基因扩增实验室标准操作规程文件发放记录发放号发放日期正本副本号发放专业组保管人文件修改记录序号文件名称页数需更改内容更改内容批准人批准日期目 录PCR实验室各区工作制度及程序【PCR(N)-SOP-001】1PCR实验室人员配置及管理【PCR(N)-SOP-002】3PCR实验室清洁程序【PCR(N)-SOP-003】4PCR实验室废弃物处理程序【PCR(N)-SOP-004】5PCR实验室化学试剂配制程序【PCR(N)-SOP-005】6PCR实验室应急处理程序【PCR(N)-SOP-006】7PCR实验室试剂质检标准操作程序【PCR(N)-SOP-007】9乙型肝炎病毒核酸定量检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-101】11丙型肝炎病毒核酸检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-102】16人巨细胞病毒核酸定量检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-103】20结核分枝杆菌核酸检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-104】24人乳头瘤病毒（6,11型）核酸检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-105】28解脲脲原体核酸定量检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-106】32肺炎支原体核酸定量检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-107】36淋球菌核酸定量检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-108】40沙眼衣原体核酸检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-109】44单纯疱疹病毒型核酸定量检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-110】48EB病毒核酸定量检测标准操作程序【PCR(N)-SOP-111】52乙型肝炎病毒YMDD基因突变检测操作规程【PCR(N)-SOP-112】56ABI7500实时荧光定量PCR仪操作、维护及校准操作规程【PCR(N)-SOP-201】59恒温金属浴使用、维护、校准操作规程【PCR(N)-SOP-202】69移液器使用、维护、校准操作规程【PCR(N)-SOP-203】71台式高速冷冻离心机使用、维护、校准操作规程【PCR(N)-SOP-204】73Thermo Forma 1149 B2生物安全柜操作及维护保养程序【PCR(N)-SOP-205】75移动紫外线消毒车使用、维护、校准操作规程【PCR(N)-SOP-206】77冰箱操作维护规程【PCR(N)-SOP-207】79温湿度表校准程序【PCR(N)-SOP-208】80离心管抑制物质检试验操作程序【PCR(N)-SOP-209】81离心管爆管试验操作程序【PCR(N)-SOP-210】82标本唯一性编号操作规程【PCR(N)-SOP-211】83临床标本采集、接收、拒收操作规程【PCR(N)-SOP-212】84临床标本保存操作规程【PCR(N)-SOP-213】86室内质量控制操作规程【PCR(N)-SOP-301】87室间质量评价标准操作规程【PCR(N)-SOP-302】89PCR室实验室间比对标准操作规程【PCR(N)-SOP-303】90XXXXXXX医院检验科PCR实验室平面图92XXXXXXX医院检验科组织结构图93PCR实验室各区工作制度及程序发布部门:XXXXXX文件编号:PCR(N)-SOP-001分发范围: 检验科PCR室版本/修订号: A/0编写者: XX审核者:XXX批准者:XXX实施日期: 2012年5月1日1 目的：实现PCR实验室日常专人负责，确保实验室操作的规范性。2 实验室分区设置2.1.1 本院在检验科设置临床基因扩增实验室。2.1.2 按国家卫生部医疗机构临床基因扩增管理办法以及上海市医疗机构临床基因扩增检验技术审核办法的要求，从房屋配置、装修、采光、通风、隔离等条件将实验室设置分为试剂准备、贮存区（第一区）、标本制备区（第二区）及扩增和产物分析区（第三区）三个独立区域。各区门前有醒目标志，每个区都设置缓冲区，用于更换工作服、鞋套及维持空气流向。进入各个工作区域工作时，必须严格遵守单一方向顺序：即从第一区的试剂贮存、准备区第二区的标本制备区第三区的扩增及产物分析区。严禁误入和逆向进入各工作区。2.1.3 各区的实验物品（含移液器、试管架、吸头盒、记录本、笔等），不得混用，须贴上不同标签予以区别。2.1.4 各区配有不同颜色工作服：第一区试剂准备、贮存区为白色，第二区标本制备区为蓝色，第三区扩增及产物分析区为粉红色。进入各区实验室，必须更换本室有颜色标识的工作服，带上手套。3 各分区工作制度3.1 试剂贮存、准备区工作制度3.1.1 本区只进行如下工作：试剂的制备、分装和反应液的制备及试剂贮存；其它操作不得在此区进行。