用的流动相为二氧化碳，加入改性剂甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇等可改变分配系数K(容量因子k)，从而改善分离。,几种物质的超临界性质,15,流动相中的改性剂对分离的影响,16,2. 固定相,化学交联的毛细管气相色谱固定相 硅胶或硅胶键合色谱固定相（c18，苯基，氰基，二醇基等）。 对选择性因子有很大影响。同时固定相的选择也要考虑流动相的性质。,17,固定相对分离的影响 流动相：CO2+MeOH + 10 mM NH4OAc,Ibuprofen, 布洛芬,18,19,3. 其他参数的影响,柱压力是重要参数，必须与温度配合将流动相控制在超临界态的单相区。 温度的影响较为复杂，一般大于或等于临界温度。 流速可远大于液相色谱流速,20,6.4 应用,1.齐聚物的分析,21,2. 甘油三酯 3. 手性对映体 4. 制备 ,色谱柱：DB-225 SFC毛细管柱； 流动相： CO2 ；从15MPa程序升压到27MPa,22,从理论上讲，SFC即可分析GC中不适用的高沸点、低挥发性样品，又比HPLC有更高的柱效和更快的分析速度。 SFC可选用GC和HPLC的检测器，与MS、FTIR等联用也较方便，从而使其在定性定量方面有较大的选择范围。 然而，SFC没有象预想的一样飞速发展，why?,