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鸭源砀球菌的细跑壁蛋白鉴定和致病性的关系的研究 摘要 以临床分离的株鸭源肠球菌(郑株、郑株、 郑株、北京株)和株粪 肠球菌(参考株)为研究对象,根据其部分生物学特性将各菌株鉴定到种;人工感 染雏鸭及小自鼠,比较各菌株的致病力强弱,探讨肠球菌的致病特点和致病机制; 提取各菌株的细胞壁蛋白,制备抗原、抗体,并采用,和技 术比较各菌株细胞壁蛋白的异同。借以对分离菌株进行更细致的表型分析,探讨肠 球菌的胞壁蛋白的差异性与其致病力强弱之间是否存在着关联,从而为该病的致病 机制和免疫机制的更深入研究提供理论依据。 对株鸭源肠球菌临床分离株和株粪肠球菌参考菌株的形态特征、培养特 性、生理生化特性、 对药物的敏感性等生物学特性 进行了初步研究,旨在将这株 临床分离菌株准确鉴定到种,为以后的致病性试验和不同菌株细胞壁蛋白的比较分 析奠定基础。结果个被检菌株在光学显微镜下呈球形、革兰氏阳性染色和链状排 列方式,以及能在、 和肉汤等条件下生长的特性均符合肠球菌 属的特征,各菌株生化反应特性与粪肠球菌特性基本一致,因此将这个菌株均鉴 定为粪肠球菌。药敏试验结果发现它们均对青霉素、万古霉素和庆大霉素敏感而对 四环素耐药。 复制 雏鸭感染肠球菌病理模型,观察各组鸭感染后的主要临床症状和病理变 化,计算各组感染鸭的发病率、死亡率和细菌分离率;同时测定各菌株对小白鼠的 半数致死量,观察感染小鼠的主要临床症状和病理变化。旨在比较不同菌株的致病 力强弱,找出高致病力菌株,揭示 肠球菌的致病特点和致病机制。结果显示个菌 株对雏鸭和小白鼠均有致病性,且以北京株致病力最强,其感染雏鸭的发病率、死 亡率和细菌分离率均明显高于另外株;北京组感染鸭早于其它组出现临床症状且 症状最明显,病理变化也较其它组严重;北京株对小白鼠的明显低于其它株, 对感染小鼠的病理损伤也较其它组严重。感染鸭主要剖检变化为心包积液,心外膜 和气囊表面附着有纤维素性炎性渗出物,肝脏肿大、淤血、出血和坏死,以及脾脏 肿大等;镜下主要发现病鸭心肌出 卧嘌仔韵赴笠约捌嗔馨拖赴 跎俚?等。 将各菌株的 培养物离心,沉淀用溶菌酶处理后经超声波粉碎菌体细 胞,再将裂解物离心,取沉淀得细胞壁制备物。 该细胞壁制备物再经饱和硫酸 铵纯化即得细胞壁蛋白。采用技术分离各菌株的细胞壁蛋白,比较各菌 株蛋白图谱的异同。采用半干转印系统将分离的各抗原蛋白带转印到 膜上,与常规方法免疫家兔制备的抗北京株胞壁蛋白的抗血清进行 分折,柃测各抗原蛋白的免疫学活性。结果各菌株的细绝壁蛋白经 在分子量之间均显示十多条蛋白带;而用抗北京株胞壁蛋白血清作 华中农业大学届硕论文来检测各菌株的胞壁蛋白,则只能识别出北京株的抗原蛋白带而识别不出其它个蘸株的蛋白带,且北京株所碱测到的蛋白中以的蛋白带显色最清晰。 关键词:鸭;肠球菌;鉴定;致病性;胞壁蛋白: 鸭原肠球菌的细胞壁蛋白鉴定和致病性的关系的研究 , , , , : , , 。, , ” , , , , 托 , , , , , ? () 正 , , , , , , , , ()() () , , , 华中农业大学届硕论文 , :; 鸭源肠球菌的细日赶壁蛋白霉定和致病忭的关系的研究 过硫酸铵
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