3.1.2 实验人员进入该区须穿本区专用蓝色工作服。实验中须戴一次性手套。3.1.3 记录实验室温湿度和冰箱的温度。3.1.4 根据当天所要检测标本的种类、数量，取出和配制当天实验所需的试剂，其余试剂要立即收好放回冰箱内。3.1.5 实验中所使用的离心管、吸头等需经高压灭菌处理，应在消毒有效期内使用。3.1.6 试剂准备工作完成后，将使用过的离心管、吸头置于盛2000mg/L有效氯消毒液的废物盒中，消毒清洁实验台面。3.1.7 将准备好的试剂放入一区到二区的传递窗。（注：传递窗的两扇门不能同时开启）；3.1.8 其他区的用品不得带入本区。3.1.9 作好每次实验记录，书写工整详细，使用本室专用的、带有本室标识的记录本和笔。3.1.10 实验完毕打开紫外灯消毒3060分钟，记录紫外灯使用情况。3.2 标本制备区工作制度3.2.1 本区只进行如下工作：临床标本的保存，核酸提取、贮存及加样至扩增反应管，RNA检测逆转录（RT）合成cDNA；其它操作不得在此区进行。3.2.2 实验人员进入该区须穿本室专用白色工作服。实验中须使用一次性手套，手套需常更换。3.2.3 从传递窗中取出试剂放入冰箱冷冻室试剂存放专区暂存。3.2.4 记录实验室温湿度和冰箱的温度。3.2.5 核对标本的编号、类型和标本数量。3.2.6 按操作规程在生物安全柜内进行标本的裂解、提取和加样，加样后，将其放入二区到三区的传递窗。（注：传递窗的两扇门不能同时开启）；3.2.7 使用带有本室专用标志的加样器以及经过消毒处理的离心管和带滤芯的一次性吸头。3.2.8 使用过的离心管、吸头须置于盛有2000mg/L有效氯消毒液的废物盒中。3.2.9 污染的处理：实验中若在操作台面上发生液体外泄，应立即用浸有2000mg/L有效氯溶液的滤纸覆盖发生污染处半小时，然后用酒精擦洗，并开启紫外灯消毒。3.2.10 作好每次实验记录，书写工整详细，使用本室专用的、带有本室标识的记录本和笔。3.2.11 标本处理完成后，关闭所有仪器，记录仪器使用时间和运行状态。3.2.12 其他区的用品不得带入本室。3.2.13 实验完毕要开启紫外灯消毒3060分钟，记录紫外灯使用情况。3.3 扩增及产物分析区工作制度3.3.1 本区只进行如下工作：DNA或cDNA的扩增、实时荧光PCR扩增产物的分析、结果判断、记录结果和生成检测报告等；其它操作不得在此区进行。3.3.2 实验人员进入该区须穿本区专用粉红色工作服。实验中须使用一次性手套，手套需常更换。3.3.3 记录实验室温湿度。3.3.4 将从传递窗接收来的加好样离心后的反应管上机扩增。3.3.5 扩增结束后，关掉扩增仪。记录仪器使用时间和运行状态。3.3.6 扩增结果分析完后，在工作清单中填入检测结果。3.3.7 得到当天室内质控结果后，输入质控软件。3.3.8 作好每次实验记录，书写工整详细，使用本室专用的、带有本室标识的记录本和笔。3.3.9 实验完毕要打开紫外灯消毒3060分钟，记录紫外灯使用情况。4 批准记录批准人批准时间有效期1年；其他：1年；其他：1年；其他：1年；其他：1年；其他：PCR实验室人员配置及管理发布部门:XXXXXX医院检验科文件编号:PCR(N)-SOP-002分发范围: 检验科PCR室版本/修订号: A/0编写者: XX审核者:XXX批准者:XX实施日期: 2012年5月1日1 目的：保证实验室有足够数量的合格的具备开展该类实验能力的实验人员。2 适用范围：适用于实验室人员配置、管理、培训及考核。3 细则：3.1 人员要求3.1.1 本实验室工作人员应为医学检验专业或相关专业毕业，具有初级以上技术职称或专科以上学历。3.1.2 实验室工作人员应参加上海市临床检验中心举办的PCR技术培训，并取得临床基因扩增检验技术上岗证。3.1.3 对于新进入本室的人员，如尚未取得PCR技术培训合格证，应在实验室有培训合格证的上级技术人员的指导下进行实验工作，实验报告由有资格人员出具，并应尽快取得上岗培训合格证。3.2 人员配置3.2.1 实验室应根据工作需要配备足够的工作人员，目前实验室有主管技师2人、技师3人，5人都已获得培训合格证，视工作量的增加和业务发展需要，会适当增加工作人员。3.2.2 各级技术人员履行相应的工作职责。3.3 人员培训及考核3.3.1 实验室工作人员每12年至少参加1次PCR技术的省级或国家级继续教育项目，参加相关学术交流会议。3.3.2 安排未取得上岗培训合格证的工作人员在合适的时间内参加技术培训。3.3.3 科室每周组织实验室内部实验人员进行业务小讲课、PCR实验室人员每月进行本小组内核酸扩增方面的相关培训，提升自身的理论学习水平。3.3.4 本实验室工作人员每年至少进行考核一次。3.4 人员管理实验室建立所有工作人员的技术档案，包括：学历、任职资格、发表论文、研究成果、培训等相关材料复印件。PCR实验室清洁程序发布部门:XXXXXXXX医院检验科文件编号:PCR(N)-SOP-003分发范围: 检验科PCR室版本/修订号: A/0编写者: XXXX审核者:XXX批准者:XXXX实施日期: 2012年5月1日1 目的：保证实验室环境的整洁，防止污染。2 适用范围：适于实验室工作环境、实验台面、工作服、移液器等的清洁消毒工作。3 细则：3.1 实验室地面必须平整、干净，通道要利于通行，没有无用的物品阻碍。3.2 合理规划实验室内物品，做到摆放整齐、有序，无